Nature：缺氧诱导因子-2α拮抗剂对临床前肾癌模型的疗效评价研究

朱国栋 介评

(西安交通大学第一附属医院泌尿外科,陕西西安 710061)

Nature：缺氧诱导因子-2α拮抗剂对临床前肾癌模型的疗效评价研究

朱国栋 介评

(西安交通大学第一附属医院泌尿外科,陕西西安 710061)

肿瘤；肾细胞癌；基因；分子生物学；缺氧诱导因子-2α；PT2399

透明细胞型肾细胞癌(ccRCC)是一类最常见的肾癌，在其癌细胞中，肿瘤抑制蛋白pVHL通常表达失活，导致缺氧诱导因子-2α(HIF-2)累积。HIF-2α是一种细胞核转录因子，具备bHLH-PAS蛋白结构域，参与了与血管生成有关的多种肿瘤形成过程，长期以来被认为无法做为理想的药物靶标。但有学者不断研究发现了一种类似药物的小分子化合物PT2399，可与HIF-2α蛋白PAS-B结构域结合，发挥降解HIF-2的效应，从而抑制其生物学效应。最近，《自然》杂志发表了很有意义的研究(CHOH,DUX,RIZZIJP,etal.On-targetefficacyofaHIF-2αantagonistinpreclinicalkidneycancermodels.Nature，2016 539(7627):107-111)。

本文作者构建了一种表达pVHL，同时含有HIF反应性启动子，可驱动萤虫酶(Luc)表达的786-O3XHRE-Luc肾癌细胞株，以及含有CMV启动子的786-OCMV-Luc细胞株。将上述构建好的两种肾癌细胞株接种裸鼠构建动物模型，裸鼠成瘤后，接受PT2399或对照溶媒注射，结果发现，使用PT2399注射两天后，786-O3XHRE-Luc荷瘤裸鼠的Luc荧光信号衰减了60%，但786-OCMV-Luc荷瘤裸鼠或接受溶媒注射的荷瘤裸鼠的Luc荧光强度并无明显变化。对上述接受PT2399处理的荷瘤裸鼠的肿瘤组织研究发现，癌细胞中HIF靶向的mRNA转录水平以及Ki-76染色强度均显著降低，活化型凋亡相关蛋白caspase3增高，肿瘤组织微血管密度降低。作者进一步构建了786-O转移型肾细胞癌细胞株M2A，这种癌细胞在注射裸鼠尾静脉后，可形成多发肺部转移灶，对这一荷瘤裸鼠模型注射PT2399后，转移灶明显萎缩，荷瘤裸鼠生存获益。

作者发现PT2399可抑制VHL缺失的肾透明细胞癌A498细胞株软琼脂克隆形成能力，并抑制癌细胞在裸鼠肾脏原位成瘤；PT2399也可抑制VHL缺失的肾透明细胞癌患者的移植瘤在裸鼠体内生长。另一方面，作者证实PT2399可在荷瘤裸鼠体内降解VHL缺失的UMRC-2以及769-P肾癌组织中HIF2α蛋白，并抑制HIF2α靶基因的转录及表达，但并不能抑制这些肾癌细胞株裸鼠原位肿瘤的生长。为进一步研究上述PT2399的不同效应，作者对VHL缺失的一组ccRCC细胞株中HIF2α以及HIF靶基因对PT2399的应答情况进行检测，结果发现，对PT2399敏感的786-O以及A498癌细胞株中HIF2α的表达水平明显高于对PT2399不敏感的UMRC-2及769-P癌细胞株，PT2399可对前两种癌细胞株中HIF靶基因的转录发挥最大程度的抑制效应。作者推测可能由于癌细胞对HIF2α的依赖性不同，导致PT2399对上述两类细胞株的生长抑制效应不同。作者进一步发现，这些ccRCC细胞株对HIF2α的依赖性与细胞内HIF2α的基础水平关系不大，这些癌细胞株中HIF2α靶基因的转录水平依赖于HIF2α本身。为了深入研究肾癌细胞株对HIF2α依赖性的不同，作者选择对HIF2α依赖性不高的肾癌细胞株RCC10进行研究，结果发现RCC10细胞含有经典的p53R248W突变体，另外UMRC-2以及769-P细胞也存在p53信号通路的突变。值得注意的是，PT2399以及HIF2α基因敲除，可以诱导786-O肾癌细胞株表达p53，这一发现与前人报道的HIF2α可抑制ccRCC细胞株的p53活性完全一致。因此可见，p53信号通路的完整性对于ccRCC细胞株HIF2的依赖性是一个必要非充分条件。

点评：本篇文章作者利用VHL缺失的ccRCC细胞株建立了临床前肾癌动物模型，该模型对HIF2α拮抗剂的应答效应并非完全一致，其治疗效应可能取决于癌细胞内HIF2α以及p53等多种重要蛋白的活性状态。p53信号通路的突变很可能在转移性ccRCC组织中多见，或者在ccRCC患者接受治疗后，出现p53信号通路突变。使用HIF2α拮抗剂是否会使现有肾癌靶向药物的治疗效应得到增强，值得下一步深入探索。

2016-12-09

朱国栋，(1980-)，男(汉族)，博士，主治医师.研究方向：肾癌的基础与临床研究，常见泌尿系肿瘤的腹腔镜微创手术治疗.E-mail：gdzhu@aliyun.com

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10.3969/j.issn.1009-8291.2016.12.017

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