分光光度计使用中不容忽视的几个问题

李　位

(贵州省有色金属和核工业地质勘查二总队，贵州　六盘水　553004)



分光光度计使用中不容忽视的几个问题

李位

(贵州省有色金属和核工业地质勘查二总队，贵州六盘水553004)

在理化分析中最常用到的仪器就是分光光度计，这种仪器的基本原理主要是建立在与光和物质相互作用的基础上，当某一溶液当中其吸收的辐射的物质分子与光子发生碰撞的时候，也就会产生一种吸收，对于其吸光度值的大小进行测量可以有效的对某种物质存在的量的多少进行反应。本研究基于此，主要分析分光光度计在其使用过程中存在的几个问题，希望所得的结果能够为相关领域提供有价值的参考。

分光光度计；理化分析；仪器

在分析测试实验室里常见的分析仪器中，有一种仪器便是我们提到的分光光度计，而最为常见的分光光度计主要有紫外线光光度计，其主要是用来测定被测物质，在一定波长的照射下而产生的吸光度。这种分析能够有效的对物质本身作出定量或定性分析，而在日常的使用过程中，存在的一些人在对分光光度计的使用上，或多或少地存在着一些疑惑，而使用也存在着一些不规范的情况，因此，分光光度计在使用过程中以及不容忽视的问题，并针对性地予以一些解决性的措施，对于能够令其更好地对物质进行定性或定量具有重要的价值和意义。

1　分光光度计在预热方面的问题分析

使用分光光度计一般都需要进行预热，通常在使用说明书上会对此进行说明，一般来说要求预热时间大约为20 min，但是如果分光光度计携带微处理器，那么在去开机之后机器将会进入自动检测阶段，也就是我们常说的初始化状态[1]，这个过程大约需要10 min左右的时间。在对分光光度计进行预热的时候，一些使用者存在着一定的问题，举一个最简单的例子，比如在开机之后止于热电路系统，也就是说不对其波长进行调节，也没有打开吸收电池箱盖进行预热等，甚至有些人认为其初始化的过程就是预热的过程，这种失误是十分严重的。

分析对分光光度计进行预热的目的，其主要是促使其达到最佳的使用状态，进而有效地保证测量的数据更加稳定和正确。而对分光光度计进行预热，并非是单纯为了电路系统电子元件的稳定，同时也是为了确保其光路系统处于稳定的状态，因此需要对其进行正确的预热[2]。

笔者在此对体育老方法予以简要的叙述，我们以772型分光光度计为例，当开机以后，首先对其测定波长值进行调节，进而选择灵敏度大，选择一个吸收池装上纯水，将其置于公路上，对“0%T”和“100%T”进行调节，不必确保必须精准，然后将吸手指按相关上，基础上进行20 min的预热，当肉眼观测到显示仪器上的读数不再变化以后便可以进行测定；而对于携带有微处理器有自检功能的分光光度计等预热，开机后首先是其仪器自检，当仪器初始化结束之后，需要选择及测定的窗口射钉器所需要的波长值，选择吸收池装上纯净水，至于光路上，调“0000 A”，之后预热仪器，当观测到其仪器显示的读数不再发生变化，便可以进行测定；如果是紫外可见分光光度计，因为其存在双光源，所以为了延长器灯的使用寿命，进而在开机即完成自检工作以后便可以关掉测定时应用不到的光源灯。

2　分光光度计的长波准确度的检查与校正

当谈到分光光度计的常不准确度的检查和矫正时，常常会涉及到这样的问题，在日常对分光光度计进行使用的时候，是否必须经常进行仪器波长的准确度检查，事实并非如此。当我们在日常检测工作中发现仪器的灵敏度下降，这个时候就应该对其波长准确度进行检查[3]，所以需要将仪器开机之后，蒸汽波长调整为580 nm，同时将一张白色卡片纸插入在吸收池的通风道，进而对其进行观察是否能够看到一个长方形的黄色光斑，有则说明其准确度正常，没有就需要对其进行波长的矫正[4]。

需要注意的是，如果分光光度计经过长途搬运，或者受到了机器的震动或是对其光源灯泡进行更换，那么之后都必须进行波长的矫正，而检验则按照上面所说的点方法进行，涉及到的校正方法有很多，一般主要有镨钕滤光片校正法、是滤光片校正法、氘灯特征发射线的矫正法，具体的矫正步骤可以对仪器的使用说明书予以参考。

