鸡内金不同提取方法的比较※

金伶佳 贾天柱

（辽宁省大连市卫生计生培训中心，大连116021）

鸡内金不同提取方法的比较※

金伶佳 贾天柱*

（辽宁省大连市卫生计生培训中心，大连116021）

目的本实验通过对几种常见的鸡内金提取方法进行研究，从而筛选出最佳提取鸡内金中蛋白质含量的方法。方法本实验通过2种常用方法的提取方法——热浸法、超声提取法对鸡内金中的蛋白质含量结果进行了分析比较。结果采用热浸法提取鸡内金中的蛋白质含量相对比较稳定准确。结论5 g生品鸡内金，在温度85℃下，回流提取2 h，此法为生品鸡内金药材最佳提取方法。

鸡内金；蛋白质；提取方法；中药化学

中药鸡内金为雉科动物鸡Gallus gallus gomesticus Briss on的干燥砂囊。据有关报道，鸡内金是主要含蛋白质及多种氨基酸，胃泌素、角蛋白及各种氨基酸，微量胃蛋白酶，淀粉酶，多种维生素。鸡内金其主要成分均为蛋白质成分。大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液，少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂中，因些，可采用不同溶剂提取分离和纯化蛋白质及酶［20］。水溶液提取法：稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂［1-2］，通常用量是原材料体积的1～5倍，提取时需要均匀的搅拌，以利于蛋白质的溶解。提取的温度要视有效成份性质而定。多数蛋白质的溶解度随着温度的升高而增大，因此，温度高利于溶解，缩短提取时间。针对温度有利于溶解，可采取热浸，超声等方法考察合适的鸡内金提取的方法。

1 实验材料

1.1 仪器球形回流管，水浴锅、40目筛，高速万能粉碎机（Fw 80型）、电子天平（余姚市金诺天平仪器有限公司）、FA1004B型电子天平（上海精密科学仪器有限公司）、温度计，圆底烧瓶，锥形瓶，玻璃棒。

1.2 药材鸡内金购于辽宁省大连市瓦房店连城食品有限公司，按05版药典鉴定为雉科动物家鸡（Gallus gallus domesticus Brisson）的砂囊内壁。

1.3 试剂水（纯净水），鸡内金对照品由辽宁师范大学分析中心所提供。

2 实验方法

2.1 热浸法

2.1.1 样品的制备按《中国药典》［7］的基本方法，经初步筛选，确定以下工艺。热浸法生品鸡内金样品1：精密称取生品鸡内金5 g，粉碎，过60目筛，加到圆底烧瓶内，再加入100 ml蒸馏水，在温度分别为70℃，85℃，100℃，回流，2 h后取出，放凉，用抽滤器过滤，后定容到100 ml容量瓶中，备用。热浸法生品鸡内金样品2：精密称取生品鸡内金5 g，粉碎，过60目筛，加到圆底烧瓶内，再加入100 ml蒸馏水，在温度为85℃，分别回流，1 h，2 h，3 h后取出，放凉，用抽滤器过滤，后定容到100 ml容量瓶中，备用。

2.1.2 指标性成分含量测定①对照品溶液的制备：精密称取蒸馏水1 ml，到10 ml具容试管中，再加入配好的考马斯亮蓝溶液9 ml，加入蒸馏水，定容到10 ml具容试管中，备用。②供试品溶液的制备：分别称取各上述生品提取液0.3 ml，到10 ml具容试管中，再加入配好的考马斯亮蓝溶液9 ml，加入蒸馏水，定容到10 ml具容试管中，备用。紫外条件：检测波长：595 nm；定点检测。测定法：分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液，用紫外分光光度分析仪测定，每份样品测定3次，以标准曲线法计算含量［17-24］。

2.2 超声提取法样品的制备：按《中国药典》的基本方法，经初步筛选，确定以下工艺。

①超声提取法生品鸡内金样品1：精密称取生品鸡内金1 g，粉碎，过60目筛，加到10 ml具容试管内，再加入10 ml蒸馏水，在温度为常温下，分别超声提取，20 min、40 min、60 min后取出，放凉，用抽滤器过滤，后定容到10 ml容量瓶中，备用。

②超声法提取生品鸡内金样品2：精密称取生品鸡内金1 g，粉碎，过60目筛，加到10 ml具容试管内，再加入10 ml蒸馏水，在温度分别为70℃、50℃、30℃下，超声提取，20 min后取出，放凉，用抽滤器过滤，后定容到10 ml容量瓶中，备用。

