大孔吸附树脂在延胡索生物碱提取分离中的应用

王红红

（天津南开和成科技有限公司，天津 300270）

大孔吸附树脂在延胡索生物碱提取分离中的应用

王红红

（天津南开和成科技有限公司，天津 300270）

Application of macroporous adsorption resin in rhizoma corydalis alkaloid extraction and separation

延胡索生物碱是医学上常用的具有较高药用价值的碱类物质，是各类中草药碱类物质中的一种。但是，怎样有效的将生物碱从延胡索中分离出来，仍然是我国医学界的一大重点问题。本文主要运用了大孔吸附树脂纯化方法，进行了延胡索生物碱提取分离实验，以此优化延胡索生物碱的提取分离方法。

大孔吸附树脂；延胡索生物碱；分离

生物碱是自然界中存在的一种碱类物质，具有较强的活性，一般存在于各类中草药中。延胡索生物碱是从延胡索中提取出的生物碱，它具有极高的药用价值。目前常用的生物碱提取方法主要有渗漉法、大孔吸附树脂纯化法、煎煮法等等。本文主要研究了大孔吸附树脂在延胡索生物碱提取分离中的应用。它的主要原理是利用大孔吸附树脂，吸附延胡索中的生物碱成分，然后再用溶剂将吸附的有效碱性成分洗脱，最终实现提取分离的目的。

1 实验部分

1.1 准备工作

在实验前准备实验所需的器材、试剂等。主要包括紫外线灯、液相色谱仪、大孔吸附树脂、含有1%NaOH的硅胶板，长度为20 cm，宽度10 cm。除此之外，还要准备延胡索提取液20 ml、适量甲醇、乙醚、丙酮液体，准备盐酸、纯净水适量。大孔吸附树脂是从4种树脂中选择出来的，为AB-8，对这种树脂进行了测定，发现它可以有效吸附延胡索生物碱分子。

1.2 树脂预处理和再生

在吸附柱内装入丙酮，丙酮的体积大约为树脂的一半，然后选择40 g大孔树脂，装入吸附柱内，必须要保证树脂完全浸泡在丙酮液体中，约24 h后，用2BV丙酮流过树脂层，再用乙醇流过树脂层，然后用水冲洗，冲洗后使用盐酸浸泡树脂柱，约2～5 h，然后用水流过树脂层，直至流出的水无白色杂物为止，测定水的pH值，若pH值为中性，且流出的水较为清澈，就可以完成树脂的预处理工作。树脂的再生，是指将用过树脂进行再次处理，分离其中的吸附物质及其他杂物，分离方法与预处理方法类似，根据树脂的种类、性质等等，选择合适的方法，将吸附物质分离。一般采用浸泡、冲洗等方法即可。树脂的再生，可以让树脂实现循环反复利用，并且不会影响到使用的效果，实现了资源的节约和环境的保护，具有较高的环保价值。

1.3 吸附容量测定

将准备好的延胡索提取液通过树脂柱，然后收集流出的液体，由于本次实验中准备的提取液为20 mL，因此收集的流出液体也为20 mL，这样便于吸附容量的测定。加入氨水，使液体的pH值为12，然后用乙醚萃取，直至风干后，加入1 mL甲醇将风干物溶解，可以依据我国药典规定的吸附容量测定方法来确定吸附容量。

1.4 洗脱剂的确定

为了选择较为合适的洗脱剂，在实验中分别选择了30%、40%、45%、60%、65%、80%、90%、95%等多种乙醇，分别使用每种乙醇洗脱收集液体，并将洗脱后的液体储存起来 ，鉴定液体的质量。鉴定结果发现，40%与95%的乙醇洗脱液质量较好。但是，40%乙醇可能会洗脱下延胡索中其他碱性物质，因此，将95%乙醇确定为最佳洗脱剂。

1.5 延胡索乙素含量的测定

延胡索生物碱的药理作用很多，但是在所有的作用中，延胡索乙素的作用最为突出，因此，在实验中，一般将延胡索乙素含量作为判定生物碱提取质量的标准。目前常用的含量测定方法主要有高效液相色谱法、紫外分光光度法、毛细管电泳法等等。相对来说，第一种方法的测定结果最为精确，且测定方法易于操作，因此，在本次实验中，采用了第一种测定方法，即高效液相色谱法。

根据实验要求，用树脂柱过滤延胡索提取液，在过滤过程中，用纯净水冲洗，直至流出的液体无色为止。在洗脱时，首先使用40%乙醇，洗脱出液体中的杂质，然后再使用95%乙醇，洗脱后需要将洗脱液体储存起来，储存时要保证每个储存器具中的洗脱液含量相同，并且根据需要加入适量的酒精稀释。选择质量较好的延胡索乙素样品，加入甲醇，使之充分溶解，溶解液为20 mL。然后吸取样品溶解液与实验洗脱液各20 μL，使用色谱测定法测定并计算延胡索乙素浓度，并比较两组液体中的浓度，便可以通过测定液体中的延胡索乙素含量了解提取液的质量。

2 结论

根据结果可知，洗脱液的浓度为0.073%，相对来说，浓度较高，可见使用大孔吸附树脂吸附延胡索中的生物碱成分，具有较好的吸附效果，它可以快速分离出延胡索中的碱性物质，并且，在后期洗脱过程中，40%的乙醇可以洗脱液体中的杂质，95%的乙醇可以达到洗脱的目的。但是，40%乙醇还可能洗脱出延胡索中的其他碱性物质。因此，如果将这种洗脱方法投入实际使用，必须要考虑到它的利弊。尤其是在对生物碱成分要求极其严格的药品中，要合理决定是否使用40%乙醇洗脱提取液，必要时可以直接省略这一步骤，使用95%乙醇完成提取液的洗脱工作。在实验中必须要合理选择树脂种类、洗脱液等，并且要严格按照实验规定操作。同时，在具体实践中，还要考虑到延胡索的自身特性。根据相关研究表明，延胡索提取液中的延胡索乙素在受热的情况下，结构会出现变化，影响液体的质量。因此，在实际生产中，要尽量避免提取液体遭受阳光直射，并且要控制室内的温度。这样才能保证延胡索生物碱的质量。

综上所述，大孔树脂吸附延胡索生物碱的效果较好，它可以快速的将延胡索提取液中的延胡索生物碱成分吸附，经过洗脱剂洗脱后分离出来。相对于其他提取方法，这种方法对环境的污染小，不会排出有害物质及气体，并且具有可再生的优点，同时，这种提取方法简单、容易操作，并且可以快速将生物碱分离出来，具有较高的实用价值。

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(P-02)

R284.2

1009-797X(2016)06-0056-02

A

10.13520/j.cnki.rpte.2016.06.019

王红红（1986-），本科，毕业于河北工业大学，研究方向为固定化酶树脂载体的研发。

2016-02-23