罗格列酮治疗对脓毒症肺损伤患者血清HMGB1、TNF-α及Th1/Th2影响研究

李强，吴建顺，李慧

(青海省中医院 急诊科，青海 西宁 810000)



罗格列酮治疗对脓毒症肺损伤患者血清HMGB1、TNF-α及Th1/Th2影响研究

李强，吴建顺，李慧

(青海省中医院 急诊科，青海 西宁 810000)

目的 探讨罗格列酮辅助治疗对脓毒症肺损伤患者血清高迁移率族蛋白-1(high mobility group box1，HMGB1)、TNF-α及Th1/Th2影响研究。方法 收集青海省中医院2013年8月～2014年8月收治的60例脓毒症肺损伤患者，按照用药方法随机分为实验组和对照组，各30例。对照组给予常规西医综合对症治疗，包括重症监护、胃肠减压、禁食水、补充血容量、抗炎、维持水和电解质平衡、改善微循环等。实验组在对照组治疗基础上给予患者罗格列酮，2次/天，2周为1个疗程，于1、3、7、14 d对所有患者的血清血清HMGB1、TNF-α及Th1/Th2进行检测。结果 治疗后，与对照组相比，实验组患者各指标均显著改善，血清HMGB1水平降低显著(P<0.05)；血清TNF-α水平降低较为显著(P<0.05)；血清Th1/Th2比值降低显著(P<0.05)。结论 罗格列酮辅助治疗能够显著降低HMGB1、TNF-α水平及Th1/Th2比值。

罗格列酮；脓毒症；肺损伤；HMGB1；TNF-α；Th1；Th2

脓毒症是严重感染、重症胰腺炎、重度烧伤、严重创伤及大手术后等常见并发症，是由于各种病原体侵入感染体内组织器官，引起全身剧烈炎症的反应综合征[1]。脓毒症时受损伤的脏器中，肺脏最易受累[2]，急性肺损伤(acute lung injury，ALI)在脓毒症患者中发生率最高[3]，其顽固性的低氧血症和呼吸窘迫是导致患者死亡的主要原因之一，病死率高达30%～50%[4]，严重威胁着人类的健康。目前对于脓毒症患者临床多采取抗感染、抗炎、抗休克以及呼吸、循环和营养支持等对症治疗的措施，疗效并不显著。罗格列酮属于噻唑烷二酮类胰岛素增敏剂，增加脂联素基因表达及循环血中脂联素水平。脂联素(adiponectin，APN)为内源性活性蛋白，主要由脂肪组织特异性分泌，是重要的免疫反应负性调节因子[5]。研究已证实，APN具有保护心血管系统、抗慢性炎症、改善胰岛素抵抗及调节脂代谢等功能[6]。本文通过观察脂联素辅助治疗对脓毒症肺损伤患者血清高迁移率族蛋白-1(high mobility group box1，HMGB1)、TNF-α及Th1/Th2影响，来探究脂联素辅助治疗对脓毒症肺损伤患者的疗效。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集青海省中医院收治的2013年8月～2014年8月收治的60例脓毒症肺损伤患者，随机分为实验组和对照组。实验组男15例，女15例，年龄 28～70 岁，平均年龄(50.35±11.85)岁；对照组30例，男14例，女16例，年龄 25～69 岁，平均年龄(49.47±10.38)岁。所有患者均符合《2008严重脓毒症和脓毒症休克管理指南》解读(五)——脓毒症诱导急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征的机械通气治疗》[7]的诊断标准。

1.2 纳入标准 所有患者年龄≥18岁及≤70岁；APACHE Ⅱ评分≥6分；无贫血，白血病等血液系统疾病；无肝脏，肾脏等脏器恶性肿瘤；所有患者同意进行实验措施，并签署知情同意书，本实验获得本院伦理协会批准，全程跟踪随访。

1.3 排除标准 排除不符合上述诊断标准和纳入标准者；排除孕妇或哺乳期妇女、儿童；排除病人处于濒死状态(估计在12 h内死亡)；排除伴有严重慢性脏器功能障碍疾病；排除已接受药物或其他治疗者。

1.4 方法

1.4.1 治疗方法：对照组给予常规西医综合对症治疗，包括重症监护、胃肠减压、禁食水、补充血容量、抗炎、维持水和电解质平衡、改善微循环等。实验组在对照组治疗基础上给予患者罗格列酮，2次/天，2周为一个疗程。分别观察并且记录2组患者入院后1、3、7、14 d生命体征、常规检查、脏器功能评价等各项指标变化情况。

