禽类病料采集注意事项

丁 勇

（河北省怀安县畜牧水产局，河北张家口076150）

禽类病料采集注意事项

丁 勇

（河北省怀安县畜牧水产局，河北张家口076150）

随着养殖规模不断扩大与集约化快速发展，动物防疫水平不断提升，疫病监测在各级动物防控部门实验室内被启动，能够准确评判禽类的免疫水平与状况的重要方法是实验室血清学检测和检测（包括组织器官、粪便及各种棉试子）样品的实验研究方法。监测就需要大量的血清和检测样品，采血是取血清的主要手段。采血是一项提前性的工作，采血质量的好坏直接影响到能不能进行监测和实验结果的判定，样品的采样时间、处理方法、保存条件、运送条件都关系着检验结果的准确性、可靠性。

1 禽的采血技术

1.1 采血前的准备工作采血前的准备工作及采血用具的消毒均按常规操作来完成。采血部位按常规规程进行剪毛、清洗与消毒。

采血过程要防止流散与传染，残余血液及所用的器具全部进行消毒，如针头、针管等；也可焚烧深埋。

抗凝剂的选用（指用全血的样品），常用的抗凝剂有：①枸椽酸钠，常用3.8%的溶液，适用于血钙的测定和血测定时的抗凝；②肝素：肝素钠1ml内含1mg（0.1%）的水溶液，取0.1ml分装于小试管或小玻璃管（5ml或10ml）在80℃下烤干后备用可使5～10ml血液不凝固，肝素对血中有机成分和无机成分测定均无影响；③双草酸盐抗凝剂，可用市售，也可自己制备草酸铵1.2g、草酸钾0.6g、蒸馏水100ml溶解，适量加入供采血用的试管或小瓶中，一般0.5～1ml，置干燥箱内，80～100℃烘干备用；④乙二胺四乙酸二钠10mg可抗凝5ml全血，或亦可配成10%的溶液2～3滴可使5ml全血抗凝。

分离血清时，放置血液的试管、小玻璃瓶要倾斜成45℃角静置，利于血清析出。

人员自我防护，要佩戴眼镜、口罩、头盔与穿防护服等。

1.2 血液的采集方法

1.2.1 禽冠采血法用针头刺破禽冠吸取血液或在禽冠尖端剪开一个小口子，吸取血液时需用手挤压禽冠一次可吸取50～60μl血，供作血涂片用。多用于需血量较小的采血，注意消毒工作，同时作好止血，可用碘酒涂抹伤口。

1.2.2 禽颈静脉采血法右侧颈静采血，左手食指和中指夹住禽头部，并使头偏的一侧、无名指、小指和手掌握住躯干，拇指压静脉心脏端以使静脉充血舒张。右手持注射器、针头由翼根部向翅膀方向沿静脉平行刺入羽翼、倾斜45℃沿血管方向一侧0.3～0.5cm挑破皮肤前行0.3～0.5cm刺入静脉，再与血管平行进针0.2～0.5cm抽取血液。完毕后压迫针眼处止血。用碘酒或酒精棉球压迫针刺处止血。适用于30日龄内的禽类。

1.2.3 禽翅内侧静脉采血法可采血10～20ml，①器械用具的准备：棉球、小试管或细塑料管、试管架、镊子、7＃针头的一次注射器；②保定：手提保定。助手一手抓住两条禽腿，一手抓禽翅根部，以拇指按压静脉；③部位选择确定：注意术者左手大拇指捏住鸡禽内侧，其余四指捏住禽翅外侧展平禽翅，右手握针，沿血管方向刺入。

1.2.4 禽心脏采血法①禽左侧向上横卧保定、拔去胸上部羽毛，寻找由胸骨走向肩胛的皮下大静脉，用酒精棉球消毒，后碘酊棉球标记部7#针头刺入时，避开胸骨向里刺入，边刺边抽动活塞，若刺入心脏，便有血液涌入注射器；②禽仰卧保定，禽头部朝向术者，拔去胸上部少许羽毛，用手指在胸骨上一方、嗉囊下方摸得一凹窝，右手持7#针头自持有血液涌入注射器，取血后做止血与消毒工作。

