药用植物三楞草的寡糖成分研究

李逢逢，付　晨，王福生

（大理大学药学与化学学院，云南大理　671000）



药用植物三楞草的寡糖成分研究

李逢逢，付晨，王福生*

（大理大学药学与化学学院，云南大理671000）

［摘要］目的：对药用植物三楞草的寡糖化学成分进行研究，以期寻找活性成分。方法：运用硅胶、ODS以及凝胶柱分离三楞草水部位，通过NMR技术鉴定其结构。结果：从三楞草水部位分离得到4个寡糖成分，分别是［O-α-D-glucopyranosyl-（1→4）］2-O-β-D-fructofuranosyl-（2→1）-α-D-glucopyranoside（1）、O-α-D-glucopyranosyl-（1→2）-O-［β-D-fructofuranosyl-（2→1）］2-α-D-glucopyranoside（2）、［O-α-D-glucopyranosyl-（1→2）］2-O-［β-D-fructofuranosyl-（2→1）］2-α-D-glucopyranoside（3）和O-α-D-glucopyranosyl-（1→2）-O-［β-D-fructofuranosyl-（2→1）］3-α-D-glucopyranoside（4）。结论：这4种寡糖成分首次从该药用植物中分离得到。

［关键词］杭子梢属；三楞草；化学成分；寡糖

［DOI］10. 3969 / j. issn. 2096-2266. 2016. 04. 002

白族药三楞草为豆科杭子梢属植物三棱杭子梢（Campylotropis trigonoclada（Franch.）A.K. Schindl.）的全株〔1〕。三楞草作为药用植物应用广泛，常用于外感发热、水肿、癃闭、淋症、赤痢、肠风下血、关节疼痛及跌打损伤〔2〕。白族民间用于治疗泌尿系统疾病，如肾炎、前列腺炎和结石等疗效显著。目前未见文献报道其化学成分的研究。

自然界中存在大量的寡糖类化合物，不同的寡糖种类和来源决定了它们特有的生物活性〔3〕。如有降血糖活性〔4〕、增强造血功能活性〔5〕、抗菌活性〔6〕、抗炎活性〔7〕和抗凝血活性〔8〕等，本文对三楞草水部位进行了系统的化学成分研究，从中分离鉴定了4个寡糖类化合物。分别为［O-α-D-glucopyranosyl-（1→4）］2-O-β-D-fructofuranosyl-（2→1）-α-D-glucopyranoside（1）、O-α-D-glucopyranosyl-（1→2）-O-［β-D-fructofuranosyl-（2→1）］2-α-D-glucopyranoside（2）、［O-α-D-glucopyranosyl-（1→2）］2-O-［β-D-fructofuranosyl-（2→1）］2-α-D-glucopyranoside（3）和O-α-D-glucopyranosyl-（1→2）-O-［β-D- fructofuranosyl-（2→1）］3-α-D-glucopyranoside（4）。

1　仪器与材料

1.1实验材料三楞草采于大理苍山西坡，经大理大学段宝忠副教授鉴定为豆科杭子梢属植物三楞草（Campylotropis trigonoclada Franch.）的地上部分。

1.2仪器与试剂NMR用BrukerAM-400型核磁共振仪测定。高效液相色谱用：Agilent 1100 HPLC系统；层析柱；薄层色谱硅胶和柱色谱硅胶均为青岛海洋化工厂产品；日本YMC公司生产的ODS反相硅胶（50 μm）；分离所用试剂均为化学纯。

2　提取与分离

取三楞草干燥茎叶2 kg，粉碎后用95%乙醇冷浸提取，减压浓缩提取液，得乙醇提取物，将乙醇提取物分散于水，然后依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，将提取剩余的水层浓缩浸膏（12.6 g）进行硅胶柱层析，用氯仿-甲醇（9：1，8：2，7：3，6：4，5：5，4：6，3：7，2：8，1：9，0：1）梯度洗脱，得到6个组分A～F。Fr.A反复经硅胶柱层析（氯仿-甲醇）、凝胶柱层析，得化合物1（30.8 mg）。Fr.C反复经硅胶柱层析（氯仿-甲醇）、ODS柱层析（甲醇-水）得化合物2（50.6 mg）。组分Fr.E经反复硅胶柱层析（氯仿-甲醇）、凝胶柱层析得到化合物3（1.2 g）、化合物4（60.3 mg）。

