基于“肾主生殖”理论探讨卵巢颗粒细胞增殖机理研究

蔚建斌　连　方

1.山东中医药大学，山东　济南　250000 ；2.山东中医药大学附属医院，山东　济南　250000



基于“肾主生殖”理论探讨卵巢颗粒细胞增殖机理研究

蔚建斌1连方2

1.山东中医药大学，山东济南250000 ；2.山东中医药大学附属医院，山东济南250000

【摘要】卵巢颗粒细胞的增殖是体现人类生殖能力的重要环节。笔者通过概述GPER/EGFR/MAPK信号转导通路中相关蛋白促进颗粒细胞增殖的机制及其中西医研究进展，初步探讨此通路与人类生殖的关系并丰富“肾主生殖”理论，以期能够从微观化的角度为卵巢颗粒细胞增殖在中西医生殖领域的治疗提供新的研究思路与方法。

【关键词】信号通路；细胞增殖；中西医；肾主生殖

肾藏精，主生殖。精子、卵细胞及受精卵都应当列入生殖之精的范围,相关研究发现中医药在卵巢颗粒细胞的增殖中发挥重要作用，可能通过GPER/EGFR/MAPK信号转导通路发挥作用。

1肾藏精，主生殖

生殖之精是肾精的重要组成部分，是形成子代胚胎的原始物质。《灵枢·经脉》曰“人始生，先成精，精成而脑髓生”，精子、卵细胞及受精卵都应当列入生殖之精的范围[1]。《女科正宗·广嗣总论》指出“男精壮女经调，有子之道也”，揭示受孕的机理在于男女肾气充盛，天癸成熟，精壮经调，适时和合，而成胎孕。

2卵巢为奇恒之脏，卵巢藏泻体现“肾主生殖”

现代辅助生殖技术的发展与应用，使得“肾主生殖”理论的研究深入到了分子水平，为“肾主生殖”内涵的不断拓展提供了科学依据。卵巢属于胞脉范畴，形态实质与五脏相似，功能上能生成和排出卵子与六腑类同，可称为奇恒之脏[2]。解剖上通过卵巢固有韧带与子宫相连，藏泻有时，于卵泡期积肾之阴阳，以阴长为主促进卵泡的发育成熟，阴长之极，重阴转阳，于氤氲之时泻出元精，之后，重阴转阳，阴重阳旺，阴阳俱可，为孕育胞胎提供条件。卵巢颗粒细胞为卵泡发育成熟后随之泄出的人之元精，在一定程度上可以反映机体肾阳之盛衰。肾气虚，则冲任虚衰不能摄精成孕；肾阳虚，命门火衰，则生化失期，有碍子宫发育或不能触发氤氲乐育之气以致不能摄精成孕；肾阴虚而致热扰冲任血海，均不能摄精成孕，以致女性生殖功能下降。有研究已经证实补肾中药能够从基因、分子生物学、蛋白质等多个层次影响卵细胞质量，改善人类生殖能力。

3“生殖之精”之卵巢颗粒细胞增殖机理探讨

基于GPER/EGFR/MAPK信号转到通路探讨“生殖之精”之卵巢颗粒细胞增殖机理。G蛋白偶联雌激素受体(GPER)是上世纪90年代从不同的细胞株中克隆获得的一种蛋白偶联受体家族中的新型雌激素受体[3]，广泛分布于多个系统的组织细胞中，包括神经系统、生殖系统、泌尿系统、免疫系统及循环系统等，卵巢、子宫、胎盘、前列腺、脑、心脏、肝脏、淋巴、乳腺等组织均发现了该受体的分布[4-6]，且发现其在多种癌细胞包括乳腺癌[3]、卵巢癌[7]、子宫内膜癌[8]、甲状腺癌[9]、睾丸生殖细胞癌[10]以及前列腺癌[11]中均有表达。其作用方式主要是通过与雌激素受体结合后活化并释放肝素结合性表皮生长因子激活EGFR，进而产生增殖效应以调控细胞增殖。表皮生长因子受体(EGFR)是受体酪氨酸蛋白激酶(RPTK)受体家族中的一员，为单次跨膜受体，其配体表皮生长因子(EGF)与生长、分化、免疫、肿瘤等有密切的关系。近年来有研究发现EGF能够调节卵巢颗粒细胞的增殖与分化。如文献报道[12]，EGF能够通过旁分泌的方式与其受体结合，从而调节卵巢颗粒细胞的增殖和性激素的分泌，从而影响卵泡的生长发育与生殖功能的调节。马会明等[13]通过动物实验证明一定剂量的EGF 对小鼠颗粒细胞增殖效应明显，EGF能够通过活化小鼠卵巢颗粒细胞的PI3K/AKT信号通路，促进颗粒细胞生长、增殖。丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)是哺乳动物体内广泛存在的一种激酶，主要参与调控细胞的增殖、分化与凋亡。其作用途径主要有三条：第一，细胞外信号调节蛋白激酶(extracellularsignal regulated kinase，ERK)途径；第二，JNK途径；第三，p38MAPK途径。其中ERK途径是细胞增殖分化的重要途径。有报道指出，ERKl/2通路参与了FSH 对卵巢颗粒细胞甾类激素生成的调控过程[14]，是卵巢颗粒细胞增殖的重要信号通路，并主要通过细胞周期蛋白而发挥作用。

