胰腺癌化疗后应用DC—CIK细胞对免疫功能影响及临床疗效分析

张志强　王梓瑛　郑爽　王晓舟　赫丽杰

【摘要】 目的 分析晚期胰腺癌患者化疗后联合应用树突状细胞-细胞因子诱导杀伤细胞（DC-CIK细胞）干预对患者免疫功能的影响以及临床疗效。方法 80例接受化疗的晚期胰腺癌患者， 通过随机数字表法分为对照组和观察组， 各40例。对照组采用常规化疗， 观察组采用化疗+DC-CIK细胞治疗。对比两组患者免疫功能的变化和临床疗效。结果 治疗后观察组患者CD3、CD4、CD8检出值均明显优于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）。观察组患者经治疗后1年生存率明显高于对照组， 差异有统计学意义（P<0.05）。结论 晚期胰腺癌化疗后应用DC-CIK细胞干预能够改善患者免疫功能， 可以提高临床疗效， 值得临床推广应用。

【关键词】 胰腺癌；化疗；树突状细胞-细胞因子诱导杀伤细胞

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.07.136

胰腺癌是恶性程度较高的一种肿瘤， 多数患者在确诊时已经丧失根治性手术的机会， 化疗是临床建议采取的治疗方案。已有研究中显示DC-CIK细胞对恶性肿瘤患者术后化疗T细胞免疫功能有非常确切的改善价值， 对于胰腺癌患者也有类似功效。为分析化疗后联合应用DC-CIK细胞干预对晚期胰腺癌患者的临床疗效， 本研究收集本院肿瘤科收治的80例接受化疗的晚期胰腺癌患者纳入研究范畴， 对比单纯化疗和化疗联合DC-CIK细胞干预的治疗效果， 整理报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 收集本院2013年1月～2015年1月肿瘤科收治的80例接受化疗的晚期胰腺癌患者。均经病理及影像学确诊为胰腺癌， 用化疗干预。通过随机数字表法分为对照组和观察组， 各40例。对照组男26例， 女14例， 年龄46～80岁， 平均年龄（56.8±8.2）岁；观察组男25例， 女15例， 年龄43～80岁， 平均年龄（55.9±8.7）岁。两组患者性别、年龄等一般资料比较， 差异无统计学意义（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 方法 对照组采用常规化疗方案。1000 mg/m2吉西他滨+85 mg/m2奥沙利铂+15 mg/kg 5-氟尿嘧啶。连续化疗干预4周。观察组采用化疗+DC-CIK细胞治疗方案。化疗药物、剂量与对照组用药完全一致， 化疗干预2周后联合应用DC-CIK细胞治疗。DC-CIK细胞制备方法为：抽取患者口服状态下外周血液进行Hanks稀释纯化处理， 离心处理后弃上层清液。所得单个核细胞悬浮于无血清RPMI培养基中。将培养反应2 h后的非贴壁细胞作为CIK前提细胞。贴壁细胞中加入DC培养液， 按照3 d/次的频率及时更换半量营养液。反应持续6 d后加入特异性肿瘤抗原蛋白， 维持反应2 d， 诱导DC进行成熟阶段。按照CIK∶DC（10∶1）标准培养15 d后得到DC-CIK细胞。DC-CIK细胞联合干预方法为：至少1.0×109个CIK细胞混悬于250 ml剂量浓度2%白蛋白生理盐水中， DC细胞混悬于100 ml剂量浓度2%白蛋白生理盐水中， 以静脉滴注方式给药。

1. 3 观察指标 对比两组患者在不同治疗方案下免疫功能的变化， 并对临床疗效进行判定与对比。免疫功能测定方法测定指标为CD3、CD4、CD8， 监测方法为流式细胞仪测定法。临床疗效判定标准为随访1年内两组患者的生存率情况。

1. 4 统计学方法 采用SPSS19.0统计学软件进行数据统计分析。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验；计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2. 1 两组患者免疫指标对比 观察组患者经治疗后CD3检出值为（68.5±2.7）%， CD4检出值为（35.6±2.1）%， 均明显高于对照组的（45.3±5.6）%、（21.5±3.5）%；观察组CD8检出值为（28.5±3.5）%， 明显低于对照组的（38.6±4.2）%， 差异均有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2. 2 两组患者临床疗效对比 观察组患者经治疗后1年生存率为67.5%（27/40）， 对照组为42.5%（17/40）， 观察组患者1年生存率明显高于对照组， 差异有统计学意义（P<0.05）。

3 讨论

已有的研究证实[1]， DC在细胞未成熟状态下具有较强的迁移能力， 进入成熟期后会导致T细胞激活， 进而有效的摄取、加工、递呈抗原， 从而在机体免疫应答过程中发挥重要的作用。相关报道认为[2]：CIK细胞中的细胞质颗粒能够高效穿透肿瘤细胞膜， 对肿瘤细胞有良好的裂解作用；CIK细胞能够对白细胞介素等机体抗肿瘤细胞因子产生活化作用；CIK细胞能够增强T细胞功能， 使机体自身免疫功能得到激活。本研究数据显示：观察组患者经治疗后CD3、CD4检出值均明显高于对照组；CD8检出值明显低于对照组；随访1年生存率明显高于对照组（P<0.05）。从免疫功能上分析：化疗联合DC-CIK细胞干预下能够刺激机体内T细胞亚群增值作用， 提高免疫功能， 避免因化疗药物诱导肿瘤细胞凋亡反应中其他细胞的同步下降；从生存率上分析， 由于在化疗与DC-CIK细胞联合后， 机体CD4/CD3细胞有明显提高的趋势， 故而能够有效解除其对机体的免疫抑制作用， CD8的下降则能够减轻肿瘤对腹腔神经丛及肠系膜上神经丛的压迫， 改善患者全身状况。

综上所述， 晚期胰腺癌患者化疗后应用DC-CIK细胞干预能够改善免疫功能， 可以提高临床疗效， 值得临床推广应用。

参考文献

[1] 张意兰.胰腺癌化疗后应用DC-CIK细胞对免疫平衡的影响及临床疗效研究.中国现代医学杂志， 2014， 24（9）：42-45.

[2] 钟国成， 张聪， 冉崇福， 等.高强度聚焦超声联合树突状细胞与细胞因子诱导杀伤细胞免疫治疗胰腺癌的机制研究.中华物理医学与康复杂志， 2012， 34（9）：651-655.

[收稿日期：2015-10-21]