泛发性湿疹患者外周血淋巴细胞亚群的研究

韩 莹 程 欣

泛发性湿疹患者外周血淋巴细胞亚群的研究

韩 莹 程 欣

目的 探讨泛发性湿疹患者的免疫功能变化。方法 应用流式细胞仪分析检测200例泛发性湿疹患者(泛发性湿疹组)外周血中的淋巴细胞亚群, 并与200例正常人(正常组)进行比较。结果 与正常组相比泛发性湿疹组的CD3+T细胞降低, CD3+CD4+T细胞降低, CD3+CD8+T细胞升高, CD3-CD16+56+NK细胞降低, CD4+/CD8+降低, 差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 免疫功能的紊乱是泛发性湿疹患者发病的一个重要机制, 在泛发性湿疹的发生、发展过程中可能起到重要的作用。

泛发性湿疹；淋巴细胞亚群；流式细胞分析法

泛发性湿疹是一种泛发或散发于全身多个部位的炎症性、瘙痒性皮肤病, 具有皮肤多形性、瘙痒剧烈、渗出倾向、反复发作、难以治愈的临床特点。泛发性湿疹病因不明, 一般认为是多种内外因素作用所致的迟发型变态反应。为了进一步探讨泛发性湿疹发病与机体免疫功能的关系, 作者对200例泛发性湿疹患者的淋巴细胞亚群的状态进行观察, 分析结果如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 200例泛发性湿疹患者(泛发性湿疹组)均系2013年8月～ 2014年8月本院皮肤科确诊病例, 其中男108例, 女92例, 年龄18～70岁, 平均年龄(47.82±21.00)岁。所有患者均无其他免疫系统及心血管系统疾病。检测前1个月内未接受过任何免疫治疗。正常组200例均为本院健康体检者, 其中男105例, 女95例, 年龄22～70岁, 平均年龄(46.48±15.00)岁。两组性别和年龄比较差异无统计学意义(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 主要试剂与仪器 美国Becton-Dickinson(BD)公司生产的Simultest IMK Lymphocytes Kit检测试剂盒, 其组成Isotype Control(MouseIgG1/IgG2a)；CD3-FITC/CD19-PE；CD3-FITC/ CD4-PE；CD3-FITC/CD8-PE；CD3-FITC/CD16+CD56-PE；FACS Lysing Solution红细胞裂解液。流式细胞仪由美国Becton-Dickinson(BD)公司生产, 型号为FACSCalibur型。

1.3 方法 流式细胞分析法：抽取静脉血2 ml, 用20 IU/ml EDTA-K2抗凝, 取流式上样管加荧光抗体20 μl与0.1 ml抗凝血混匀, 室温避光反应20 min, 加10%溶血素混匀, 室温避光反应10 min, 待管内液体透亮, 然后1500 r/min离心5 min, 弃上清, 后加入1 ml磷酸盐缓冲液(PBS)混匀, 1500 r/min离心5 min, 弃上清, 然后加入0.5 ml PBS混匀, 制成单细胞悬液标本, 通过流式细胞仪对待测细胞进行检测分析。

1.4 统计学方法 采用SPSS15.0统计学软件对数据进行统计分析。计量资料以均数±标准差( -x±s)表示, 采用t检验；计数资料采用χ2检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

泛发性湿疹组与正常组外周血淋巴细胞亚群检测结果中, CD3+T细胞降低, CD3+CD4+T细胞降低, CD3+CD8+T细胞升高, CD3-CD16+56+NK细胞降低, CD4+/CD8+降低, 差异有统计学意义(P＜0.05), CD3-CD19+比较差异无统计学意义(P＞0.05)。见表1。

表1 两组淋巴细胞亚群检测结果比较( x-±s)

3 讨论

湿疹的病因和发病机制复杂, 有研究表明免疫功能异常是其发病的重要环节［1,2］。本研究中显示泛发性湿疹组与正常组相比较, CD3+CD4+T细胞降低, CD3-CD16+56+NK细胞降低, 说明泛发性湿疹患者T细胞、NK细胞功能发生紊乱, 与文献相符［3］, 但本研究还显示了CD3+CD8+T细胞升高, 可能因为CD3+CD8+抑制了细胞毒性T细胞杀伤功能,使机体处于免疫抑制状态, 进而使机体逃避免疫监视, 因此CD3+CD8+升高可能是导致湿疹泛发的一个重要因素。CD4+/ CD8+比值体现T淋巴细胞各亚群之间相互制约, 相互协助,处于动态平衡, CD4+/CD8+比值降低进一步反映T淋巴细胞的功能紊乱状态。

综上所述, 在泛发性湿疹的发生、发展的过程中细胞免疫起到了重要的作用, 认为其细胞免疫功能、免疫调节可能受到一定影响, 致人体免疫失调, 可能是泛发性湿疹反复发作的一个重要的内因。

［1］ 周淑英, 刘玉峰, 夏汝山, 等.皮炎湿疹患者外周血单个核细胞分泌Th1/Th2细胞因子和水平检测及意义.第四军医大学学报, 2001, 22(24):2266-2268.

［2］ 顾恒.特应性皮炎的免疫疗法.国外医学皮肤性病学分册, 1999, 25(3):135-138.

［3］ 后桂荣, 曾抗, 周再高.湿疹患者T淋巴细胞亚群及自然杀伤细胞的检测及意义.临床皮肤科杂志, 2003, 32(9):522.

Research of lymphocyte subpopulation in peripheral blood of generalized eczema patients

HAN Ying，CHENG Xin.
Department of Dermatology， Shenyang City the Seventh People’s Hospital， Shenyang 110003， China

Objective To investigate changes of immunologic function in generalized eczema patients.Methods Lymphocyte subpopulation in peripheral blood of 200 generalized eczema patients (generalized eczema group) were detected by flow cytometry method, and they were compared with those in 200 normal people (normal group).Results Compared with the normal group, the generalized eczema group had decreased CD3+T cells, CD3+CD4+T cells, CD3-CD16+56+NK cells, CD4+/CD8+T cells, and increased CD3+CD8+T cells.The difference had statistical significance (P＜0.05).Conclusion Immune function disorder is one of the main mechanism of generalized eczema patients, and it acts with important effect in occurrence and progress of generalized eczema.

Generalized eczema; Lymphocyte subpopulation; Flow cytometry method

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.21.022

2015-01-28］

110003 沈阳市第七人民医院皮肤科

程欣