米糠提取物二十八烷醇对断奶仔猪生产性能和血液指标的影响

龙 蕾 高木珍 彭 凯 孙 静 王顺喜

（中国农业大学工学院1，北京 100083）

（天津纳尔生物科技有限公司2，天津 300457）

（天津市兽药饲料监察所3，天津 300402）

米糠提取物二十八烷醇对断奶仔猪生产性能和血液指标的影响

龙 蕾1，2高木珍3彭 凯1孙 静2王顺喜1

（中国农业大学工学院1，北京 100083）

（天津纳尔生物科技有限公司2，天津 300457）

（天津市兽药饲料监察所3，天津 300402）

将米糠提取物二十八烷醇应用于断奶仔猪教槽料中，探索二十八烷醇对断奶仔猪生产性能和血液指标的影响，并与抗生素泰妙菌素效果进行比较，旨在探索二十八烷醇替代抗生素的可能性。选取105头21日龄、初始体重为（5.70±1.41）kg的健康“杜×长×大”断奶仔猪，随机分为3组，即对照组、泰妙菌素组和二十八烷醇组，每组7个重复，每个重复5头猪，进行饲养试验，试验期42 d，分别测定各组仔猪的生长性能、日粮中养分消化率、腹泻程度和血液指标。结果表明，整个试验期内，与对照组相比，二十八烷醇组仔猪的日增重、饲料转化率、腹泻程度和血液指标均显著优于对照组（P＜0.05），并可提高日粮中干物质和粗蛋白质的表观消化率；与泰妙菌素组相比，二十八烷醇组仔猪的血液指标与泰妙菌素组存在显著性差异（P＜0.05），日增重、饲料转化率、营养成分消化率和腹泻程度指标与泰妙菌素组效果无显著差异（P＞0.05）。因此，二十八烷醇可替代抗生素用于断奶仔猪教槽料中，为开发安全、高效、无残留的畜禽促生长饲料添加剂提供参考。

二十八烷醇 断奶仔猪 生产性能 血液指标

近年来，许多国家都在立法控制饲料中抗生素类添加剂的使用，因此，抗生素替代品的研发已成为愈来愈热的研究课题。植物提取物作为新一代饲料添加剂，作用方式独特、效果良好，同时具备绿色、安全、高效、稳定、可靠等特点，可完全替代抗生素，消除化学合成药物弊端，日益被饲料工业所重视［1］。

米糠是稻米加工的副产品，因其营养丰富，被誉为“天赐营养源”，含有脂多糖、谷维素、二十八烷醇、植物甾醇、生育酚等多种天然生物活性物质，这些物质具有促进生长、改善肠胃功能、调节脂类代谢、降低胆固醇、抗氧化等功能，在营养学上是十分优良的功能性原料［2－3］。因此，米糠是保健功能因子的宝库。米糠中的活性成分二十八烷醇是一种纯天然且具有生理活性的一元高级脂肪醇，主要存在于糠蜡中［4］。研究表明，二十八烷醇具有增进耐力、精力，提高反应灵敏性和应激能力，提高机体代谢率，改善心肌功能，降低血清胆固醇和三酰甘油含量等功能［5］，且安全性很高。根据小鼠口服试验［6］，二十八烷醇的LD50值在18 000 mg／kg以上，安全性比食盐（LD50＝3 000 mg／kg）还高，同时经小鼠精子畸变试验、小鼠骨髓微核试验和Ames试验等均呈现阴性，古巴天然产物中心Aleman等学者的论证也证实了这一点［7］。钟耕等［8］试验研究也表明，高纯度（90%）的二十八烷醇仍十分安全。因此，二十八烷醇是一种安全有效的功能性因子，且用量极微而生理活性显著。

目前，国内外对二十八烷醇在功能性食品、各种营养补助品、医药产品等领域中的研究和应用较多，日本厚生省早在1988年就将其列入日本《机能性食品的开发》目录，FDA于2001年7月批准二十八烷醇可以作为保健食品添加剂，然而将其作为饲料添加剂的相关研究却很少。日本专利报道［9］，将含有C26～C32的长链脂肪醇或二十八烷醇添加入饲料中，动物摄取后体力、特别是耐久力得到增强。本研究通过探讨二十八烷醇对断奶仔猪生长性能、营养成分消化率、腹泻程度和血液指标影响，与抗生素的效果进行比较，旨在探索其替代抗生素的可能性，提高仔猪养殖安全水平并提升米糠副产品的利用效率，为二十八烷醇作为天然活性成分改善畜禽动物健康水平、确保畜禽食品安全提供参考。

