PRRSV、PCV2、PRV、CSFV疫苗间的相互干扰作用

徐文娇， 张 琦， 吴家强， 彭 军*

（1.山东农业大学动物科技学院，山东  泰安 271000；2.山东省农业科学院畜牧兽医研究所，山东  济南 250100）

PRRSV、PCV2、PRV、CSFV疫苗间的相互干扰作用

徐文娇1， 张 琦1， 吴家强2， 彭 军1*

（1.山东农业大学动物科技学院，山东  泰安 271000；2.山东省农业科学院畜牧兽医研究所，山东  济南 250100）

近年来，我国猪病毒病疫情越来越复杂，其中猪繁殖和呼吸综合征（PRRS）、猪圆环病毒病（PCVD）、猪伪狂犬病（PR）以及猪瘟（CSF）是公认的影响全球养猪业的重大疾病。为了防控疫情，控制猪场传染病迫在眉睫，其关键在于疫苗免疫接种。当疫苗进入动物体后诱导机体产生特异性免疫应答，从而达到免疫预防作用。同时，一种疫苗诱导产生的免疫应答反应又可能对另一种疫苗免疫产生影响，能够增强疫苗免疫效果或干扰疫苗免疫，因此研究疫苗间的相互作用是十分重要的。近年研究发现，CSFV与PRRSV疫苗同时免疫时的免疫效果不如单独免疫；在PCV2阳性猪场免疫PCV疫苗能够显著增强CSFV疫苗的免疫效果，降低疾病风险；同时对母猪免疫CSFV疫苗和PRV疫苗可以有较好的免疫反应，2种疫苗在生产实践中并无干扰作用；其他疫苗之间的相互作用还有待进一步研究。

猪瘟；猪蓝耳病；伪狂犬病；猪圆环病毒病；疫苗；干扰作用

相关研究表明，猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪伪狂犬病毒（PRV）、猪瘟病毒（CSFV）会引起猪的繁殖障碍性疾病或呼吸道疾病。这些疾病对养猪业危害极大，我国是养猪大国，疾病防控便显得尤为重要，而研究疾病及其相关疫苗又是防控疾病必不可少的。免疫过程中免疫程序的安排是影响免疫效果的重要因素，因此我们需要了解疫苗间的相互作用，避免免疫失败。

1　猪瘟及其疫苗

1.1猪瘟与猪瘟病毒

猪瘟（CSF）是由猪瘟病毒（CSFV）引起的猪的一种急性或慢性、热性和高度接触性传染病，可引起各种年龄阶段的猪发病。猪瘟病毒属于黄病毒科瘟病毒属，为单股正链RNA病毒。猪瘟主要发生于亚洲大部分国家和地区、中美及南美、非洲及欧洲部分国家。世界动物卫生组织（OIE）将猪瘟列为A类传染病，中国农业部将其列为一类传染病，是我国目前猪强制免疫的主要传染病之一。CSF可以感染任何一个生长阶段的猪，但仔猪在断奶后的一段时间比其他阶段更容易感染CSFV。该病流行广泛，一年四季均可发生，一般春秋季较为严重，死亡率高，对养猪业危害极大。

1.2猪瘟疫苗

疫苗接种可有效防范该病，有些地区也采取疫苗接种再辅之以感染猪扑灭政策。1955年我国成功研制的猪瘟兔化弱毒疫苗是全世界使用最广泛也是最优秀的疫苗，对各种猪均具有优良的免疫原性和免疫效果，安全性好，不少国家已经使用该疫苗消灭了猪瘟。疫苗接种不仅保护种猪不发生猪瘟，同样也减少了CSFV向接触猪的传播。1956年起我国广泛使用兔化弱毒疫苗，为我国控制猪瘟做出了巨大贡献。目前国内市场主要使用细胞苗和兔组织苗这2种疫苗。

