母猪伪狂犬病抗体检测及分析

王艳春

（天津市蓟县罗庄子镇兽医站，天津蓟县 301902）

母猪伪狂犬病抗体检测及分析

王艳春

（天津市蓟县罗庄子镇兽医站，天津蓟县 301902）

母猪伪狂犬病（PR）是由疱疹病毒引起母猪的一种传染性、免疫抑制性疾病。可引起怀孕母猪流产、死产、返情等。现就其抗体检测试验进行阐述。

1 材料与方法

1.1 材料天津地区4个猪场的母猪，每个猪场各30头。

1.2 方法

1.2.1 血清制备血样室温下放置1h，1500r/min离心5min，取上清液，4℃保存备用。

1.2.2 样品稀释在血清稀释板中按1∶1的体积稀释待检血清,阳性对照与阴性对照1∶1稀释。

1.2.3 试验步骤（1）取预包被的检测板，取稀释好的待检血清100μL加入抗原包被板中，同时设阴、阳性对照孔（1∶1稀释），各设2孔，每孔100μL。轻轻振匀孔中样品，置37℃温育30min。

（2）甩掉板孔中的溶液，用洗涤液洗板5次，200μL/孔，每次静置3min倒掉，最后一次用吸水纸吸干。

（3）每孔加酶标记物100μL，置37℃温育30min。

（4）甩掉板孔中的溶液，再用洗涤液洗板5次，200μL/孔，每次静置3min倒掉，最后一次用吸水纸吸干。

（5）每孔加底物液A、底物液B各1滴（50μL），混匀，室温避光显色10min。

（6）每孔加终止液1滴（50μL），15min内测定结果。

1.2.4 结果判定在酶标仪上测各孔OD值。试验成立条件是阴性对照孔平均OD值与阳性对照孔平均OD值之差≥0.4。S为样品孔OD值，N为阴性对照孔平均OD值。若S/N≤0.6，为PRV抗体阳性，S/N≤0.7但＞0.6，样品需重测，若S/N＞0.7，为PRV抗体阴性。

2 结果

母猪抗体阳性率达到53.3%，见表1。

表1 母猪血清抗体检测结果

3 讨论

3.1 阳性率高的原因外界应激因素导致免疫力下降，使潜伏状态的病毒转化为感染性病毒。引进种猪时检疫技术不到位，对该病流行情况认识不足。带有病毒的空气飞沫可威胁健康猪群。被污染的饲料或带毒的动物也可传播该病。

疫苗市场比较混乱，没有统一的标准，使免疫效果低，导致此病的发生和流行。有的厂家，生产疫苗时，检验把关不严，使生产的疫苗带菌带毒，质量达不到规定效价，不能达到免疫效果。经产母猪免疫过频，只免疫母猪不免疫仔猪，免疫密度太大，接种时间不当等都会引起免疫失败。

3.2 防制

3.2.1 加强饲养管理隔离病猪及可疑猪。猪舍和周围环境彻底消毒，粪便、污水消毒处理后才可排放。对全场猪只进行紧急预防接种。消除各种传染源和切断传播媒介。

免疫接种。母猪及后备母猪配种前1个月加强免疫1次，经产母猪断奶前进行免疫，分娩前35d左右强免1次。公猪1年免疫2次。育肥猪每年3、9月各预防1次。仔猪5～6周龄免疫1头份，发病严重区11～12周龄加强免疫1次。

坚持自繁自养制度，从阴性猪场引进猪只，并进行检疫，做好消毒工作，经检疫健康才能使用。实行单一饲养，伪狂犬病可感染多种动物，故猪场内严禁混养其他畜禽。

新引进的种猪，隔离饲养2个月，抽血样检查为阴性者再混群，半年检测1次，阳性者严格隔离，严重者淘汰。

3.2.2 常规检测经常母猪，1年检测3～4次，对猪瘟、蓝耳病、乙脑及各种做疫苗的均要监测。初产母猪配种前做完各种疫苗，半个月后对之前所做的各种疫苗进行抗体监测。

阳性猪场，全场猪群必须进行弱活疫苗的免疫接种。群体发病时应及时扑杀，病死猪进行无害化处理，彻底消毒猪舍及环境。

对70～100日龄的育肥猪群进行伪狂犬病血清学检测，一旦发现阳性猪，所有的猪都要进行免疫。

阴性猪场受到感染时，会导致母猪流产、死胎和仔猪死亡等，疫情停止后猪群可长期带毒，所以，要做好防止伪狂犬病病毒侵入的措施。

10．3969/J.ISSN．1671-6027．2015．09.014

王艳春（1970～），本科，助理兽医师