CXCR4在急性白血病的表达及临床研究

高静 陈蓓蕾 安庆玲 田林涛 田亚宁 王越月 何春玲 董昌虎

CXCR4在急性白血病的表达及临床研究

高静 陈蓓蕾 安庆玲 田林涛 田亚宁 王越月 何春玲 董昌虎

目的 探讨CXCR4在各类型急性白血病骨髓组织中的表达及临床意义。 方法 应用免疫组织化学染色法检测急性白血病45例及15例非恶性血液病患者正常骨髓组织中CXCR4的表达, 并分析与疾病病理类型、浸润及预后的关系。 结果 正常组织、急性髓细胞白血病(AML)组、急性淋巴细胞白血病(ALL)组中CXCR4的表达阳性率依次增高, 差异有统计学意义(P＜0.05)；髓外浸润组中CXCR4的表达高于非髓外浸润组。 结论 CXCR4高表达于各类型急性白血病中, 可作为检测指标之一；且CXCR4表达与急性白血病预后有密切关系；针对CXCR4的靶向治疗有望成为治疗急性白血病新的方向。

CXCR4；急性白血病

急性白血病(acute leukemia, AL)是造血干细胞的恶性克隆性疾病, 由于骨髓中异常细胞大量增殖且严重影响正常造血, 广泛浸润肝脏、脾脏、淋巴结、神经系统等, 预后极差。趋化因子12又称基质细胞源性因子1(SDF21), 是新发现的一类具有趋化活性的重要细胞因子 , 与其特异性受体 CXCR4所组成的SDF21/CXCR4 轴参与多种病理生理过程, 特别在造血干细胞的生成、分化、迁移及归巢, 血液系统肿瘤的浸润转移等有重要作用。本研究通过免疫组织化学染色法检测急性白血病及正常骨髓组织中CXCR4的表达水平, 并分析与病理类型、转移、预后的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2009年1月～2014年12月陕西中医学院第二附属医院血液科确诊初发急性白血病45例, 其中男26例, 女19例, 年龄7～58岁, 中位年龄39岁, 急性髓细胞白血病30例, 其中M29例、M38例、M46例、M57例；急性淋巴细胞白血病15例, 其中L14例、L29例、L32例；另取同期本科确诊非恶性血液病15例为对照组；以上诊断及疗效评价均参照张之南《血液病诊断及疗效标准》(第3版)。

1.2 试剂与方法 取本院病理科封存骨髓组织块, 制成2～3 μm组织切片；兔抗人CXCR4单克隆抗体购自Abcam公司, 免疫组织化学染色DAB试剂盒购自北京中杉金桥试剂公司, 采用免疫组织化学SP法染色, 按试剂盒说明书进行操作。

1.3 结果判定 显微镜下细胞中出现浅黄色、黄色颗粒着色者为阳性细胞, 随机选取5个视野, 统计阳性细胞占肿瘤细胞比例, ＜10%为阴性(-), 10%～50%为阳性(+), ＞50%为强阳性(++)。

1.4 统计学方法 用SPSS18.0统计学软件处理数据。计数资料以率(%)表示, 实施χ2检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CXCR4在急性白血病和正常组织中的表达 正常组织、AML、ALL组中CXCR4的表达阳性率(+和++)依次增高,差异具有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 三组中CXCR4的表达［n(%)］

2.2 急性白血病髓外浸润组与非髓外浸润组中CRCX4的表达 AL中具有以下体征之一即为髓外浸润：肝脏或脾脏肿大；淋巴结肿大；中枢神经系统受累；皮肤结节；牙龈增生肿胀；睾丸肿大；根据以上标准将AL分为髓外浸润组32例和非髓外浸润组13例, 其中髓外浸润组CXCR4表达阳性率为62.5%(20/32), 非髓外浸润组CXCR4表达阳性率为23.1%(3/13), 差异具有统计学意义(P＜0.05)。