3　分光光度计吸收池使用的问题分析

分析分光光度计吸收池的使用，其所存在的问题比较严重，而涉及的方面也比较多，可以按照分光光度计吸收池使用的基本顺序进行说明。

3.1关于分光光度计吸收池的润洗

关于分光光度计吸收池的使用，在吸收池进行装液之前必须采用待装溶液对其进行润洗，一般对其进行2～3遍的润洗。而在进行润洗之前是否需要采用纯净水进行润洗，需要进行具体问题具体分析。如果对于吸收池的待测液是进行初次使用，那么为了更好地对吸收池进行维护和保养，也为了更大程度上减少干玻璃面对于颜色的吸附能力，以方便在使用后对吸收池进行清洗，那么需要先采用纯净水对其润洗一遍，然后再采用待装溶液润洗2～3遍，如果在这之后，利用这个吸收池装与之前浓度相近[5]，或者比之前的浓度更高的溶液的时候，那么就能够直接采用待装溶液润洗2～3遍。采用标准曲线法进行测量，如果先对其标准溶液的吸光度进行测量，那么当对其样品溶液进行测量的时候，因为其测定的样品溶液的浓度比最后一个标准溶液的浓度更低，或者是不可知，那么，建议先采用纯净水进行润洗，之后采用待装溶液进行润洗2～3遍。

3.2关于分光光度计吸收池的装液、擦拭和放置问题

当对吸收池进行完润洗后，便可以将待测溶液注入其中，一般高度为其2/3或3/4处，有一些使用者，可能会担心注入量不够，进而对其测定的结果产生影响，所以在装液的时候，通常会出现装液过满的情况，而装液太满，将会对其测定的结果产生一定的影响，有时候可能会腐蚀仪器。为了有效的避免此情况发生，使用者在进行测试的时候，可以将一张白纸，插入在吸收池座的通光道中，同时在可见波长下，对单色器产生给溶液吸收的单色光的光斑大小和位置进行观察，以便于做到心中有数[6]。也就是说，其所注入吸收池内的溶液的液面高度，比吸收池座上透光窗的上边缘高即可以。当将溶液注入吸收池以后，可以利用差劲，沿着同一方向轻轻擦拭器皿外壁的溶液，确保无痕迹。但是擦镜纸的吸水能力较差，如果吸收池外壁的溶液较多，在进行擦拭之前，可采用干滤纸进行吸干处理，也可以采用毛巾替代擦镜纸，但是这样可能会损伤透光面，对于体测量结果造成一定的误差。因此将吸收池放置于吸收池座架时需要注意两个问题，首先，确保同套吸收池及位置具有一致性，一般情况下会将吸收池安置在其左边或是右边，如果将吸收池垂直放入吸收池座中，那么需要保证其靠近单色器出孔光的一侧，第二个是需要确保每一个吸收池进光方向的问题，一般来说，需要根据吸收池毛面上所标的箭头方向进行统一安放[7]。如果不存在箭头标记，那么在对吸收池进行校正的时候，应该将沿着笔标上箭头的方向作为进光方向。

3.3关于分光光度计吸收池成套性检验和处理问题

如果使用新的吸收池，或者在吸收池使用了一段时间之后，必须例行成套检验，检验方法是，选择同套的4个吸收池，在其中注入蒸馏水，对其进行擦拭，当擦拭完成之后，按照所标箭头的方向放入吸收池中并予以固定。接着对其测长波长进行调节，同时将第一个吸收池作为参比。但是指针是电表读数的，可以利用透射比最大的作为参比，进而对另外3个吸收池的透射比进行测定。按照测定规程对吸收池成套进行检验，也就是在同一光景的吸收池当中，其蒸馏水的位置需到达222 nm或440 nm处[8]。同时调整一个吸收池的透射比为100%，对其他各个吸收池的透射比予以测定，其间的差值就是吸收池的配套性。如果吸收池尚在使用之中，那么就需要对其测定的准确度予以考虑，需要在特定波长下予以彻底检验。如果对于样品的两个分组采用双波长测定，那么需要分别在两个波长处进行检验和矫正。需要做好对成套性检验不合格的吸收池的处理工作，首先对其进行清洗然后进行再次检验，不合格的吸收池可采用(1+1)盐酸和等体积的乙醇混合液进行浸泡，时间大约为1 h。同时可以采用自来水对其进行冲洗，然后采用蒸馏水进行洗涤，确保洗干净，第二个便是需要对误差较大的进行剔除，只选择合格的部分吸收池予以测定。

3.4关于分光光度计吸收池使用之后的处理问题

关于分光光度计吸收池使用之后，其处理问题相对较为简单，需要采用自来水对其立即冲洗，确保冲洗干净，之后采用蒸馏水对其润洗，然后予以安置，待吸收池被晾干之后，放置于吸收池盒内予以保存。在实际的使用过程中，很多操作人员往往仅仅将待测液倒掉，然后经采用蒸馏水进行润洗，但实际上，这种做法是非常不科学的。