2　猪繁殖与呼吸综合征及其疫苗

2.1猪繁殖与呼吸综合征

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是一种由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的一种高度接触性传染病。它主要以母猪严重的繁殖障碍，断奶猪普遍发生肺炎、生长迟缓以及死亡率增加为主要症状，因为部分病猪的耳部因高热会发紫，又称“蓝耳病”。该病最早于1987年在美国中西部发现，开始由于病原不能明确，欧洲一些国家称其为“猪神秘病”。1991年，荷兰分离到该病的病原LV病毒株，由欧盟将其命名为猪繁殖与呼吸综合征病毒。我国内地于1996年由郭宝清［1］等首次在暴发流产的胎儿中分离到PRRSV，此后全国许多省、市和地区也有此病毒，并在这些地区分离到了PRRS美洲型毒株。该病的发病率高、死亡率也高，治愈率较低。

2.2PRRSV疫苗

PRRSV能水平传播同时也能垂直传播，致使该病在世界各地流行，因此许多国家开展了对PRRSV的深入研究。PPRSV具有遗传多样性，按基因型分为欧洲型和美洲型，其中欧洲型又可分为多个亚型，不同基因型、亚型之间的差异非常大。目前国内外主要使用的是灭活苗和弱毒疫苗，其中灭活苗中包含佐剂。一般认为弱毒疫苗的效果更好，并得到了广泛使用，它在减少疾病发生、疾病严重性、病毒血症的持续时间和病毒逃逸中都表现出一定的效果，能保护猪不出现临床症状，在同种形势下保护效果会更加显著［2］。但是其中也有许多问题，包括存在散毒问题和病毒返强性，并且返强的几率非常高。1999年有人发现弱毒疫苗能够成功帮助机体预防由于PRRSV入侵而产生的呼吸道各种病症［3］。但让人担忧的是，弱毒疫苗在体内不仅产生免疫效力，还对机体各个器官组织产生伤害［4］，所以弱毒疫苗残余毒力造成的再流行使得其在国内很难进行推广。

3　猪伪狂犬病及其疫苗

3.1猪伪狂犬病

伪狂犬病（PR）是由伪狂犬病病毒（PRV）引起的一种高死亡率的急性传染病。猪伪狂犬病毒可以侵害各种日龄阶段的猪，主要以感染猪的体温升高，公猪表现繁殖障碍，妊娠母猪引起流产、死胎，以及新生仔猪表现神经症状为临床诊断特征。伪狂犬病在1813年首次发生于美国的牛群中，1902年Aujeszky首次分离出该病毒，因而又名Aujeszkydisease。该病目前分布于全世界50多个国家和地区，是最重要的猪传染病之一。

3.2猪伪狂犬病疫苗

预防和控制甚至消灭伪狂犬病最主要的措施之一是进行疫苗接种，国内外已研制出猪伪狂犬病的常规弱毒疫苗、弱毒灭活苗、野毒灭活苗及基因缺失苗（缺失gE糖蛋白的基因工程苗目前已成为世界首选使用的疫苗），这些疫苗的应用可以有效地治疗猪感染后的临床症状，也能够减少疾病的发生。当猪同时接种两种不同的基因缺失疫苗后，病毒会发生基因重组现象。而弱毒苗具有较好的免疫原性，并且价格低廉，但必须经过充分致弱，否则可能会病毒返强而导致疾病流行。弱毒疫苗还可建立潜伏感染，并有可能散毒。

4　猪圆环病毒病及其疫苗

4.1   PCV2与PCVD

猪圆环病毒2型（PCV2）是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）的主要病原，临床上常与猪高致病性繁殖与呼吸综合征、猪口蹄疫以及猪细小病毒病等混合感染。PCV2可引起猪呼吸道疾病综合征（PRDC），猪皮炎与肾病综合征（PDNS），仔猪传染性先天性震颤（CT）等多种疾病，这些与PCV2相关的疾病统称为猪圆环病毒病（PCVD），主要侵害对象为仔猪和育肥猪。该病可以导致猪群产生严重的免疫抑制，从而继发其他传染病。我国于2001年首次发现，在我国猪群中广泛流行，给养猪业造成巨大的损失。猪圆环病毒已经成为危害世界养猪业的重要传染病。

