L-茶氨酸对育肥猪生长性能和血液生化指标影响的研究

■ 李 宁 闫 峻 李 驰 刘 通 陆作领 穆淑琴 王文杰

（1.天津市畜牧兽医研究所，天津 300381；2.天津市畜禽健康养殖技术工程中心，天津 300381；3.西北农林科技大学动物科技学院，陕西杨凌 712100；4.天津市武清区畜牧水产业发展服务中心，天津 301700）

L-茶氨酸（L-theanine）是酰胺类化合物的一种，是茶叶中一种游离非蛋白氨基酸，其含量占茶叶游离氨基酸总量的40%～70%[1]。有研究报道，4 mg/ml的L-茶氨酸对二苯代苦味酰基自由基、羟自由基和氧自由基清除率分别为65.6%、32.5%和23.5%[2]。Sirshendu等[3]发现L-茶氨酸可显著缓解消炎药引起的不良氧化反应。彭彬等[4]给大鼠灌服高剂量L-茶氨酸后，显著提高大鼠海马和皮层中5-羟色胺、肾上腺素的含量，降低促肾上腺皮质激素、皮质醇水平，上调大鼠血液和皮层中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶含量，显著改善大鼠的抑郁行为。L-茶氨酸具有良好的稳定性，在进行急性、亚急性毒性试验中均无毒性反应，现已大量应用于食品添加剂和保健品[5]。但是L-茶氨酸对育肥猪生长性能、血液生化指标的影响报道较少。此外，随着L-茶氨酸生产工艺改进，生产成本大幅降低，在饲料工业中的大批量应用有望实现。本试验目的是研究L-茶氨酸作为新型饲料添加剂在提高育肥猪生长性能和免疫力等方面的作用，为L-茶氨酸在养猪生产中的应用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

L-茶氨酸购自浙江衢州卓尔化学有限公司，纯度99.7%。

1.2 试验动物及设计

选取72头[（60.0±2.0）kg]生长发育良好、健康的“杜×长×大”三元杂交猪随机分成4个组，每组18个重复，每个重复1头猪。对照组饲喂玉米-豆粕型基础日粮，试验1、2、3组分别在基础日粮中添加200、500 mg/kg和1 000 mg/kg L-茶氨酸，试验期37 d。

1.3 基础日粮及饲养管理

参考NRC（2012）育肥猪饲养标准配制基础日粮。基础日粮组成及营养水平见表1。粉料饲喂，自由采食和饮水，常规饲养方法进行消毒、驱虫、免疫和管理。

1.4 样品采集与测定

1.4.1 样品采集与制备

采血前空腹12 h，每组随机选择6头猪，前腔静脉采血5 ml，制备血清待检。

表1 基础日粮组成及营养水平（风干基础）

1.4.2 生长性能指标

利用种猪生产性能测定系统记录每头猪的日采食量、日增重和料重比数据。

1.4.3 血液生化指标及测定方法

TP（Total protein，总蛋白）、ALB（Albumin，白蛋白）、GLU（Glucose，葡萄糖）、ALT（Alanine transaminase，谷丙转氨酶）、AST（Aspartate transaminase，谷草转氨酶）、ALP（Alkaline phosphatase，碱性磷酸酶）使用东芝120生化检测仪检测；COR（Cortisol，皮质醇）、IL-10（Interleukin-10，白细胞介素10）使用XH6080放免仪检测；MDA（Malondialdehyde，丙二醛）、GSH-PX（Glutathione peroxidase，谷胱甘肽过氧化物酶）检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所；免疫球蛋白A、G、M检测试剂盒购自北京金海科隅生物科技发展有限公司。

1.5 数据处理

采用SPSS20.0软件的ONE-WAY单因素方差分析，Duncan's法进行组间多重比较，P＜0.05为差异显著，结果用“平均值±标准差”表示。

2 结果

2.1 L-茶氨酸对育肥猪生长性能影响（见表2）

由表2可以看出，与对照组相比，试验3组的平均日增重和平均日采食量均显著提高（P＜0.05），料重比无显著性差异（P＞0.05）；试验1、2组的生产性能无显著性差异（P＞0.05）。

2.2 L-茶氨酸对育肥猪血液生化指标的影响（见表3）

表3数据显示，与对照组相比，三个试验组血液中的ALT、AST、ALB和 GLU水平无显著性差异（P＞0.05），试验2、3组血液TP显著升高（P＜0.05）。

表2 L-茶氨酸对育肥猪生长性能的影响

表3 L-茶氨酸对育肥猪血液生化指标的影响

2.3 L-茶氨酸对育肥猪血液氧化指标的影响（见表4）

由表4可知，与对照组相比，试验3组的COR和ALP均显著降低（P＜0.05），试验2组的COR显著降低（P＜0.05）；三个试验组MDA、GSH-Px无显著性差异。

表4 L-茶氨酸对育肥猪血液氧化指标的影响

2.4 L-茶氨酸对育肥猪血液免疫因子的影响（见表5）

由表5可知，与对照组相比，试验2、3组的IgG水平显著增加（P＜0.05），IL-10的水平显著降低（P＜0.05），免疫因子IgA和IgM的水平无显著变化（P＞0.05）。