3　实验结果

化合物1（黄色糖浆状液体）〔9〕：1H NMR（400 MHz，D2O）δ：3.99（1H，brd，J = 3.6 Hz，Glu-1），3.62（1H，m，Glu-2），3.06（1H，m，Glu-3），3.35（1H，m，Glu-4），3.29（1H，m，Glu-5），3.15（1H，m，Glu-6），4.51（2H，brd，J=4.0 Hz，Glu-1′，Glu-1′′），3.68（1H，m，Glu-2′），3.40（1H，m，Glu-3′），3.29（1H，m，Glu-4′），3.55（1H，m，Glu-5′），3.20（1H，m，Glu-6′），3.70 （1H，m，Glu-2′′），3.43（1H，m，Glu-3′′），3.30（1H，m，Glu-4′′），3.58（1H，m，Glu-5′′），3.22（1H，m，Glu-6′′），3.48（2H，d，J=10.3 Hz，Fru-1a，1b），3.95 （1H，m，Fru-3），3.75（1H，m，Fru-4），3.53（1H，m，Fru-5），3.50（2H，m，Fru-6）。13C NMR（100 MHz，D2O）δ：105.2（Glu-1′′），75.7（Glu-2′′），72.5（Glu-3′′），71.2（Glu-4′′），84.7（Glu-5′′），63.9（Glu-6′′），99.1 （Glu-1′），74.4（Glu-2′），72.0（Glu-3′），71.1（Glu-4′），83.4（Glu-5′），63.4（Glu-6′），100.2（Glu-1），74.2 （Glu-2），71.5（Glu-3），69.9（Glu-4），79.4（Glu-5），62.1（Glu-6），61.6（Fru-1），104.4（Fru-2），77.5（Fru-3），76.9（Fru-4），82.1（Fru-5），63.7（Fru-6）。经解析确定该化合物为［O-α-D-glucopyranosyl-（1→4）］2-O-β-D-fructofuranosyl-（2→1）-α-D-glucopyranoside。

化合物2（黄色糖浆状液体）〔10〕：1H NMR（400 MHz，D2O）δ：3.88，3.80（2H，d，J=9.5 Hz，Fru-1），4.30（1H，d，J=8.8 Hz，Fru-3），4.09（1H，dd，J=8.8，8.5 Hz，Fru-4），3.81（1H，m，Fru-5），3.85（1H，m，Fru-6a），3.75（1H，m，Fru-6b），3.76，3.70（2H，d，J= 9.5 Hz，Fru-1′），4.18（1H，d，J =8.8 Hz，Fru-3′），4.09（1H，dd，J=8.8，8.5 Hz，Fru-4′），3.87（1H，m，Fru-5′），3.88（1H，m，Fru-6′a），3.83（1H，m，Fru-6′b），5.17（1H，d，J=3.6，Glu-1），3.66（1H，dd，J=10.3 Hz，3.6，Glu-2），3.85（1H，dd，J =10.3，9.2 Hz，Glu-3），3.52（1H，dd，J=10.3，9.2 Hz，Glu-4），3.94（1H，m，Glu-5），3.85（1H，m，Glu-6a），3.78（1H，m，Glu-6b），5.13（1H，d，J=4.0 Hz，Glu-1′），3.57（1H，dd，J=10.3，3.6，Glu-2′），3.76（1H，dd，J=10.3，9.2 Hz，Glu-3′），3.44（1H，dd，J=10.3，9.2 Hz，Glu-4′），3.94（1H，m，Glu-5′），3.84（1H，m，Glu-6′a），3.77（1H，m，Glu-6′b）。13C NMR（100 MHz，D2O）δ：62.0（Fru-1），104.5（Fru-2），77.5（Fru-3），74.5（Fru-4），81.7（Fru-5），62.7（Fru-6），61.1（Fru-1′），104.5（Fru-2′），77.6 （Fru-3′），75.3（Fru-4′），82.0（Fru-5′），63.4（Fru-6′），91.6（Glc-1），75.8（Glc-2），72.1（Glc-3），70.0（Glc-4），73.0（Glc-5），61.1（Glc-6），96.8（Glc-1′），72.1（Glc-2′），73.7（Glc-3′），70.2（Glc-4′），72.6（Glc-5′），61.2（Glc-6′）。经解析确定该化合物为O-α-D-glucopyranosyl-（1→2）-O-［β-D-fructofuranosyl-（2→1）］2-α-D-glucopyranoside。