1 材料与方法

1.1 二十八烷醇含量的测定

二十八烷醇标准品：Sigma公司，纯度≥99%。以二十八烷醇标准品为标样，采用气相色谱法测定二十八烷醇含量［10－11］。

1.2 米糠中二十八烷醇的提取［12－14］

将新鲜米糠于105℃烘1 h钝化脂酶的活性，冷却。采用CO2超临界流体萃取，萃取压力为50 MPa，萃取温度为40℃，萃取50min得到米糠蜡。采用湿性氧化钙或氢氧化钙，以适当比例与水混合，在100℃以上与米糠蜡混合反应4 h，反应结束，待完全冷却后得到的固体反应产物即为脂肪醇与脂肪酸钙的混合物。将得到的产物粉碎至粉末状，与食用级乙醇充分混合，萃取6 h，再过滤除去不溶的脂肪酸钙，剩下的母液为包含溶剂的脂肪醇溶液，从母液中回收溶剂得产物高碳脂肪醇，得率为65.32%。采用二级高真空分子蒸馏系统，一级蒸馏温度为180℃，真空度为173.3 Pa，二级蒸馏温度为150℃，真空度为66.7 Pa，得到产物中二十八烷醇质量分数为53.7%。

1.3 试验设计与饲养管理

选取105头健康的21日龄“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪，初始体重为（5.70±1.41）kg，根据性别和体重随机分为3组，每组7个重复，每个重复5头猪，试验期42 d。猪舍温湿度可控，自由采食和饮水。试验日粮参照NRC（2012）仔猪营养需要进行设计和配制，日粮组成及营养水平见表1。

表1 日粮组成及养分含量／%

表1 （续）

根据日本专利［9］中的推荐用量和 Roberto等［15］研究，设计二十八烷醇在饲料中的添加量为8 mg／kg，试验设计见表2。

表2 试验设计

1.4 评定指标

1.4.1 生长性能测定

在第1天、第14天、第42天时，称量仔猪空腹体重，记录试验期间每天每组猪的采食量，以确定平均日增重（ADG），平均日采食量（ADFI）和饲料转化率（G／F）。

1.4.2 日粮营养成分消化率测定

分别于试验第7天～第14天和第35天～第42天，用三氧化二铬（0.2%）作为指示剂测定日粮中干物质、粗蛋白质和能量的表观消化率，预饲期4 d，正饲期3 d。正饲期间，每天分3次收集粪便，加入10mL 10%的稀硫酸后放入－20℃冰箱保存，试验结束后，将所有粪便解冻后混匀，取300 g粪样在70℃烘箱中烘干72 h，粉碎，过40目筛。依据杨胜［16］的方法测定饲料和粪样中干物质和粗蛋白质，饲料和粪样经湿法消化后，参考Caton等［17］的方法测定其中Cr的含量。饲粮和粪样的能量消化率用美国PARR公司的1281型能量测定仪测定。

养分消化率的计算公式为：

养分消化率／% ＝100－100×（A1×F2）／（A2×F1）。

式中：A1为饲料中三氧化二铬质量分数／%；A2为粪样中三氧化二铬质量分数／%；F1为饲料中养分质量分数／%；F2为粪样中该养分质量分数／%。

1.4.3 断奶仔猪腹泻情况

试验期间每天观察并记录各仔猪腹泻情况，在试验第1天～第10天和第33天～第42天进行腹泻评分，使用5级评分系统测定每一栏5头猪的粪便分值，取平均值，评分标准见表3。统计腹泻率、腹泻频率和腹泻指数。

其中，腹泻率＝腹泻头数／总头数×100%；腹泻频率＝（腹泻头次）／（供试猪总头数×试验时间／天）×100%；腹泻指数＝粪便评分之和／供试猪总头数。该指数越高，代表腹泻越严重。

表3 腹泻评分标准

1.4.4 血液指标的检测

试验结束时，每栏随机选取2头猪通过前腔静脉穿刺采血。进行血常规测定的血液用0.5mL肝素抗凝，其余的自然凝固后立即离心（3 000 r／min，15min）取血清，保存于－20℃备用。比色法测定血清碱性磷酸酶（ALP）活力，考马斯亮蓝法测定血清总蛋白（TP）含量，溴甲酚绿比色法测定血清白蛋白（ALB）含量，二乙酰－肟法测定血清尿素氮（BUN）含量，比色法测定血清总抗氧化能力（T－AOC），黄嘌呤氧化酶法测定血清超氧化物歧化酶（SOD）活力，硫代巴比妥法测定血清丙二醛（MDA）含量。试剂盒购自南京建成生物工程研究所，操作按试剂盒说明书进行。