1.4.2 患者血清HMGB1的水平测定：分别对所有患者于1、3、7、14 d早晨抽取外周静脉血5 mL，离心取上清，采用生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测患者血清HMGB1的水平，严格按照HMGB1试剂盒说明书操作。

1.4.3 患者血清TNF-α的水平测定：分别对所有患者于1、3、7、14 d早晨抽取外周静脉血5 mL，离心取上清，采用生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)患者血清TNF-α水平，严格按照TNF-α试剂盒说明书操作。

1.4.4 患者血清Th1/Th2的水平测定：分别对所有患者于1、3、7、14 d早晨抽取外周静脉血5 mL，采用放射免疫法检测患者外周血Th1、Th2水平，并计算其比值。

2 结果

2.1 患者一般情况比较 实验组与对照组患者在男女比例，平均年龄和APACHE Ⅱ评分等方面的资料差异无统计学意义。见表1。

表1 2组患者一般情况表±s)Tab.1 Comparison of the baseline of two ±s)

2.2 治疗前后患者HMGB1水平比较 治疗后，2组患者的HMGB1水平均呈下降趋势，与前一时间点比较，后一时间点HMGB1水平较低(P<0.05)，与对照组相比，同一时间点实验组HMGB1水平较低(P<0.05)。见表2。

表2 治疗前后患者HMGB1水平比较Tab.2 Comparison of HMGB1 of two groups pre- and ±s)

*P<0.05，与前一时间点比较，compared with previous time；#P<0.05，与对照组相比，compared with control group

2.3 治疗前后患者TNF-α的水平比较 治疗后，2组患者的TNF-α水平均呈下降趋势，与前一时间点比较，后一时间段TNF-α水平较低(P<0.05)，与对照组相比，同一时间段实验组TNF-α水平较低(P<0.05)。见表3。

表3 治疗前后患者TNF-α水平比较Tab.

*P<0.05，与前一时间点比较，compared with previous time；#P<0.05，与对照组相比，compared with control group

2.4 治疗前后患者Th1/Th2的水平比较 治疗后，2组患者的Th1/Th2水平均呈下降趋势，与前一时间点比较，后一时间段Th1/Th2水平较低(P<0.05)；与对照组相比，同一时间段实验组Th1/Th2水平较低(P<0.05)。见表4。

表4 治疗前后患者Th1/Th2水平比较Tab.4 Comparison of Th1/Th2 of two groups pre- and ±s)

*P<0.05，与前一时间点比较，compared with previous time；#P<0.05，与对照组相比，compared with control group

3 讨论

脓毒症的发病率逐年递增，其中急性肺损伤和急性呼吸窘迫综合征是目前临床上脓毒症患者死亡的主要原因。脓毒症的发生与免疫功能失衡密切相关[8]。细菌和内毒素等侵入肠道血液循环，机体免疫系统被过度激活，而从引起全身性炎症反应综合征。脓毒症可继发多器官损害等严重疾病，其大量释放的炎性细胞首先侵袭肺脏，并引发急性肺损伤。内毒素是脓毒症急性肺损伤全身性炎症反应的触发剂，多种免疫指标参与免疫抑制及调节。免疫细胞释放促炎细胞因子，从而启动炎症级联反应。研究表明，罗格列酮可显著提高脓毒症小鼠的生存率，抑制晚期炎症介质HMGB1的表达，促进脂联素的分泌[9]。脂联素是多种生物学活性的分泌型蛋白，属于免疫负性调节因子[10]，可通过抑制致炎因子的释放，实现其抗炎作用。

HMGB1是相对于TNF-α的晚期促炎症因子。晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced gly-cation end products，RAGE)是HMGB1的主要受体，在正常组织中RAGE低表达，在T细胞、巨噬细胞等炎性细胞中高表达。HMGB1分泌后与RAGE在细胞表面结合，激发细胞内多种信号转导机制，从而使细胞释放其他因子，导致机体损伤。本研究结果显示，治疗后，与治疗前相比，2组患者的HMGB1水平均显著降低(P<0.05)；与对照组水平相比，实验组患者的HMGB1水平降低较明显(P<0.05)。有研究显示，脓毒症所导致的死亡常发生致炎症细胞因子恢复正常水平8h后，巨噬细胞开始分泌HMGB1，HMGBl可以激活单核/巨噬细胞，释放细胞因子，如TNF-α、IL-β和IL-6等，释放的细胞因子又可进一步激活单核/巨噬细胞，形成正反馈反应。HMGB1其胞外功能依赖B Box结构域，而单独的A Box肽段则可以抑制HMGBl或B Box肽段的作用。HMGB1不仅参与了脓毒症、急性肺损伤等急性炎症过程，而且参与了类风湿性关节炎(rheumtoid arthritis，RA)、系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)等自身免疫性炎症过程。在炎症反应中，HMGB1可以促进中性粒细胞黏附于血管内皮，进而渗出到炎症部位发挥抗炎作用，并且发现这种作用依赖于RAGE和B2整合素MACF-1[11]。

