DEK和Ki-67表达对伊立替康治疗转移性结直肠癌的预测价值

邢维山孔繁勇王 研林黎娟，*

（1 丹东市第一医院肿瘤科，辽宁 丹东 118000；2 辽东学院医学院分子医学研究室，辽宁 丹东 118003）

DEK和Ki-67表达对伊立替康治疗转移性结直肠癌的预测价值

邢维山1孔繁勇2王 研2林黎娟1，2*

（1 丹东市第一医院肿瘤科，辽宁 丹东 118000；2 辽东学院医学院分子医学研究室，辽宁 丹东 118003）

目的 探讨DEK和Ki-67蛋白表达对伊立替康治疗转移性结直肠癌疗效的预测价值。方法 44例转移性结直肠癌（CRC）术后患者，给予伊立替康+5-FU+亚叶酸治疗；免疫组化检测其DEK和Ki-67蛋白表达情况。结果 44例患者中DEK和Ki-67表达明显相关；DEK和Ki-67阳性表达的患者化疗后总有效率分别明显低于阴性者；DEK和Ki-67阳性患者中位生存时间也均明显低于阴性表达者。结论 DEK和Ki-67检测对伊立替康治疗转移性CRC具有较好的预后预测价值。

DEK；Ki-67；伊立替康；CRC；转移性；预测

结直肠癌（CRC）是常见的恶性肿瘤之一，全球年发病例数超万［1-2］。DEK和Ki-67均是衡量肿瘤增殖活性的癌基因；有研究表明，DEK和肿瘤的化疗抵抗明显相关，而Ki-67被认为是判断结直肠癌化疗疗效及预后的重要指标［3］。伊立替康为主的治疗方案对晚期CRC的生存期有明显改善，使其成为治疗转移性的CRC的关键药物［4］。本研究旨在探讨DEK和Ki-67蛋白对伊立替康治疗转移性结直肠癌疗效的预测价值。

1　材料与方法

1.1一般资料：收集丹东市第一医院2010年1月至2015年5月的确诊为转移性CRC的患者44例，男性32例，女性12例，年龄27～81岁；直肠癌19例，结肠癌25例。转移部位有肝脏、肺、骨、盆腔、肾上腺和淋巴结等。所有患者术前均未经放疗和化疗，有可测量的病灶，治疗前肝、肾和骨髓功能正常，所有患者随诊18个月。

1.2用药方案：第1天盐酸伊立替康180 mg/m2和亚叶酸300 mg/m2持续静脉滴注，第l～5天5-FU 600 mg/m2静脉滴注，4周重复1次，共使用6个周期。化疗前使用格拉斯琼止吐，白细胞低于3×109/L时，使用重组人粒细胞集落刺激因子治疗，腹泻时用易蒙停或奥曲肽治疗。用药后每周观察血常规和肝、肾功能及胃肠道不良反应等。

1.3免疫组化SP法进行免疫组化检测：组织蜡块消除内源性过氧化物酶，3%过氧化氢溶液和甲醇室温下孵化15 min，0.01 mol/L柠檬酸钠缓冲20 min的抗原修复。DEK（美国BD）和ki-67（丹麦Dako）抗体4 ℃过夜后二抗体孵化30 min，DAB显色，苏木精复染，中性树胶封固。DEK和Ki-67均为核表达。阳性细胞数＜5%示为阴性，阳性细胞数≥5%为阳性。

1.4疗效评定：采用RECIST1.0标准进行疗效评定［5］。目标病灶消失为完全缓解（CR）；基线病灶长径总和缩小≥30%为部分缓解（PR）；基线病灶长径总和增加≥20%或出现新病灶为疾病稳定（PD）；基线病灶长径总和有缩小但未达PR或有增加但未达PD为疾病进展（SD）。CR+PR计算有效率。

1.5统计学分析：利用SPSS17.0统计学分析，计数资料以%表示，组间比较采用t检验，采用Spearman进行相关性分析，以P＜0.05为差异显著。

2　结 果

2.1DEK和Ki-67在转移性CRC中的表达及其相关性：免疫组化结果显示，21例CRC组织呈DEK阳性表达，23例呈阴性表达，17例呈Ki-67阳性表达，27例呈阴性表达；Spearman相关性分析结果显示，44例CRC组织中DEK和Ki-67蛋白表达呈明显相关性（P=0.011）。