1.5 数据分析

试验数据采用Excel 2010进行整理，采用SPSS 17.0统计软件对数据进行方差分析，以P＜0.05为差异显著性判断标准。

2 结果与分析

2.1 二十八烷醇对仔猪生长性能的影响

各组仔猪初始体重无显著差异（P＜0.05）。从表4可知，试验第1天～第14天，二十八烷醇组和泰妙菌素组的仔猪日增重均显著高于对照组（P＜0.05），二十八烷醇组的饲料转化率与对照组差异不显著（P＞0.05），但比对照组提高了3.80%。第15天～第42天，二十八烷醇组和泰妙菌素组的日增重和饲料转化率也较对照组显著提高（P＜0.05）。

整个试验期间，二十八烷醇组的平均日增重和饲料转化率分别比对照组提高了6.45%（P＜0.05）和6.35%（P＜0.05）；泰妙菌素组的平均日增重和饲料转化率分别比对照组提高了6.01%（P＜0.05）和6.35%（P＜0.05），各组之间平均日采食量无显著差异（P＞0.05）。二十八烷醇组仔猪各项生长性能指标与泰妙菌素组无显著差异（P＞0.05）。试验结果表明，二十八烷醇能够显著提高断奶仔猪的生长性能，且与抗生素泰妙菌素具有相同的促生长效果。

表4 二十八烷醇对断奶仔猪生长性能的影响

2.2 二十八烷醇对仔猪日粮中养分消化率的影响

从表5可知，试验第7天～第14天，二十八烷醇组仔猪日粮干物质和粗蛋白质表观消化率分别比对照组提高了 3.36%（P＜0.05）和 4.21%（P ＜0.05），比泰妙菌素组分别提高了2.95%（P＜0.05）和1.98%（P＞0.05）。泰妙菌素组与对照组无显著差异（P＞0.05）。

在第35天～第42天，3组间无显著差异（P＞0.05），但二十八烷醇组日粮干物质和粗蛋白质表观消化率要高于对照组和泰妙菌素组。试验期间，各组之间能量消化率无显著差异（P＞0.05）。

表5 二十八烷醇对断奶仔猪日粮养分消化率的影响／%

2.3 二十八烷醇对仔猪腹泻程度的影响

仔猪的腹泻程度用腹泻率、腹泻频率和腹泻指数来表示。腹泻率反映发病率，腹泻频率、腹泻指数反映腹泻的严重程度。3项指标结合使用，可较为全面地反映仔猪在试验期内的腹泻情况。从表6可以看出，二十八烷醇组和泰妙菌素组的腹泻率、腹泻频率和腹泻指数与对照组均显著降低（P＜0.05）。其中，在第1天～第10天，二十八烷醇组的腹泻率、腹泻频率和腹泻指数比对照组分别降低了60.00%、60.14%和10.31%，在第33天～第42天，分别降低了57.15%、57.00%和6.14%，表明二十八烷醇对缓解断奶仔猪的腹泻有显著的效果。从试验结果上看，虽然二十八烷醇和泰妙菌素对断奶仔猪腹泻程度的影响无显著性差异（P＞0.05），但二十八烷醇抗腹泻效果要优于泰妙菌素。

表6 二十八烷醇对断奶仔猪腹泻程度的影响

2.4 二十八烷醇对仔猪血液指标的影响

由表7可知，二十八烷醇组血液中ALP、TP和ALB含量比对照组分别升高了32.34%（P＜0.05）、28.63%（P＜0.05）和30.60%（P＜0.05），比泰妙菌素组分别升高了26.41%（P＜0.05）、25.79%（P＜0.05）和22.10%（P＜0.05）；BUN含量比对照组降低了9.46%（P＜0.05），比泰妙菌素组降低了9.98%（P＜0.05）。泰妙菌素组与对照组无显著性差异（P＞0.05）。

表7 二十八烷醇对断奶仔猪血液生化指标的影响

从表8可得出，二十八烷醇组血液抗氧化能力与对照组和泰妙菌素组均存在显著差异（P＜0.05），SOD和T－AOC活力分别比对照组提高了9.63%和34.38%，比泰妙菌素组提高了9.30%和39.67%，MDA含量比对照组降低了11.05%，比泰妙菌素组降低了5.47%。泰妙菌素与对照组无显著差异（P＞0.05）。