3 讨论

SDF21是由骨髓基质细胞及相关上皮细胞、间皮细胞分泌的小分子趋化蛋白, 是趋化因子CXC亚家族的一员,CXCR4作为SDF21重要受体, 其N端与之特异性结合, 从而启动下游相关信号通路形成SDF21/CXCR4生物轴, 其对维持胚胎发育过程, 干细胞迁移, 造血细胞的生成、分化、迁移及归巢, 调节免疫炎性反应, 正常或肿瘤新生血管形成,肿瘤的发生、发展、侵袭及转移等都起非常重要的作用［1］。

目前多项研究表明, CXCR4能够在多种肿瘤细胞中表达, 是表达于肿瘤细胞上最为普遍的趋化因子受体, 王明正等［2］研究表明CXCR4高表达于非小细胞癌中, 且与淋巴结转移TNM分期呈正相关；姚斌等［3］通过检测CXCR4在各类型骨肉瘤中表达发现, CXCR4不仅在各组织中表达阳性,且表达随着肿瘤组织恶性程度的增高而增高；尹东等［4］发现CXCR4高表达于口腔鳞状细胞癌中, 且与淋巴结转移有重要关系。

本研究应用免疫组化染色法对45例AL及15例正常的骨髓组织中CXCR4的表达进行检测, 在AL中CXCR4阳性23例, 占51.1%, 其中男14例、女9例, 不同性别间, 差异无统计学意义(P＞0.05), 在不同AL类型中可见CXCR4的分布差异, 其中ALL阳性11例(L12例、L28例、L31例), 占73.3%；AML阳性12例(M22例、M33例、M43例、M54例),占40%；正常骨髓组织中CXCR4阳性2例, 占13.3%；由此可见, CXCR4高表达于AL组织中, 且表达与AL的类型关系密切, ALL中CXCR4的表达明显高于AML, 且AML中M4+M5表达高于M2+M3。

尽管目前治疗白血病方案层出不穷, 但白血病细胞的迁移侵袭仍是导致预后差的重要原因, 本研究还发现在急性白血病髓外浸润组中CXCR4的表达明显高于非髓外浸润组,与张宝玺等［5］对AL患儿研究结果相符, 这表明CXCR4在白血病细胞迁移进入外周血、浸润过程中起重要作用。近年来, 越来越多的国外研究者证明高表达CXCR4的AL患者生存期短, 预后差。由此, 当AL高表达CXCR4时, 预示白血病细胞迁移侵袭能力较强, 可通过检测CXCR4的表达来提示髓外浸润可能, 以期早期治疗, 改善患者预后。

综上所述, SDF21/CXCR4 轴对于恶性肿瘤的影响越来越多的受到重视, 其在急性白血病的表达并发展、转移、浸润都有重要的作用, 由此, 对于特异性的抑制CXCR4的表达,降低肿瘤细胞的增殖活性, 从而抑制白血病细胞的转移、侵袭能力, 这必将成为急性白血病的新的治疗方向。

［1］ 王峰, 张声.CXCR4与肿瘤的发生和发展.临床与病理杂志, 2014, 34(1):76-80.

［2］ 王明正, 白峰, 刘佳坤, 等.CXCR4、VEGF在非小细胞肺癌组织中的表达及意义.现代肿瘤医学, 2013, 21(9):1989-1991.

［3］ 姚斌, 夏冰, 卞峰, 等.CXCR4在骨肉瘤中的表达和临床意义.中华全科医学, 2014, 12(1):12-14.

［4］ 尹东, 张佐, 高素, 等.趋化因子受体CXCR4及其配体CXCL12在口腔鳞状细胞癌细胞增殖和迁移中的作用.华西口腔医学杂志, 2013, 31(1):8-12.

［5］ 张宝玺, 马夫天, 赵晓庆, 等.急性白血病患儿血浆基质细胞衍生因子-1及其受体CXCR4表达的临床意义.中华实用儿科临床杂志, 2010, 25(6):427-429.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.14.026

2015-03-10］

712000 陕西中医学院(高 静 陈蓓蕾 安庆玲田林涛 董昌虎)；陕西中医学院第二附属医院(田亚宁 王越月何春玲 董昌虎)

董昌虎