2.2DEK和Ki-67表达与治疗效果的相关性：44例转移性CRC患者经药物治疗后，CR 6例，PR 17例，PD 15例，SD 6例，总有效率为52.3%（23/44）。21例DEK阳性表达的CRC患者化疗后总有效率为38.1%（8/21），明显低于DEK阴性表达的患者65.2%（15/23）；同样Ki-67阳性表达的CRC患者化疗的总有效率23.5%（4/17）也明显低于阴性表达者70.4%（19/27）。以上结果说明DEK和Ki-67蛋白对CRC的化疗疗效有预测价值。

2.3DEK和Ki-67蛋白表达与治疗后生存期的关系：44例转移性CRC患者治疗后的中位生存时间为（7.81±5.21）个月，其中，DEK阳性患者为（6.43±3.94）个月，DEK阴性患者为（9.33±3.62）个月，前者总生存期明显低于后者（P=0.033）；Ki-67阳性患者为（6.78±3.49）个月，Ki-67阴性患者为（9.47±4.36）个月，前者总生存期明显低于后者（P=0.038）。

3　讨 论

尽管有了先进的化、放疗技术辅助手术切除治疗，CRC患者生存质量及5年生存率仍很低。盐酸伊立替康是喜树碱衍生物，相比喜树碱有较高的水溶性，可在体内代谢为具有生物活性的7-乙基-10-羟基喜树碱，具有广谱抗肿瘤活性。1996年，伊立替康在美国首次获批用于治疗5-FU难以控制的转移性CRC，随后获批为联合5-FU/LV治疗转移性CRC的一线药物。临床试验表明，伊立替康为主的治疗方案对转移性CRC患者的生存期有明显改善，使其成为治疗转移性的CRC的关键药物。

原癌基因DEK是一个新发现的DNA拓扑结构调节因子，为高度保守的可磷酸化的核蛋白，优先表达于增殖活跃的恶性细胞［6］。该基因在多种恶性肿瘤中过表达，对肿瘤的发生、发展及抗药性具有明显的作用。作为能够结合多种染色质、具有多重功能的细胞因子，DEK可能在细胞中因其干扰作用而导致严重的不良反应。增殖标记抗原Ki-67是增殖细胞在G1、G2和M阶段表达的基因，常常被用作肿瘤扩散和攻击性的标记，对CRC患者的预后有重大影响；Ki-67也是衡量肿瘤增殖活性的判断大肠癌患者化疗疗效及预后的重要指标。在本项研究中发现，DEK在转移性CRC组织的表达与Ki-67之间呈正相关。

研究显示，伊立替康联合5-FU/亚叶酸钙治疗31例转移性大肠癌中直肠癌患者有效率41.67%，结肠癌患者有效率27.78%。我院采用伊立替康联合5-FU/亚叶酸本方案治疗44例转移性CRC患者的有效率为52.3%，其治疗效果更为明显；另外，DEK与Ki-67阳性患者中位生存时间均高于阴性患者，前者总生存率均明显低于后者。因此，DEK和Ki-67在伊立替康治疗转移性CRC具有较好的预后预测价值。

［1］Lin L，Piao J，Gao W，et al.DEK over expression as an independent biomarker for poor prognosis in colorectal cancer［J］.Bmc Cancer，2013，13（3）：771.

［2］万德森.结直肠癌流行病学与预防［J］.中国中西医结合外科杂志，2011，17（1）：3-7.

［3］Guillemette C，Lévesque É，Rouleau M.Pharmacogenomics of Human Uridine Diphospho-Glucuronosyltransferases and Clinical Implications［J］.Clin Pharmacol Therapeut，2014，96（3）：324-339.

［4］Loupakis F，Cremolini C，Masi G，et al.Initial therapy with FOL FOXIRI and bevacizumab for metastatic colorectal cancer［J］.N Engl J Med，2014，371（17）：1609-1618.

［5］陈耐华.RECIST1.1标准和RECIST1.0标准对大肠癌肝转移疗效评价的比较［J］.中国当代医药，2015，22（32）：63-65.

［6］王璇，黄绍辉，於丽乔，等.DEK原癌基因与口腔鳞状细胞癌的关系［J］.上海口腔医学，2014，23（1）：75-79.

R735.3+7

B

1671-8194（2016）26-0106-02