表8 二十八烷醇对断奶仔猪血液抗氧化指标的影响

3 讨论

3.1 二十八烷醇对仔猪生长性能的影响

二十八烷醇的促生长作用可能与其对动物体内能量代谢的调节功效有密切关系。生长激素（HGH）是腺垂体细胞分泌的一种肽类激素。目前已有的研究证实，生长激素对于机体具有重要的生理调节作用，对于机体内的中间代谢过程及能量代谢过程有重要影响，比如可以促进蛋白质合成，增强对钠、钾、钙、磷、硫等重要元素的摄取与利用，同时通过抑制糖的消耗，加速脂肪分解，使能量来源由糖代谢转向脂肪代谢。杨浩等［18］通过大鼠试验证实，补充二十八烷醇可以有效地促进大鼠机体生长激素的分泌，从而促进动物的快速生长。刘元法等［19］通过动物常规性能研究证实，二十八烷醇可以促进大鼠的生长。

另外，二十八烷醇进入动物体后，参与脂肪动员作用，提高肌肉中游离脂肪酸的转移活性，使长链脂肪酸得到充分氧化，增加蛋白质、脂肪和糖元的合成，抑制蛋白质分解，从而可以促进动物生长［20］。加藤茂明［21］发现，二十八烷醇具有增进大鼠脂肪氧化分解的能力。Perez等［22］的试验也表明，二十八烷醇可以促进大鼠肌糖元在运动过程中的消耗。向洋等［23］通过研究表明，饲喂大鼠适中剂量的二十八烷醇可有效地增加大鼠的平均日采食量和平均日增重，提高饲料转化率。因此，二十八烷醇对于断奶仔猪的促生长作用可能是由于二十八烷醇通过促进体内生长激素的分泌，来调节体内的能量代谢，加速脂肪转变为能量，促进体内蛋白质的合成和糖的利用，从而达到促进生长、提高饲料转化率的功效。

3.2 二十八烷醇对仔猪日粮中养分消化率的影响

仔猪断奶会引起小肠形态结构发生变化，如肠道绒毛萎缩、隐窝增生等，这些变化将会减少肠道的吸收面积，影响饲料养分的消化吸收［24］。因此，保持仔猪小肠肠道形态结构的完整性对促进饲料营养物质的消化吸收有重要意义。Taylor等［25］研究表明，二十八烷醇有细胞保护的功能，可维持小肠内成熟的上皮细胞数量，抵御外界对胃肠刺激的不良反应。Arruzazabala等［26］研究也证明，口服长链脂肪醇对胃肠黏膜具有温和的抗炎和保护效果，对不同诱因的胃肠疾病均有显著的抑制效果。因此，二十八烷醇可能对仔猪胃肠道黏膜具有保护作用，能够有效维持胃肠黏膜的完整性，从而提高仔猪对日粮的消化吸收功能。

本试验结果也表明，二十八烷醇对日粮中干物质和粗蛋白质的消化吸收具有促进作用，但后期效果不明显，需要进一步试验证实。

3.3 二十八烷醇对仔猪腹泻程度的影响

造成仔猪腹泻的原因之一是断奶应激，主要分为心理应激、营养应激和环境应激，缓解断奶应激则是解决仔猪腹泻的最好办法。肾上腺素（AD）是一种由肾上腺髓质分泌的激素，是一种重要的生理调节激素和神经传送体，由肾上腺释放至血液中进行生理调节［27］。目前已经发现［28］，肾上腺素对于心脏收缩力上升，心脏、肝和筋骨的血管扩张和皮肤、粘膜的血管收缩、心输出量等有重要作用，当人或动物处于一种刺激的环境下时，如兴奋、恐惧、紧张等情况都会促进肾上腺素分泌量的增加，伴随出现呼吸频率加快，心跳加速与血液流动加速，瞳孔放大等生理现象。向洋等［29］通过糖代谢激素调节研究发现，二十八烷醇对于糖原的代谢调控主要是通过增加机体内肾上腺素和胰高血糖素的分泌量而调节糖原的合成，从分子水平说明了补充二十八烷醇后，GS合成酶的GSmRNA表达量增加，能够调节机体内糖原的代谢，从而缓解动物应激。杨浩等［18］也通过大鼠试验证实，补充二十八烷醇可以促进大鼠机体的肾上腺素分泌量的增加，提高大鼠机体的应激反应能力，从而增加大鼠的反应敏锐性。

另外，二十八烷醇属于长链脂肪醇，进入动物体后，在肝脏、脂肪组织和肌肉中都有分布，由于肌肉中可以储藏相当量的二十八烷醇，能参与脂肪动员作用，提高肌肉中游离脂肪酸的转移活性，同时被氧化为脂肪酸后形成多种酯，经β－氧化转化成能量而直接被肌细胞利用，节省了动物在应激、饥饿或长时间运动时对糖的利用，保持体内血糖平衡，维持机体正常机能［30］。因此，二十八烷醇具有显著抗应激的功效，可缓解仔猪断奶应激，这就在一定程度上控制了仔猪断奶的腹泻程度。本试验结果也表明，二十八烷醇对预防断奶仔猪腹泻具有良好的效果。

