临床血液检验中两种不同细菌鉴定法的应用

胡锦霞

(信阳市第四人民医院 检验科 河南 信阳 464006)

近些年来，抗生素在临床上的应用已越来越广泛，使得细菌的耐药性及对抗生素的敏感性发生了一定变化，从而给临床检验工作带来了一定难度。通过血液细菌鉴定法对患者的血液样品进行检测，可为相关疾病的诊断及治疗提供有效依据［1］。本研究主要就两种不同细菌鉴定法在临床血液检验中的应用作以下分析。

1 资料与方法

1．1 一般资料 研究资料选自信阳市第四人民医院2012 年7月至2013 年9 月收治的620 例发热合并全身感染患者，排除及纳入标准:①无血液系统疾病;②凝血功能无障碍;③入院前48 h内未服用任何药物及未接受任何治疗。通过无菌操作在患者发热初期或高峰期采集620 例血液标本，每人采集20 ml，以冷藏方式对标本进行保存，并尽快送检。

1．2 研究方法 同时使用常规药敏试验和直接药敏试验对每份标本进行检测，对两种检测方法所得细菌鉴定结果及药敏结果的符合率进行分析。

1．2．1 常规药敏试验 把血液标本分别接种在巧克力平板、麦康凯平板及血平板上，在浓度为5%、温度为35 ℃的CO2下孵育18 ～24 h 后，取出菌落涂片，行革兰氏染色镜检，结合检测结果选择相应的触酶或者进行氧化酶试验，使用URITEST －3000 生物鉴定仪对其进行鉴定，并行药敏试验［2］。

1．2．2 直接药敏试验 ①先把血液标本接种在URITEST －3000 型生化血培养仪自动培养及检测，当检测出阳性样后，通过无菌注射器抽取10 ml 阳性品，注入无菌试管，以梯度方式对细菌离心分离，速度1 500 r/min，5 ～10 min 后收集上层清液，再以3 000 r/min 速度离心，15 ～20 min 后清除上清液，PBS 洗涤2 次后重悬［3］。②另外取悬液涂片20 μl 对阳性样进行革兰氏染色，同时行倒置显微镜观察，若为G+菌，且形态为链状，则使用浓度为5%的羊血血平板+ MH 进行初级药敏试验，结合试验结果选择合适的酶，把菌液浓度调整为6.2 ×108cfu/L 后，接种在药敏综合板NC21 上，行细菌鉴定及药敏试验;若为一般菌种，在MH 平板上接种2 滴悬液(真菌例除外)，借助无菌拭子涂抹均匀，贴上合适的药敏纸片，结合2005NCCLSI 标准对阳性样敏感性以及耐药性进行判断［4］。

1．3 统计学分析 采用SPSS 17.0 统计学软件进行数据处理分析，定性资料的组间比较采用χ2检验，P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

620 份样品中检出阳性样共375 份。G－球菌和G+杆菌的中度敏感、敏感、耐药符合率分别为92.37%、95.14%、97.17%及94.46%、96.61%、96.91%，组间比较差异均无统计学意义(P ＞0.05)。见表1。

表1 两种检测方法抗生素敏感度检出符合率比较(n，%)

3 讨论

近年来因细菌耐药性增加导致的多重耐药菌感染诱发的全身感染或败血症等疾病成为院内感染或社区获得性感染中的重要组成。快速有效的检测方法对于及时诊断、正确合理用药具有重要意义［5］。随着研究深入，目前临床上常用的药敏试验方法有纸片扩散法、稀释法、抗生素浓度梯度法及全自动培养检测仪等。

本研究使用常规药敏试验和直接药敏试验对620 份血液标本进行检测，此外，还对样品中的G+杆菌、G－球菌进行了药敏试验，结果显示，两种检测方法的阳性样药敏试验总符合率比较，差异无统计学意义(P ＞0.05)。说明直接药敏试验可替代常规药敏试验对G+杆菌、G－球菌的抗菌药物敏感度检测，且直接药敏试验检测时间较短，耗材少，简单方便，因此，可把其广泛应用在相关疾病的临床诊断中。

［1］张茂海．两种细菌鉴定法在临床血液检验中的应用研究［J］．湖南中医药大学学报，2011，31(12):3 －4，7．

［2］赵硕，朱以军，单小云，等．576 株血液分离病原菌的分布及耐药性分析［J］．中华医院感染学杂志，2011，21(9):1909 －1911．

［3］张鸿．武汉市青山区血培养病原菌的分布及耐药性分析［J］．实验与检验医学，2011，29(4):411 －412，436．

［4］曹敏华．2 659 份血培养中病原菌的分布及耐药性［J］．海南医学，2012，23(8):99 －101．

［5］李慧．两种细菌鉴定法在临床血液检验中的应用［J］．现代预防医学，2011，38(9):1705 －1706．