2 禽类的病料采集

2.1 采集病料样品是诊断检测中至关重要的，采集的样品具有代表性、时效性、普遍性。病料采集应符合以内容：①典型性：选取症状最典型或病变最明显，具有代表性、普遍性，最好未经药物治疗过的病料；②合理病料采样的比例性：根据诊断检测规程的具体要求，要严格按照规程要求采集足够数量的样品，不同疫病的所需样品不同，应按疑似疫病的具体要求来采集病料；③适时性，根据检测要求及检测对象和检验项目的不同，选适当的采样时机，对检测结果很重要，因此样品采集有时间上要求，应严格按规定的规程时间范围取样；④无菌操作采样。采集检验样品，要供病理组织学检验、病原学、血清学检验使用，要无菌操作，对用具、容器需事先做好消毒灭菌工作，按具体规程来操作。特别是尸体剖检时需先采集样品，后剖检，以免人为污染。病理组织学检查可选用典型病的剖检后的样品。样品数量要满足诊断检测的需要，并留有余地，以备必要时复检使用；⑤保存。一个样品一个容器，立即密封，作冷藏、冷冻或其他处理，供病毒学检验的样品，数小时内要送到实验室，超时应冷冻保存，装样品的容器应贴上标签，标签要防止因冻结而脱落，写明采集时间、地点、禽名称、发病时间、死亡等具体相关信息；⑥人员安全与样品包装。首先采样人自身安全按防护规程要求来做，同时防止病原扩散，防止它本身被外部环境的污染，包装样品应防止损坏、污染和外泄等。按规定的时间迅速送检，以免延误送检时间而影响检测质量和结果的真实性与可靠性。

2.2 血液的采集

2.2.1 病毒学检验血液样品应选择动物发病初体温升高期时来采样。全血样品必须是脱纤维或抗血凝血，可选用肝素。而枸橼酸钠对病毒有轻微的毒性作用可杀死病毒，一般不宜采用。按常规操作规程准备真空采血等或其他灭菌容器内每ml血液样品外加0.1%肝素1ml，加入血液应摇均混合。用脱纤血时，先在容器内加入适量小玻璃球，加入血液后，反复震荡（亦可用震荡器震荡），以便脱云血液纤维，采得的血液经密封后贴上标签，以冷藏状态立即送实验室。必要时，可在血中按每毫升加入青霉素和链霉素各500～1000IU，以抑制血源性或采血中污染的细菌。

2.2.2 细菌学检验样品采血应在发病初期或发病高峰期，最好为未经抗生素药物治疗期间采集。血中应同时加抗血凝剂，但要注意不加双抗（青链霉素）或庆大或其它抗生素。血液密封贴标签送检，置4℃冰箱备用，但存放时间不宜过久，以免发生溶血。

2.2.3 血清学检验样品用作血清学检验的血液不加抗凝剂或脱纤处理。为保障血清质量，一般情况下，空腹采血较好。采得的血贴上标签，室温静置待凝固后送实验室，并尽快将自然析出的血清或经离心分离出的血清吸出，按需要分装若干小瓶密封，再贴上标签冷藏保存备检或冷藏送检。

2.2.4 寄生虫检验因不同的血液寄生虫在血液中出现的时机及部位各不相同，因此，需要根据各种血液寄生虫的特点，取相应时机及部位的血制成血涂片，送实验室。

2.3 组织样品采集按常规要求采取内脏，注意应用PBS液即可。

2.4 粪便样品的采集病毒学检验样品，用新鲜粪便灭菌的棉拭子从直肠深处或泄殖腔粘膜上蘸取粪便，并立即放入装有PBS液的试管内密封。细菌寄生虫检验样品与之相似。

2.5 禽流感样品采集及相关运输保存禽流感病毒主要在呼吸道粘膜细胞内增殖，一般最少要求8只频临死亡的病禽采集样品，泄殖腔拭子、器官拭子、肺与气管混合样、肠管及内容物的混合样，肝、脾、肾和脑、肺等组织混合样各8个。