4.2PCV疫苗

接种疫苗是防控PCVD的有效手段，目前研制成功的PCV2商品化疫苗有灭活疫苗，亚单位疫苗和嵌合疫苗，市场上广泛销售的共7种，大量实验证明这些疫苗使用后明显降低了猪群的发病率和死亡率。在国内有中国农业科学院哈尔滨兽医研究所刘长明研究员研制出的中国首例PCV2灭活疫苗（LG株）和南京农业大学姜平教授研制的PCV2灭活疫苗（SH株）。这两种疫苗目前正在全国大部分地区推广使用，对防控我国PCV2感染发挥了重要作用。

5　猪瘟疫苗与猪繁殖与呼吸综合征疫苗间的相互干扰作用

我国半数以上的猪场存在PRRSV 和CSFV的共同感染，并且在猪瘟免疫效果较差的猪场，其PRRS流行情况也很严重，难以控制。自从2007年PRRS纳入国家重大动物疫病管理后，生猪的强制免疫病种由原来的CSF等2种增加到3种，一头猪需要进行多种免疫，免疫的程序也各不相同，因此CSF疫苗与PRRS疫苗的相互干扰作用的研究对养猪业的免疫更具指导意义。王剑锋等［5-6］在同时注射猪瘟和猪蓝耳病疫苗对猪瘟抗体效价的影响试验中指出，同时免疫CSF疫苗和PRRS疫苗的试验猪，CSF的抗体水平上升推迟到免疫后35 d以上，也对PRRS抗体的产生起到干扰作用。该文表明共同免疫注射CSFV和PRRSV疫苗时，两种疫苗相互影响，产生干扰作用，使免疫效果低于单独免疫。这与窦鹏勋［7］等人的猪瘟、口蹄疫与猪蓝耳病疫苗单独和联合免疫后猪体抗体水平变化的试验中的观点是一致的，在此试验中，PRRS疫苗推迟了CSF抗体的上升时间，对CSF的免疫效果有轻微的影响，而同时免疫CSF活疫苗和PRRS灭活疫苗的抗体水平低于单独注射PRRS灭活疫苗。得到相同结论的还有杨先富［8］等人，他们在疫苗不同组合免疫接种的试验中发现，CSF的抗体平均效价在免疫后35 d才达到峰值，推迟一周后达到免疫合格，并由此推论，PRRS疫苗对CSF疫苗有轻度的抑制作用。但从CSFV与PRRSV疫苗单独、两两组合免疫后的情况来看，同时免疫基本能达到与单苗同样的免疫效果，因此他们认为虽然PRRS疫苗对CSF疫苗有轻度的抑制作用，但总体上不影响CSF疫苗的免疫效果。以上结论也与华树明［9］等人的研究结果相似。因此可以得出，PRRS疫苗与CSF疫苗有相互的干扰作用，使免疫效果低于单独免疫，但在总体上来讲影响不大。

6　猪瘟疫苗与猪圆环病毒疫苗的相互干扰作用

目前国内猪的传染病众多，猪场经常会发生多种病原混合感染。司兴奎［10］等通过建立对单独接种猪瘟疫苗组及接种猪瘟疫苗同时进行PCV2感染组和PCV2病毒血症出现后接种猪瘟疫苗组不同时相血清中的猪瘟特异性抗体水平进行比较研究，证实了PCV2的感染会对猪瘟疫苗体液免疫应答有一定程度的抑制作用。张敬峰［11］等通过对照试验表明PCV2阳性猪场在不免疫猪圆环病毒疫苗的情况下，接种猪瘟疫苗时，无CSFV 抗体产生或只产生低水平抗体，增加猪瘟免疫失败的风险，在PCV2阳性猪场免疫猪圆环病毒疫苗能够显著增强猪瘟疫苗的免疫效果。潘艳［12］等经PCR证实对PCV2为阳性的试验猪接种猪瘟疫苗，经多次猪瘟和PCV2的抗体检测，表明PCV2阳性猪免疫猪瘟疫苗后未能产生有效抗体，也说明PCV2的感染会抑制猪瘟疫苗的免疫效果。这是由于PCV2感染会导致猪瘟疫苗诱导的免疫应答水平低下，同时引起外周血中淋巴细胞缺乏、细胞因子的严重匮乏或转录紊乱，造成猪瘟疫苗免疫失败［13］。因此在PCV2阳性猪场及时免疫猪圆环病毒疫苗是必要的，在其免疫基础上再进行猪瘟疫苗的接种，可明显提高疫苗免疫效果。

