四种中药对鲫鱼的急性毒性试验

罗喜东，陈鹏飞

（1.凉山州农业学校，四川 西昌 615022；2.西南大学荣昌校区水产系，重庆 荣昌 402460）

目前，水产动物疾病大多采用抗生素类化学药物控制，但这些化学药物在水体中不易降解，易在养殖动物体内富集并污染环境，长期使用甚至会使鱼类产生耐药性或多重耐药性。相对而言，中草药是一种天然环保型绿色药物，具有高效、毒副作用少、安全性高、残留少等诸多优点。用中草药代替抗生素防治水产病害是当前的发展趋势。本试验测定了贯众、苦参、川楝子、土木香等4种中药对鲫鱼的急性毒性作用，旨在为开发利用中草药防治水生动物原虫性寄生虫病提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料 方正鲫由重庆荣昌梅石坝渔场提供，体重2.0±0.2g，于水族箱内暂养l周。贯众、苦参、川楝子、土木香由重庆市全兴药品连锁有限公司荣昌分店提供。

1.2 试验方法 急性毒性试验在60cm×30cm×45cm水族箱中进行，水深30 cm左右。自来水曝气24 h，去氯，水中pH值7.0～7.4、溶氧8～12mg/L、氨氮含量≤0.1mg/L、总硬度 6.2（德国度），水温为 24～25℃。

中草药水提液制备：中草药各取25g，加入10倍蒸馏水浸泡30min，然后加热至沸腾，控温使其微沸，煎煮3次，每次30min，合并药液过滤，将滤液浓缩至25mL，使其终浓度相当于原药1g/mL。装瓶，高压灭菌，置4℃冰箱保存备用[1]。

按照急性毒性实验方法先进行预试验[2]，确定鱼全活和全死的药物剂量范围，再按照等对数间距法加设两个浓度梯度进行正式试验（试验设计见表1），每组3个平行，随机放入30尾试验鱼。试验时间96 h，试验期间及时捞出死鱼，每24h更换药液1次，以保证试验期间药液浓度不变。试验过程中观察和记录试验鱼中毒时的症状及死亡情况。试验结束后，采用改良寇氏法计算各药在24、48、96h的半致死质量浓度（LC50）和安全质量浓度（SC）。

1.3 数据处理[3-4]

式中，XM为最大质量浓度的对数值；d为相邻两组的质量浓度对数差；n为组数；ΣPi为死亡率之和；LC50为各时刻半致死浓度。

2 试验结果

2.1 试验鱼中毒症状 正式试验中，各个药物浓度组在施药后的一定时间内出现下列中毒症状：鱼浮出水面，靠池边浮头、急游、乱窜，张口呼吸，时而快速游动，欲跳出水面，时而缓慢；头部向上，鱼体在水中呈垂直状态；打转，失去平衡；或集群，或相互碰撞；不断地张口扩张鳃，前期呼吸加快，后期呼吸变慢；对外界刺激不敏感，甚至无反应，活力变差。随着时间的延长，平衡能力和运动能力渐弱，最后躺卧于池底，鳃盖张开，呼吸衰竭而死，黏液增多。

2.2 急性毒性试验结果 从表1可以看出，4种中药的毒性大小依次为贯众＞川楝子＞苦参＞土木香。24h的 LC50分别为 2.254、10.239、36.363、47.539 g/L；48 h 的 LC50分别为 1.708、8.133、32.559、42.353 g/L；96 h 的 LC50分别为 1.340、5.983、29.161、36.028g/L。

表1 急性毒性试验统计表

贯众、川楝子、苦参、土木香的安全质量浓度（SC）分别为 0.294、1.539、8.575、10.076g/L。贯众的安全浓度最低，与苦参和土木香的差异显著（P＜0.05），与川楝子的差异不显著（P＞0.05）；土木香的安全浓度最高，但与苦参的差异不显著（P＞0.05）。

3 分析

本试验所选4种中草药均有杀虫的功效，可作为水产养殖中的杀虫药物使用。中草药含有的生物碱类先作用于寄生虫的中枢神经系统，使之兴奋产生惊厥，进而作用于呼吸肌神经，使寄生虫死于呼吸抑制，如苦参碱[5]、槟榔碱[6]等。川楝、苦楝等含有的四环三萜类成分能驱杀寄生虫，其中含有的川楝素和苦楝油等对虫体肠肌有兴奋作用，使虫体活动加强，出现间歇性剧烈收缩，造成能量供应不足，附着力减弱而被驱除[7]。

4 结论

本试验结合生产实践，采用水提液浸泡法提取中药的有效成分。结果显示，4种中药的毒性大小依次为贯众＞川楝子＞苦参＞土木香，贯众的安全浓度最低（0.294g/L），土木香的安全浓度最高（10.076g/L）。石宏武等[8]选用苦参、苦楝、贯众等6种中草药制成水提液对鲫鱼进行注射试验，结果得出苦参、苦楝、贯众的安全浓度分别为0.567、0.275、0.026g/L，与本试验的安全浓度有明显差别，这可能与给药方法不同有关。本试验提示，在鲫鱼养殖中使用上述中药时应在其安全质量浓度范围内给药。

[1] 梁利国，邴旭文，张晓君，等.18种中草药煎液对温和气单胞菌的抑、杀菌效果[J].淡水渔业，2010，40（1）：66-69.

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[7] 郭玉娟，陈学年.我国中草药防治水生经济动物病害研究进展[J].水产科学，2005，25（4）：34-38.

[8] 石宏武，汪彦愔，吴静.6种中草药对鲤斜管虫和指状拟舟虫的体外杀灭试验[J].齐鲁渔业，2008，25（10）：4-8.