表5 L-茶氨酸对育肥猪血液免疫因子的影响

3 讨论

3.1 L-茶氨酸对育肥猪生长性能的影响

生长性能能够直观反映动物对日粮的利用效率。本试验结果表明，日粮中添加1 000 mg/kg的L-茶氨酸可以显著的提高育肥猪日采食量、日增重。与本试验结果不同的是，谭俊峰等[6]发现用茶氨酸饲喂小鼠对小鼠体增重没有显著影响，王小雪等[7]对小鼠灌服16.6 mg/kg的茶氨酸也发现相似的结果。汪丽伟等[8]在饲粮中添加200 mg/kg的L-茶氨酸对蛋用仔公鸡无显著性影响。文慧等[9]也发现，日粮中添加800 mg/kg以下的L-茶氨酸对黄羽肉鸡的采食量、料肉比和日增重都没有显著影响。与前人研究不同的可能原因是本研究中高剂量的L-茶氨酸激活了鲜味对应的信号通路。Masatka等[10]对鲜味受体研究表明，L-茶氨酸能够激活T1R1+T1R3通路，其作用机制需要进行进一步深入探讨。

3.2 L-茶氨酸对育肥猪血液生化指标的影响

ALT和AST可以反映肝脏损伤程度，TP反映肝脏合成功能和肾脏病变。本试验发现添加1 000 mg/kg L-茶氨酸能够提高育肥猪肝脏合成能力改善肝脏损伤。与本试验结果相似的是，Katsuhito等[11]研究阿霉素对小鼠肝功能的影响时发现，添加10 mg/kg的茶氨酸能够有效的减轻阿霉素对小鼠肝脏造成的损害。孙浪等[12]对草鱼研究中发现饲料中添加0.4%的L-茶氨酸使得草鱼血液GLU和AST分别显著提高35.3%和47.8%，但是对ALT和TP无显著性影响。

3.3 L-茶氨酸对育肥猪血液氧化指标的影响

GSH-Px可以抑制机体脂质过氧化代谢的终产物MDA的生成。正常范围内GSH-Px越高表明机体抗氧化能力越强。MDA是脂质过氧化物降解的主要产物，反映体内脂质过氧化的氧化程度和细胞受氧化程度，正常范围内含量越低抗氧化能力越好，肝脏和胆道疾病可引起血液中ALP的增加。李大伟等[13]研究发现，42%茶酒溶液的功能修饰因子可以显著抑制脂质MDA含量。汪丽伟等[8]的试验表明，添加200 mg/kg的L-茶氨酸对肉鸡小肠中GSH的活性没有显著性影响，但在肝脏、胸肌和腿肌中可以显著提高GSH的活性，而降低MDA水平。本试验中试验3组与对照组相比，血液MDA水平降低3.5%，GSH-PX活性提高20.4%，与前人研究基本一致。陈淑珍等[14]研究表明，L-茶氨酸可以减少酒精引起的氧自由基，增加还原型谷胱甘肽的含量，可抑制四氯化碳引起的ALT、AST升高。李桂兰等[15]研究表明，L-茶氨酸可以抑制由H2O2引起的肝脏氧化作用，保护肝脏免受氧化破坏，本试验与以上试验结果相似。

3.4 L-茶氨酸对育肥猪血液免疫因子的影响

免疫因子是免疫细胞产生的一类能够在细胞间传递信息、具有免疫调节和时效功能的小分子蛋白。Kurihara等[16]研究显示，使用L-茶氨酸和L-胱氨酸复合物可增进免疫反应，增加免疫特异性抗体IgG水平，本试验添加1 000 mg/kg的L-茶氨酸能够显著提高血液中IgG含量。孙浪等[12]在草鱼饲料中添加1.2%的L-茶氨酸提高了IgM的含量，但差异不显著。陈淑珍等[14]研究表明，L-茶氨酸可以抑制CCl4引起的炎症反应，降低IL-10水平，本试验中试验3组的血液IL-10含量比对照组降低33.4%。火东晓等[17]研究表明，800μmol/l的L-茶氨酸可显著抑制LPS诱导RAW264.7细胞产生的IL-10水平。文慧等[9]在饲粮中添加200、400、800 mg/kg的L-茶氨酸在21 d时都可以显著增加黄羽肉鸡肠道分泌型免疫球蛋白。L-茶氨酸提高血液免疫因子水平的原因可能是来自于L-茶氨酸降解产生的乙胺，外周血液中免疫细胞受到乙胺的刺激可以分泌抗病菌、病毒等的免疫物质，进而增强免疫力。

4 结论

饲粮中添加1 000 mg/kg的L-茶氨酸可以显著提高育肥猪日采食量、日增重，显著提高育肥猪血液TP、IgG含量，降低血液中COR、MDA、ALP和IL-10的含量，增强机体抗氧化能力和免疫力。