7　猪瘟疫苗与伪狂犬病毒疫苗的相互干扰作用

林德锐［14］等用猪瘟活疫苗（传代细胞源）和猪伪狂犬活疫苗（Bartha- K61 株）给健康仔猪同时分点注射和混合注射，并不影响各自免疫抗体的产生，但试验仔猪为猪瘟和伪狂犬母源抗体为阴性的仔猪。刘明亚［15］等通过临床检测猪瘟抗体水平和伪狂犬抗体水平证明了当机体水平较高时实施免疫接种，疫苗病毒会被体内的抗体中和而起不到保护作用。说明仔猪的母源抗体水平越高，其对疫苗的抑制作用就越强，因此要避开在母源抗体高峰期接种疫苗。同时证明了应用猪瘟疫苗和伪狂犬疫苗免疫能使母猪产生良好的免疫反应，从而使仔猪获得较高水平的母源抗体。曹松嵘［16］等通过调查部分未接种伪狂犬疫苗的伪狂犬阴性猪场仍在最后感染了伪狂犬野毒，可能是由于时间的推移使商品猪母源抗体消失而在猪群中形成了伪狂犬免疫空白群体。所以猪场要制定合理的免疫程序，对猪瘟和伪狂犬疫苗进行适时的免疫，实现猪场经济效益最大化。封琳［17］等通过检测从兔血清中提取的猪瘟病毒抗体与伪狂犬病毒间的反应得到的交叉反应结果表明猪瘟抗体不仅对猪瘟病毒呈阳性，还可以与伪狂犬病毒结合，并且结合能力相当于对猪瘟病毒结合能力的一半。由此可见同时进行猪瘟、伪狂犬病毒免疫时，应科学合理的安排疫苗用量和间隔时间，这对猪场防控猪瘟和猪伪狂犬病具有重要指导意义。

8　讨论

呼显生［18］等为评价猪瘟、伪狂犬病和猪繁殖与呼吸综合征疫苗的免疫效果及相互干扰情况，对仔猪分组应用CSF、PR和PRRS疫苗进行免疫试验，监测仔猪体内抗体水平，得出结果为不同免疫程序下接种三种疫苗仔猪体内抗体水平是不同的，免疫程序不当可能会造成免疫失败。段正赢［19］等于不同日龄对20日龄仔猪免疫CSF、PR和 PRRS疫苗，比较猪群免疫前后的抗体水平，得出与前者类似结论。因此猪场应制定合理免疫程序，选择最优化的免疫方案。

在生产实践中，通常的免疫方法是不同的疫苗分别免疫注射，多次的抓猪会造成反复的应激反应，所以这种操作方法应得到相应的改进。笔者认为CSFV与PRRSV疫苗同时免疫时的免疫效果不如单独免疫，但总体上对免疫效果无显著影响，所以两者便可同时进行免疫；而在PCV2阳性猪场中，免疫PCV疫苗则能够显著增强CSFV疫苗的免疫效果，降低疾病风险，所以先免疫PCV疫苗后免疫CSFV疫苗可能会效果更好；同时，对母猪免疫CSFV疫苗和PRV疫苗可以有较好的免疫反应，两种疫苗在生产实践中并无干扰作用。因此选择两种或多种合适的疫苗的同时分点免疫，不仅可以省工省力，还可减少不良应激，且对免疫效果并无影响，甚至会效果更好。根据相关文献报道，已有部分地区将此种免疫程序运用到生产实践，效果良好。与此同时，笔者建议在同时分点免疫后，再加强免疫1次。因为动物免疫后，机体产生免疫记忆，所以加强免疫后抗原刺激机体的免疫系统迅速产生更高水平的免疫保护，可以获得更确切的免疫效果。在未来的养猪业发展过程中，同时分点免疫便显得尤为重要，因为这样不仅可以减少应激反应降低成本，还对研发经济方便的二联苗起到了促进作用，更有利于养猪业的蓬勃发展。

［1］ 郭宝清， 陈章水，刘文兴，等. 从疑似PRRS流产胎儿分离PRRSV的研究［J］. 中国畜禽传染病， 1996（2）：1-4.

