三种消毒剂在烟草漂浮育苗中控制TMV传播的药效试验*

尹利方，胡 昳 ，李志兵 ，赵晓红，张晓琼，胡靖祥 ，蒋淑萍 ，赵明方 ，罗清秀

（1.昆明学院农学院，云南 昆明 650214；2.云南省都市特色农业工程技术研究中心，云南 昆明 650214）

烟草漂浮育苗需要实施3～5次剪叶，剪叶又是病毒传播蔓延的主要途径。以TMV为代表的烟草病毒对烟草生产危害严重，为控制病毒对烟草生产造成的损失，培养健康烟苗在生产中意义重大。筛选安全、环保、有效的消毒剂对控制漂浮育苗中病毒病的传播蔓延是一项重要工作。目前，云南省全面推广烤烟漂浮育苗技术，至2004年推广面积已达27.67万hm2，占移栽大田面积的82.6%。影响烤烟漂浮育苗推广最大的病害是病毒病，因病毒病在大田发生后，没有较好的防治方法。烟草病毒病有“植物癌症”之称，该病的发生危害已成为烤烟生产向优质、适产、高效目标迈进的一个主要障碍。烟草普通花叶病在烤烟漂浮育苗过程中的发生危害具有“一株发病，危及全棚”的特点，已成为漂浮育苗技术推广的主要风险之一。为有效控制烤烟漂浮育苗阶段烟草普通花叶病的发生危害，必须对最容易传播该病的剪叶途径进行研究。剪叶是漂浮育苗工作中一项必不可少的程序，是达到培育整齐一致壮苗的重要手段，但同时他又是造成TMV传播污染的重要途径之一，所以在剪叶时应十分注意对工具的消毒。而当前生产中主要应用10%漂白粉和2%福尔马林等药剂进行消毒，很难达到预期效果，因此试用目前生产上应用的几种消毒药剂进行对比试验，从而筛选出符合生产实际的消毒药剂，为漂浮育苗用具消毒提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 供试材料

供试烟苗：按照烤烟漂浮育苗实用技术方法，选择云南农业大学后山试验基地温室大棚培育的健康试验用烟苗，品种为云烟85包衣种，试验时将162穴漂盘连同烟苗一起处理。

TMV毒源：TMV病株，纱网隔离盆栽作为试验用TMV毒源，接种时选择有明显花叶发病症状的叶片。

TMV接种毒液：取TMV接种发病明显的嫩叶，加入0.005 mol/L磷酸缓冲液（配方为磷氢二钾7.6 g、磷酸二氢钾 2.25 g、亚硫酸钠 1.26 g，pH 7.5）研磨后制成毒液，供试验用。

剪叶工具：普通剪刀。

1.2 试验设计

1.2.1 消毒药剂及配制方法

毒消：北京市东旺农药厂提供，24%混脂酸铜水乳剂。中国烟叶生产购销公司推荐农药，科技部国家级星火计划项目，农业部无公害农产品生产推荐农药，北京市高新技术成果转化项目。本产品烟草专用，防治病毒病。取毒消0.83 mL，加入500 mL自来水中，充分拌匀，为600倍液。

育宝：育宝为育苗专用消毒剂，由昆明育宝科技公司提供。主要成分三丹油，是一种高效低毒的水溶性杀菌剂，能杀死或抑制微生物的繁殖，是广谱型抗菌剂。取育宝2.5 mL，加入500 mL自来水中，充分拌匀，为200倍液。