化合物3（黄色糖浆状液体）〔10〕：1H NMR（400 MHz，D2O）δ：3.90，3.73（2H，d，J =8.7 Hz，Fru-1），4.34（1H，d，J=8.5 Hz，Fru-3），4.04（1H，dd，J=8.5，8.1 Hz，Fru-4），3.71（1H，m，Fru-5），3.08（1H，m，Fru-6a），3.12（1H，m，Fru-6b），3.65，3.74（2H，d，J=11.0 Hz，Fru-1′），4.20（1H，d，J=8.5 Hz，Fru-3′），4.08（1H，dd，J=7.9，8.5 Hz，Fru-4′），3.84（1H，m，Fru-5′），3.88（1H，m，Fru-6′a），3.83（1H，m，Fru-6′b），5.67（1H，d，J=3.4 Hz，Glu-1），3.61（1H，dd，J=10.3，3.6 Hz，Glu-2），3.90（1H，dd，J=9.9，8.8 Hz，Glu-3），3.49（1H，dd，J =9.6，8.8 Hz，Glu-4），3.90（1H，m，Glu-5），3.81（1H，m，Glu-6a），3.78（1H，m，Glu-6b），5.31（1H，d，J=3.6 Hz，Glu-1′），3.69（1H，dd，J=10.1，3.6 Hz，Glu-2′），3.83（1H，dd，J=10.1，9.0 Hz，Glu-3′），3.44（1H，dd，J=10.3，9.2 Hz，Glu-4′），3.94（1H，m，Glu-5′），3.84（1H，m，Glu-6′a），3.77（1H，m，Glu-6′b），5.13（1H，d，J=4.0 Hz，Glu-1′′），3.57（1H，dd，J=10.3，3.6 Hz，Glu-2′′），3.76（1H，dd，J=10.3，9.2 Hz，Glu-3′′），3.47（1H，dd，J=9.6，9.0 Hz，Glu-4′′），3.83（1H，m，Glu-5′′），3.88（1H，m，Glu-6′′a），3.75（1H，m，Glu-6′′b）。13C NMR（100 MHz，D2O）δ：61.8（Fru-1），104.5（Fru-2），76.7（Fru-3），74.5（Fru-4），82.1（Fru-5），63.0（Fru-6），61.5（Fru-1′），104.7 （Fru-2′），77.3（Fru-3′），75.1（Fru-4′），81.9（Fru-5′），63.1（Fru-6′），91.8（Glc-1），80.2（Glc-2），72.7（Glc-3），69.8（Glc-4），73.0（Glc-5），61.1（Glc-6），97.0（Glc-1′），76.8（Glc-2′），72.4（Glc-3′），70.5（Glc- 4′），73.3 （Glc-5′），61.3（Glc-6′），97.6（Glc-1′′），72.0（Glc-2′′），73.4（Glc-3′′），70.3（Glc-4′′），72.6（Glc-5′′），61.2 （Glc-6′′）。经解析该化合物为［O-α-D-glucopyranosyl-（1→2）］2- O-［β- D- fructofuranosyl-（2→1）］2-α-D-glucopyranoside。