［2］ MURTAUGH M P， XIAO Z， ZUCKERMANNS F.Immunological responses of Swine to porcine reproductive and respiratory syndrome virus infection［J］. Viral Immunol， 2002， 15： 533-547.

［3］ MAVROMATIST I， KRITAS S K， ALEXOPTTLOS C， et a1. Field evaluation of a live 1taeeine against porcine reproductive and respiratory  syndrome in fattening pig［J］.Zentralbl Veterinarmed B，1999，46 （9）：603-611.

［4］ MENGELING W L， LAGER K M， VORMALD A C， et al. Comparative safety and efficacy of attenuated single-strain and multi-strain vaccines for porcine reproductive and respiratory syndrome［J］.VetMicrobiol， 2003，93（1）：125-138.

［5］ 王剑锋，杨宗照，谷艺.同时注射猪瘟和蓝耳病疫苗对猪瘟抗体效价的影响试验［J］. 浙江畜牧兽医， 2007，32（1）：33.

［6］ 金颜辉， 黄盛兴，黄雁，等.猪蓝耳病免疫抗体监测问题探讨［J］. 中国动物检疫， 2008 ，25（5）： 36-37.

［7］ 窦鹏勋，葛建强，张勇，等.3种疫苗单独和联合免疫对猪抗体水平的影响［J］.安徽农业科学，2009，37 （31）：15259-15261.

［8］ 杨先富，汪俭，龙文波，等.FMD、HC 和PRRS疫苗不同组合接种免疫效果的比较［J］.贵州畜牧兽医.2011，35 （1）： 3-8.

［9］ 华树明. 高致病性蓝耳病疫苗与口蹄疫、猪瘟疫苗同时分点注射对口蹄疫、猪瘟抗体效价的影响试验［J］. 浙江畜牧兽医， 2008（4）： 6-7.

［10］ 司兴奎，郭鑫，杨汉春.猪圆环病毒2型感染对猪瘟疫苗体液免疫应答的影响［J］.中国兽医学报，2009，29 （7）：826-829

［11］ 张敬峰，赵永前，孙华伟，等.猪圆环病毒2型感染对猪瘟疫苗免疫效果的影响［J］.山东农业科学，2015，47 （8）：86-88.

［12］ 潘艳，李军，禤雄标，等.猪瘟疫苗在猪圆环病毒2型阳性猪场的免疫效果观察［J］.动物医学进展.2010.31 （11）： 23-26.

［13］ 赵丹萍.猪圆环病毒2型感染影响猪瘟弱毒疫苗免疫效果的机制［D］. 保定： 河北农业大学，2012.

［14］ 林德锐，皇培刚，罗文琼，等.猪瘟和伪狂犬疫苗几种免疫方式的免疫效果评价［J］.中国动物保健，2014 （5）： 22-25.

［15］ 刘明亚，陈闻李玉峰.猪瘟和伪狂犬抗体水平对疫苗免疫的影响［J］.畜牧与兽医. 2010， 42 （2）： 68-70.

［16］ 曹松嵘.当前猪场免疫程序中存在的问题［J］. 兽医导刊， 2011（9）： 61-62.

［17］ 封琳.猪瘟病毒抗体的纯化及其对猪伪狂犬病毒的结合作用［D］. 广州：暨南大学， 2012.

［18］ 呼显生，黄克群，许英.猪瘟、猪伪狂犬病和猪繁殖障碍与呼吸综合征的免疫程序设计［J］. 吉林畜牧兽医， 2013（12）： 11-13.

［19］ 段正赢，杨克礼，伍锐，等.猪瘟、猪伪狂犬病及猪繁殖与呼吸综合征的免疫试验［J］.甘肃畜牧兽医，2010（6）： 4-6.

2016-05-06）

“十二五”国家科技支撑计划项目课题（2015BAD12B03）

徐文娇（1994-），女，山东济南人，本科生，动物医学专业，1536933557@qq.com

张琦（1995-），男，山东枣庄人，本科生，动物医学专业，zhangqivet@163.com

彭军，山东诸城人，博士，从事猪病病原学与免疫防控研究；E-mail： jpeng@sdau.edu.cn