2.3 指标性成分含量测定①对照品溶液的制备：精密称取蒸馏水1 ml，到10 ml具容试管中，再加入配好的考马斯亮蓝溶液9 ml，加入蒸馏水，定容到10 ml具容试管中，备用。②供试品溶液的制备：分别称取各上述生品提取液0.3 ml，到10 ml具容试管中，再加入配好的考马斯亮蓝溶液9 ml，加入蒸馏水，定容到10 ml具容试管中，备用。

3 实验结果

3.1 热浸法紫外条件：检测波长：595 nm；定点检测。测定法：分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液，用紫外分光光度分析仪测定，每份样品测定3次，以标准曲线法计算含量，结果见表1，表2。

表1 生品5 g鸡内金在不同温度下的蛋白质含量（n＝3）

通过表1可以看出：鸡内金在85℃时蛋白质含量最高。以此考察相同温度下不同时间的蛋白质含量。

表2 生品鸡内金5 g在相同温度下不同时间的蛋白质含量（n＝3）

通过表2可以看出：生品鸡内金在85℃时，加热回流2 h时，生品鸡内金中的蛋白质含量最高。通过以上表1，2可以看出，热浸法可以提取生品鸡内金中的蛋白质。而且热浸法中，提取温度和时间都对生品鸡内金的蛋白质的含量起到影响作用。在热浸法中，比较提取温度和时间，可得在提取生品鸡内金中蛋白质时，在温度85℃下，回流2 h时，提取生品鸡内金中的蛋白质含量较多。

3.2 超声提取法紫外条件：检测波长：595 nm；定点检测。测定法：分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液，用紫外分光光度分析仪测定，每份样品测定3次，以标准曲线法计算含量，结果见表3，表4。

表3 1 g生品鸡内金在不同超声提取时间下的蛋白质含量（n＝3）

通过表3，可以看出：生品鸡内金在超声振摇20 min后，测得生品鸡内金中的蛋白质的含量最高。以此考察生品鸡内金在不同温度下超声提取的蛋白质的含量。

表4 生品1 g鸡内金在不同温度下超声提取的蛋白质含量（n＝3）

通过以上表3，4可以看出：超声提取法可以提取生品鸡内金中的蛋白质。而且超声提取法中的温度和时间对提取的蛋白质含量有一定的影响作用。比较3，4表，比较提取温度和时间，又可得在提取生品鸡内金中蛋白质时，在温度70℃下，超声20 min时提取生品鸡内金的蛋白质含量较多。

3.3 比较热浸法和超声提取法测定结果结果见表5。

表5 生品鸡内金不同提取方法下的总蛋白质含量的比较（n＝3）

通过表5可以看出：热浸法和超声提取法这两方法都可以提取生品鸡内金中的蛋白质。但是提取的总量有所差别。相比较而言。热浸法提取的蛋白质含量更多些。

4 讨论

本实验采用生品鸡内金中的总蛋白质含量为指标性成分，对热浸法和超声提取等不同提取方法进行考察，找出最佳提取方法。由上述所有图表可见，在提取鸡内金中蛋白质含量方面，热浸法和超声提取法都可以在某种程度上提取生品鸡内金中的蛋白质。热浸法在提取生品鸡内金中的蛋白质方面在一定程度上要远好于超声提取法。在热浸法中，比较回流提取温度和时间，又可得在提取鸡内金中蛋白质时，在温度85℃下，加热回流2 h时，提取生品鸡内金的蛋白质含量较多。

5 结论

5 g生品鸡内金，在温度85℃下，回流提取2 h，此法为生品鸡内金药材最佳提取方法。本实验通过对鸡内金的提取方法的筛选，为其下一步的最佳炮制工艺的研究和药理方面的探索提供帮助。

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Comparison of Different Extraction Methods of Chicken Gizzard Membrane

JINLingjia，JIATianzhu
（DalianHealthFamilyPlanningTrainingCenter，LiaoningProvince，Dalian116021，China）

Objective Through studying several common extraction method of chicken gizzard membrance to select the bestmethod of extraction of protein content in the chicken gizzard membrance.Methods Two commonly methods of extracting method were used，hot dipping method and ultrasonic extraction method.The results of protein content were compared.Results The protein content of hot dipping method was relatively stable.Conclusion 5g rawchicken's gizzard-membrane，under the temperature 85℃，reflux extraction 2 h，it was the best extraction method of medicinal materials of chicken gizzard membrane.

chicken gizzard membrane；protein；extraction method；chemistry of Chinese materia medica

10.3969/j.issn.1672-2779.2015.16.069

1672-2779（2015）-16-0141-03

：杨杰本文校对：贾天柱

2015-06-04）

国家“十一五”科技支撑课题（No：2010ZX09401-105A）

*通讯作者：jinlingjia19841003@126.com