化合物4（黄色糖浆状液体）〔10〕：1H NMR（400 MHz，D2O）δ：3.89，3.72（2H，d，J=8.7 Hz，Fru-1），4.32（1H，d，J=8.8 Hz，Fru-3），4.02（1H，dd，J=8.8，9.0 Hz，Fru-4），3.79（1H，m，Fru-5），3.82（1H，m，Fru-6a），3.75（1H，m，Fru-6b），3.87，3.72（1H，d，J= 9.5 Hz，Fru-1′），4.21（1H，d，J=8.8 Hz，Fru-3′），4.06 （1H，dd，J=8.8，8.5 Hz，Fru-4′），3.85（1H，m，Fru-5′），3.82（1H，m，Fru-6′a），3.75（1H，m，Fru-6′b），3.75，3.68（2H，d，J =11.9 Hz，Fru-1′′），4.18（1H，d，J= 11.9 Hz，Fru-3′′），4.10（1H，dd，J=11.1，8.5 Hz，Fru-4′′），3.85（1H，m，Fru-5′′），3.82（1H，m，Fru-6′′a），3.75（1H，m，Fru-6′′b），5.71（1H，d，J=3.6 Hz，Glu-1），3.66（1H，dd，J=10.3，3.6 Hz，Glu-2），3.66（1H，dd，J=10.3，9.2 Hz，Glu-3），3.66（1H，dd，J=10.3，9.2 Hz，Glu-4），3.83（1H，m，Glu-5），3.85（1H，m，Glu-6a），3.78（1H，m，Glu-6b），5.13（1H，d，J=4.0 Hz，Glu-1′），3.57（1H，dd，J=10.3，3.6 Hz，Glu-2′），3.76 （1H，dd，J=10.3，9.2 Hz，Glu-3′），3.44（1H，dd，J= 10.3，9.2 Hz，Glu-4′），3.94（1H，m，Glu-5′），3.84 （1H，m，Glu-6′a），3.77（1H，m，Glu-6′b）。13C NMR （100 MHz，D2O）δ：62.2（Fru-1），104.6（Fru-2），77.8 （Fru-3），74.7（Fru-4），81.8（Fru-5），62.9（Fru-6），61.5（Fru-1′），104.0（Fru-2′），78.2（Fru-3′），75.3 （Fru-4′），82.1（Fru-5′），63.3（Fru-6′），61.5（Fru-1′′），104.6（Fru-2′′），77.6（Fru-3′′），75.2（Fru-4′′），82.0 （Fru-5′′），63.1（Fru-6′′），90.7（Glc-1），75.8（Glc-2），72.1（Glc-3），70.2（Glc-4），73.1（Glc-5），61.2（Glc-6），96.7（Glc-1′），72.3（Glc-2′），73.8（Glc-3′），70.3（Glc-4′），72.7（Glc-5′），61.3（Glc-6′）。经解析该化合物为O-α-D-glucopyranosyl-（1→2）-O-［β-D-fructofuranosyl-（2→1）］3-α-D-glucopyranoside。

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（责任编辑李杨）

Study on Oligosaccharide Constituents of Medicinal Plants Campylotropis Trigonoclada

Li Fengfeng，Fu Chen，Wang Fusheng*
（College of Pharmacy and Chemistry，Dali University，Dali，Yunnan 671000，China）

〔Abstract〕Objective: To explore the oligosaccharide constituents of Campylotropis Trigonoclada for finding bioactive natural products. Methods: The extract water part of C. trigonoclada was chromatographied by silica gel，ODS column and LH-20 gel column chromatography methods，and the isolates were identified based on spectroscopic analysis（1H NMR and13C NMR）. Results: Four oligosaccharide compounds were isolated from C. trigonoclada and characterized as［O-α-D-glucopyranosyl-（1→4）］2-O-β-D-fructofuranosyl-（2→1）-α-D-glucopyranoside（1），O-α-D-glucopyranosyl-（1→2）-O-［β-D-fructofuranosyl-（2→1）］2-α-D-glucopyranoside（2），［O-α-D-glucopyranosyl-（1→2）］2-O-［β-D-fructofuranosyl-（2→1）］2-α-D-glucopyranoside（3）and O-α-D-glucopyranosyl-（1→2）-O-［β-D-fructofuranosyl-（2→1）］3-α-D-glucopyranoside（4）. Conclusion: Four oligosaccharide compounds were isolated from this genus for the first time.

〔Key words〕Campylotropis；Campylotropis Trigonoclada；chemical constituent；oligosaccharide

［中图分类号］R284.2

［文献标志码］A

［文章编号］2096-2266（2016）04-0005-03

［基金项目］大理学院博士启动基金资助项目（KYBS201114）

［收稿日期］2015-09-15［修回日期］2015-11-11

［作者简介］李逢逢，硕士研究生，主要从事天然药物化学研究.

*通信作者：王福生，教授，博士.