3.4 二十八烷醇对仔猪血液指标的影响

研究表明，高水平的血清总蛋白（TP）和白蛋白（ALB）是蛋白质代谢旺盛的表现，反应机体免疫机能，有利于动物生长［31］。碱性磷酸酶（ALP）活性在生理范围内适量提高，可以促进仔猪体内蛋白质的合成，加快日增重，从而提高动物的生长速度，提高饲料转化率。血尿素氮（BUN）是体内蛋白质降解的产物，BUN降低可增加氮沉积，提高蛋白质合成量，其含量直接反映机体的营养状况和蛋白质的代谢水平［32］。本试验中，通过对仔猪血液中 TP、ALB和ALP生化指标的测定得出，二十八烷醇能显著提高仔猪血清TP、ALB含量和ALP活力，有效降低BUN水平，表明二十八烷醇的添加可增强动物机体的新陈代谢水平，提高进入猪体内的蛋白质利用率，从而显著提高生长性能，且效果优于泰妙菌素。

动物机体内SOD在清除自由基、氧化损伤和维持细胞结构方面起着重要作用。T－AOC是近几年研究发现的用于衡量机体抗氧化酶系统（包括GSH、SOD及过氧化氢酶等）对外来刺激的代偿能力以及机体自由基代谢状态、反映机体抗氧化机能的一项重要指标，MDA作为脂质过氧化的终产物之一，生物体内自由基的指示物，广泛地作为各种氧自由基损伤机体的指标。在应激状态下，SOD活性降低，而血液中脂质过氧化物MDA含量升高。试验结果表明，与对照组和泰妙菌素组相比，二十八烷醇提高了断奶仔猪血液中SOD和T－AOC的活性，降低了血清中MDA的含量，说明二十八烷醇可提高断奶仔猪机体内抗氧化系统活力，从而使机体的抗氧化能力整体上显著提高，从而对断奶仔猪机体起到显著的免疫调节作用。

4 结论

日粮中添加二十八烷醇可提高断奶仔猪的日增重、饲料转化率，促进营养成分消化吸收。同时，可减缓仔猪断奶应激，缓解断奶仔猪腹泻的发生，使仔猪正常生长。此外，二十八烷醇具有生理活性，可有效提高机体的免疫功能和抗氧化能力，对预防疾病、促进生长有显著功效。通过与抗生素泰妙菌素进行效果对比试验得出，二十八烷醇作为抗生素替代品的应用前景广阔。

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Effects of Octacosanol Extracted from Rice Bran on Production Performance and Blood Parameters in Weanling Piglets

Long Lei1，2Gao Muzhen3Peng Kai1Sun Jing2Wang Shunxi1

（College of Engineering，China Agricultural University1，Beijing 100083）
（Tianjin Naer Biotechnology Co.，Ltd.2，Tianjin 300457）
（Tianjin Veterinary Drugs and Feed Monitor Institute3，Tianjin 300402）

In order to explore the effects of octacosanol on production performance and blood parameters of weanling piglets and the possibility of octacosanol alternative antibiotics，adding octacosanol extracted from rice bran to feed ofweanling piglets and comparison of effects of octacosanol and antibioticswere accomplished.A total of105 21－day－old piglets selected（initial weight of（5.70±1.41）kg in good health）were randomly divided into three groups，including control group，tiamulin group（no antibiotic group＋33 mg／kg of tiamulin）and octacosanol group（no antibiotic group＋8 mg／kg octacosanol）.The effects of octacosanol supplementation on growth performance，nutrient digestibility，diarrhea degree and blood profiles in weanling pigletswere evaluated.The results showed that octacosanol group had significant differences on ADG，G／F，diarrhea degree and blood parameters（P＜0.05）with controlled group，and improved nutrient digestibility of drymatter and nitrogen.Compared with tiamulin group，octacosanol group showed greater differences in blood parameters（P＜0.05），but there were no significant difference in ADG，G／F，nutrient digestibility and diarrhea degree（P＞0.05）.These results indicated that the supplementation of octacosanolmight replace antibiotics in weanling piglets feed，which could provide a reference for the development of safe，efficient，no residual animal feed additives.

octacosanol，weanling piglets，production performance，blood parameters

S816.79

A

1003－0174（2015）06－0094－07

公益性行业（农业）科研专项（201203015）

2014－01－13

龙蕾，女，1981年出生，博士，农产品加工工程

王顺喜，男，1959年出生，教授，农产品加工工程