细胞周期是细胞生命活动的基本过程,细胞在周期时相的变迁中进入增殖、分化、衰老和死亡等生理状态。随着近年来研究的进展,细胞周期蛋白的种类越来越多，CyclinD是1991年由Motokura等[15]在研究甲状旁腺癌时首先分离,它的主要功能是调节细胞周期中G1/S期的过渡,其合成是在G1早期,并到G1后期达高峰,进入S期前降解,随后合成的是cycnilE。CyclinE是哺乳动物的另一种G1 期细胞周期蛋白,与相应的细胞周期蛋白依赖激酶结合，参与细胞进入S期。在卵巢颗粒细胞中，FSH通过cAMP-PKA信号转导通路激活细胞外调节蛋白激酶(ERK)，促进细胞周期蛋白cyclinD2 表达，进而推动颗粒细胞增殖[16-17]。

4GPER/EGFR/MAPK信号通路促进人类生殖能力的研究

张明敏等[18]通过研究补肾安胎方(菟丝子、桑寄生、川断、丹参、黄芪、当归)对胚胎着床障碍小鼠子宫内膜EGFR表达的影响，证实补肾中药能够提高EGFR的表达。许静云等[19]通过研究补肾中药对EGF表达的影响，证实菟丝子提取物可以促进大鼠卵巢颗粒细胞EGF的表达，六味地黄丸、菟丝子黄酮可以促进雷公藤多苷对生殖损伤的恢复。李岚等[20]通过研究补肾化瘀方对PCO大鼠卵巢颗粒细胞表皮生长因子受体表达的影响，证实补肾化瘀中药能够改善PCO大鼠卵巢颗粒细胞EGFR的表达。

5展望

近年来，由于生活方式的变化、妊娠年龄的推后以及一大批高龄失独家庭的出现，不孕不育患者人数逐年增加，如何改善人类生殖能力，提高人类生育水平成为辅助生殖领域亟待解决的问题。GPER/EGFR/MAPK信号通路可能参与促进颗粒细胞增殖并为“肾主生殖”理论的提供微观化解释。关于此信号转到通路介导细胞增殖的研究目前了解尚少，尚有待于临床与科研的进一步研究和考证。

参考文献

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Discuss the proliferation mechanism of ovarian granulosa cell Based on the theory of “kidney main reproductive”

YU Jianbin1LIAN Fang2

1.Shandong Traditional Chinese Medicine university,Jinan 250011,China;2.Reproductive and Genetic Center of Integrated Traditional and Western Medicine Affiliated Hosptal Shandong T.C.M University,Jinan 250011,China

Abstract:The ovarian granulosa cell proliferation is an important part of the human reproductive capacity. Based on the overview of GPER/EGFR/MAPK can promote protein involved in signaling pathways in granulosa cell proliferation ,we guess preliminarily it play a role its relationship with human reproduction and enrich the theory of "kidney main reproductive", hoping to provide new research ideas and methods for the ovarian granulosa cell proliferation in the field of Chinese and western medicine treatment .

Key words:signaling pathways； cell proliferation；traditional Chinese and western medicine ；kidney main reproductive

(收稿日期：2015.11.26)

【中图分类号】R339.2+1

【文献标志码】A

【文章编号】1007-8517(2016)04-0073-02

作者简介：蔚建斌,山东中医药大学2013年在读硕士。通信作者：连方(1955-)，女，主任医师。研究方向：中医妇科。E-mail：yuyi1o@126.com

基金项目：基于关键基因表达调控网络的肾主生殖理论基金(81473120)(国家自然科学基金)。