4　关于分光光度计吸光度测定重复性的问题

在采用分光光度计进行测定的时候，如果发现同一个溶液在不同的时间里，其测定的结果并不相同，这只能说明测量的重复性不好，分析其重复性不好的原因，可能是存在测定错误的因素，当然除此之外也存在着其他的因素。因为仪器的预热时间不够，便可能造成这种问题，所以对这种问题进行解决的方法是，需要对预约的时间予以延长，或者采用正确的预热方法，对其进行预热[9]。同时，如果光电转换器因为长时间的使用，导致其光电转换效率发生了改变，也能够导致分光光度计吸光度测定存在重复性。在这种情况下，标准的溶液和待测溶液的吸光度都会一样变低，因此进行相对定量的时候对结果产生的影响会很小。对于这一类的仪器，建议连续的使用时间不应该超过3 h，如果需要对其进行长时间的使用，那么需要间歇30 min。

5　关于分光光度计使用过程中的其他问题分析

在采用分光光度计进行测量的时候，其测量过程中可能存在着一些不良操作，或者是不利于仪器的维护和保养的操作，那么在此过程中使用者需要尽力避免这种情况发生。比如说在仪器的上方操作时，如倒入溶液或是将拿出来的吸收池放在仪器的面板上，或是在实验室当中对于不同仪器的吸收池的混用情况，都可能造成仪器的损坏，或对仪器的准确性产生一定的影响，不利于测量的正常进行。

同时对于分光光度计的使用也存在着防尘和防潮的情况，通常情况下来说，分光光度仪本身会随机带有一只塑料布罩，在不使用仪器的时候，可利用布罩将整个仪器罩住，相对来说这是一种非常好的防尘方法。但是通过实践可以发现，在实验室当中，一般都不会采用塑料部长对其进行覆盖，通常会采用一块普通的布，或是利用普通的布做成部长来覆盖仪器，这样即防尘的效果便不会像其所附带的塑料布罩那样理想。而且塑料布罩之中放入了几袋防潮硅胶，这能够起到延长防潮的功效。防潮的时候，如果仪器并没有防潮干燥筒，需要对仪器经常进行常规的检查，如果发现出现变色反应，应该需要予以必要的处置。

对于长期不使用的分光光度计，需要定期对其进行开机，这样能够更好的进行除潮，比如说每隔一个月，对其进行通电预热0.5 h，这样就能够确保整机处在干燥的状态下，可以有效地对其电子元件的性能与维护。

6　结　语

分光光度计是实验室当中经常使用到的仪器，在现实情况中，很多操作者并不能熟练地对分光光度仪进行操作，甚至存在着错误性的操作，一方面来说，这会造成检验结果的不准确，从另一方面来分析，也大大的损耗了分光光度计的寿命。仔细分析，造成这种情况的原因是多方面的。比如说，这和操作者自身的习惯与认知存在着很大关系，因此作为相关方面的工作人员，必须熟练的掌握分光光度计的使用情况，明确其在使用过程中的相关问题，只有这样才能够更好的将分光光度计应用到实际当中，更好的指导实际的工作。此外，笔者也相信，随着技术的不断深入，在不就的将来，分光光度计将会有更加广泛的应用空间，而且对于其的使用也会更加的便利。

[1]钱骥.检定紫外可见分光光度计应注意的问题[J].中国计量,2012(08):82-83.

[2]王海军,宁新霞.紫外可见分光光度技术的应用进展[J].理化检验(化学分册),2012(06):740-745.

[3]杨力荣,邹倩.紫外可见分光光度计波长不确定度分析[J].计量与测试技术,2011,38(06):61.

[4]杨晓东,李志锋.紫外可见分光光度计检测结果的不确定度评定[J].科技信息,2011(20):385-386.

[5]李昌厚.紫外可见分光光度计光度准确度研究[J].分析仪器,2011(05):65-71.

[6]吴文铭.紫外可见分光光度计及其应用[J].生命科学仪器,2009,7(04):61-63.

[7]杨箴立.紫外—可见分光光度计的维护保养与维修[J].河南化工,2009,26(12):51-52.

[8]孔迪,彭观良,杨建坤,等.紫外可见分光光度计主要技术指标及其检定方法[J].大学物理实验,2007,20(04):1-6.

[9]汪正范,潘甦民,姜栋,等.紫外/可见分光光度计的市场分析及前景展望[J].现代仪器,2006,12(01):69-70.

Several Problems Cannot Be Ignored in Spectrophotometer Use

LI Wei

(The 2nd Corps for Non-ferrous Metals and Nuclear Industry Geological Exploration Bureau,Guizhou Liupanshui 553004,China)

The most commonly use in the physical and chemical analysis of the instrument is the spectrophotometer,mainly based on the basic principle of the instrument and on the basis of the interaction between light and matter,when a solution of the collision absorption of radiation material molecules and photons,also can produce a kind of absorption,to measure the size of its absorbance value can be effective exist much of the amount of reaction to a substance.Based on this,several problems existing in the use process of spectrophotometer were mainly analyzed,hoped the results can provide valuable reference for the related areas.

spectrophotometer; the physical and chemical analysis; the instrument

O657

A

1001-9677(2016)011-0172-03