博邦牌二氧化氯：由北京博邦食品配料公司提供。稳定性二氧化氯（简称二氧化氯）是继漂白粉、次氯酸钠、氯气等氯化消毒剂之后的第四代杀灭微生物的消毒产品，与传统的氯化消毒剂相比，该产品不产生致癌氯代烃（如三氯甲烷等），不受水质条件的制约，具有高效、广谱、性能稳定且无毒等特点，被世界卫生组织（WHO）确认为A1级环保杀菌消毒产品。广泛用于水产、食品保鲜、加工、饮用水的消毒、杀菌和除臭。其作用机理是活化后的ClO2在H+的作用下产生具有强氧化作用的新生态氧，能迅速附着在微生物细胞表面，渗入微生物的细胞膜，与微生物蛋白质中的氨基酸产生氧化分解反应，从而使氨基酸断裂、蛋白质失去活力而达到杀灭微生物的目的。取博邦牌二氧化氯0.62 g加入500 mL自来水中，充分拌匀，为800倍液。

1.2.2 试验处理

处理1：剪刀蘸取病毒液后用清水冲洗然后剪叶。

处理2：剪刀蘸取病毒液后放入博邦牌二氧化氯800倍液中消毒5 min，用清水冲洗后剪叶。

处理3：剪刀蘸取病毒液后放入育宝200倍液中消毒5 min，用清水冲洗后剪叶。

表1 不同剪叶处理TMV传染发病

表2 各处理药剂对烟草花叶病的预防效果

处理4：剪刀蘸取病毒液后放入毒消600倍液中消毒5 min，用清水冲洗后剪叶。

1.2.3 剪叶方法

待烟苗生长至猫耳期时，用剪刀蘸取TMV毒液，将染毒剪刀浸泡在各消毒剂中5 min，用清水冲洗后剪叶。按从左到右，从下到上的顺序，每苗剪3叶。 用0.1%三元烤烟专用复合肥 （10∶12∶24）为营养液。置于温室大棚内培养。剪叶后20 d调查计算各小区烟苗发病率。

1.2.4 试验设置

用每盘6～7叶期的漂浮育苗烟苗，剪叶后培养，每盘一个处理3次重复，共12个小区，随机区组排列。剪叶后的烟苗做好标记，中间做好防虫等管理工作。

1.3 TMV发病率调查

以出现典型花叶症状为标准，观察记录发病株数和健康株数。发病率（%）=发病总株数/调查总株数×100%，相对防效（%）＝（对照发病率－处理发病率）/对照发病率×100%

2 结果与分析

从表1可以看出，用不进行任何消毒处理的剪刀剪叶，花叶病发病率为50.41%。而用经过博邦牌二氧化氯800倍液、育宝200倍液、毒消600倍液消毒剂消毒的剪刀剪叶，花叶病发病率明显降低。相对防效分别为93.87%、67.03%、27.32%（表2）。结果表明，本试验所有供试消毒剂均能在短时间内杀死或钝化剪刀上的TMV，具有对TMV进行消毒的效果。

试验结果还表明，经博邦牌二氧化氯800倍液、育宝200倍液5 min浸泡消毒后，能高效抑制TMV在剪叶中的传播，各烟草漂浮育苗生产基地可结合本地实际，尽量采用博邦牌二氧化氯、育宝消毒剂，并对浓度和消毒时间进行搭配，达到有效控制TMV在剪叶过程中的传播。

3 讨论

烤烟漂浮育苗是当今世界上比较先进的一种育苗技术，近年来，我国大部分产烟区已经由过去的苗袋育苗转为漂浮育苗。采用漂浮育苗可以培育出无病、茎高、均匀一致的壮苗。其中，苗床剪叶则是达到这一目的的一项重要措施。苗床剪叶处理可以极显著增加烟苗茎粗，叶绿素含量也有增加的趋势，同时促进根系发育，提高烟苗的壮实和生产效率，还可预防早花。但烤烟漂浮育苗中病毒病传播、蔓延的最主要途径也是剪叶，所以应高度重视对剪叶工具的消毒。目前使用的10%漂白粉和2%福尔马林等药剂不能达到理想的效果。本试验结果表明使用博邦牌二氧化氯、育宝等可以达到杀灭病毒、阻断病毒通过剪叶刀片传播的目的。值得在生产中推广使用。为避免抗性的产生，建议交替使用。

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