2.5.1 泄殖腔棉拭子将棉拭子插入肛门并旋转，使粪便粘在棉拭子上，后放人PBS液的缓冲液中送检运输。

2.5.2 气管棉拭子：活禽采样时，将置棉拭子插入活禽的气管内，轻轻擦拭气管壁并放入缓冲液中。

2.5.3 粪便，采取濒临死亡禽的新鲜粪便，用棉拭子沾取粪便，并将采好的样品放在PBS缓冲液中。

2.5.4 采集15只病禽血液样本，采血样为3～ 5ml，自然析出血清或离心均可，同时棉拭子为防止感染可用下列PBS液；pH值调为7.0～7.4的PBS值，加入3000IU/ml青霉素、链霉素3mg/ml、庆大霉素1万～2万IU/ml、制霉菌素（10000IU/ml），但粪便和泄殖腔拭子抗生素为1.5万IU/ml，制霉菌素（50000IU/ml），pH值应调至7.4。

2.6 兽医人员安全防护注意事项兽医工作人员尤其是病料采集人员，由于频繁接触患病动物，所以是人畜共患病的高危人群。鉴于上述原因，工作人员尤其是从事禽病的，在采集病料时应该注意以下几点：第一，注意饮食卫生，禁止食用死亡的禽类；第二，如果条件允许，可以接种疫苗。接种疫苗的主要目的是降低感染传染病的几率；第三，工作人员在采集病料时更应注意个人卫生，工作时戴口罩、穿工作服（防护服）、戴手套，接触患禽或其粪便等污染物后要勤洗手，并保持工作环境中空气流通；第四，工作人员应该对禽类粪便作及时处理，注意禽舍的消毒。

2016年蛋鸡养殖行业前景分析：四化水平不断提升

中国是目前国际上最大的鸡蛋生产国，蛋鸡养殖产业也是国内畜牧业的主导产业之一。2015年是我国蛋鸡行业快速调整的一年，持续的行情低迷在一定程度上加速了行业整合的速度。

2016年蛋鸡养殖前景分析中国蛋鸡业正在走标准化、规模化、产业化、生态化发展之路。产区分化，区域化、本地化继续深化。商品蛋鸡养殖格局也一直在发生变化，传统主产区养殖总量在不断减少的同时，规模有所提高；非传统主产区总量和规模都在大幅提高。规模养殖量在50万只以上的养殖在全国各个区域均有出现。未来明显的产销区界限将不断弱化，像东三省、河北、山东和河南等传统主产区的供应能力和半径也将不断地减少，传统主产区、非主产区都将以本地化为主，将形成以京津冀、长三角、珠三角三大主销区为核心的养殖布局，销区在整个鸡蛋流通和价格上的风向标作用将会更明显。

产业链竞争的局面越来越明显近年来，以前专业生产种鸡的企业开始往下延伸，打造自己的品牌蛋，通过多种方式拓展品牌鸡蛋市场，而有些也开始向上延伸，进入种鸡行业。北京德青源农业科技公司提出的蛋鸡云养殖模式，旨在打造蛋鸡行业的公司加农户模式，同时内部形成从祖代种鸡养殖到生产资料提供、鸡蛋回收的闭环模式。以前主要是做饲料销售的北农大集团和北京伟嘉集团也开始介入鸡蛋回收，将服务进一步延伸。未来行业商品蛋鸡的竞争会是以集团化为核心的整个产业链的竞争。

金融资本将对行业发挥作用蛋鸡保险能够为蛋鸡行业起到保驾护航的作用；融资租赁能够提升设备的现代化;鸡蛋期货能帮助蛋鸡企业规避一定的市场风险。

抗生素的使用越来越受到限制随着食品安全检测越来越严格，抗生素的危害为大众所认知，品牌鸡蛋会受到更严格的监控，抗生素的使用也会受到更严格的限制。

适度规模化发展将成为主流，“四化”水平将不断提升现在，各大型种鸡生产企业和商品代生产企业开始在全国范围内布局，每个养殖点种鸡的饲养量不会超过50万套，商品代的饲养量也保持在每个独立场区在50万只左右，每个场与场之间至少保证10公里以上的安全距离，这样即可以保证运输的半径，同时有利于疫病的防控和其他风险的控制，因此，未来这种分区域适度规模的生产模式将成为主流。未来5～10年我国蛋鸡养殖存栏3万～5万只鸡养鸡场将成为未来鸡蛋来源的主要提供者。

“人管机器，机器养鸡”将越来越普遍，未来智能化必然成为行业的选择。

S858.312.1

A

1673-1085（2016）03-0040-03

2016-02-15