脓毒症早期机体可以产生大量的TNF-α、IFN-γ/IL-2等炎症细胞因子，炎症细胞因子TNF-α、IL-1β在脓毒症中是最早释放的因子之一，故称前炎症期细胞因子[12]。巨趣细胞是细胞因子生成的主要来源之一，TNF-α不断刺激活中性粒细胞和巨噬细胞等，炎症细胞聚集并释放炎症细胞因子，产生“级联放大作用”。本研究结果显示，脂联素辅助治疗后，2组患者的TNF-α水平均显著降低，与治疗前相比，差异具有统计学意义(P<0.05)；治疗后，与对照组水平相比，实验组患者的TNF-α水平降低较明显，差异具有统计学意义(P<0.05)。可见，脂联素可以有效地降低TNF-α的水平，抑制淋巴细胞的凋亡，调节免疫系统的紊乱,从而对脓毒症肺损伤患者产生保护作用。

T辅助细胞(Th)根据功能不同分为Th1和Th2 2个亚群，Th1和Th2可反映机体细胞免疫功能状态，Th1细胞分泌IFN-γ、IL-2、IL-6、IL-8等，增强宿主对微生物感染的防御功能。Th2 细胞分泌IL-4、IL-5、IL-6等，对微生物感染起负性调节作用。Th1淋巴细胞和Th2淋巴细胞分别通过各自产生的细胞因子发挥相互调节和相互制约作用。Th1/Th2平衡变化是体内炎症反应与抗炎反应免疫平衡变化的基础，反映了机体细胞免疫功能。本实验结果显示，脓毒症肺损伤的患者Th1/Th2比值明显较高，经脂联素辅助治疗后，2组患者的Th1/Th2比值均显著降低(P<0.05)；与对照组水平相比，实验组患者的Th1/Th2比值降低较明显(P<0.05)。Th1/Th2平衡向Th2方向漂移提示脓毒症肺损伤出现免疫抑制，出现以Th2为主的免疫反应及淋巴细胞的凋亡。有研究证实，脂联素可以调控IL-6和IL-10的表达[13]，本研究实验组患者治疗后Th1/Th2比值明显降低，提示可能通过调控IL-6和IL-10的水平而降低了Th1/Th2比值。

本研究通过探究罗格列酮辅助治疗对脓毒症肺损伤患者血清HMGB1、TNF-α及Th1/Th2影响，证实了罗格列酮辅助治疗能够显著降低HMGB1、TNF-α水平及Th1/Th2比值。本实验得出的结论及反映的现象将在下一步研究中进一步论证。

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(编校：王冬梅)

Effect of rosiglitazone on serum HMGB1, TNF-α and Th1/Th2 in patients with lung injury induced by sepsis

LI Qiang, WU Jian-shun, LI Hui

(Department of Emergency, Traditional Chinese Medicine Hospital of Qinghai Province, Xining 810000, China)

ObjectiveTo investigate the effect of rosiglitazone on serum HMGB1,TNF-α and Th1/Th2 in patients with lung injury induced by sepsis.Methods60 patients with sepsis lung injury in our hospital from August 2013 to August 2014, were randomly divided into experimental group and control group according to the medication methods, 30 cases in each group, control group was given conventional western medicine treatment, including intensive care, gastrointestinal decompression, fasting water, added blood volume, anti-inflammatory, maintenance of water and electrolyte balance, improve microcirculation, etc. On the basis of control group, experimental group was treated with rosiglitazone, two times per day, two weeks as a course of treatment. Serum HMGB1, TNF-α, Th1/Th2 were detected in 1, 3, 7, 14 days in all patients.ResultsCompared with control group post-treatment,serum HMGB1,TNF-α and Th1/Th2 ratio were significantly decreased in the experimental group (P<0.05).ConclusionRosiglitazone can significantly reduce the levels of serum HMGB1,TNF-α and Th1/Th2.

rosiglitazone; sepsis; lung injury; HMGB1; TNF-α; Th1; Th2

李强，男，本科，副主任医师，研究方向：急诊危重病，E-mail：qinghailiqiang@163.com。

R563

A

1005-1678(2015)08-0095-03