不同抗凝剂对5种特定蛋白检测结果的影响

黄　莹，刘敬喜

(1.白银市第一人民医院检验科,甘肃白银 730900；2.宁波美康生物科技股份有限公司,浙江宁波 315100)



·论著·

不同抗凝剂对5种特定蛋白检测结果的影响

黄莹1，刘敬喜2

(1.白银市第一人民医院检验科,甘肃白银 730900；2.宁波美康生物科技股份有限公司,浙江宁波 315100)

摘要:目的观察常见的4种血样采集管对C3、C4、IgA、IgG、IgM这5项生化项目检测结果的影响，探讨能否用抗凝血浆替代血清用于生化检测。方法对43名体检人员的静脉血管，连续用乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝管、肝素锂抗凝管、普通血清管、枸橼酸钠抗凝管各抽取一管血液，经混匀、离心分离后提取血清或血浆在仪器上同时用C3、C4、IgA、IgG、IgM试剂盒进行测定。结果在相同条件下，5个项目中肝素锂抗凝管与普通血清管比较差异无统计学意义(P>0.05)，枸橼酸钠抗凝管与用普通血清管的结果比较差异有统计学意义(P<0.05)，EDTA-K2抗凝管与用普通血清管的结果比较，IgA、IgM、IgG差异无统计学意义(P>0.05)，C3、C4差异有统计学意义(P<0.05)。结论IgA、IgM、IgG生化检验项目可用肝素锂抗凝血浆和EDTA-K2血浆代替血清，C3和C4生化检验项目可用肝素锂抗凝血浆代替血清，但C4应建立血浆参考区间。

关键词:补体；免疫球蛋白；抗凝剂

样本采集过程是保证样本质量的关键环节,其中就有抗凝剂的使用和样本容器的要求[1]。现在医院广泛使用一次性真空采血管采集样本进行生化项目检测，可能在实际操作过程中，为了减少采血管数量,常会统一使用一种或两种采血管,或者是为了使患者尽快拿到检测报告而使用抗凝血浆进行检测。而一般的C3、C4、IgA、IgG、IgM试剂说明书上均要求使用血清，所以本文对常见的3种抗凝血浆与普通血清在生化检验分析上进行对比试验，现将本次试验所检测情况报道如下。

1资料与方法

1.1仪器与试剂东芝TBA-2000FR型全自动生化分析仪，由日本东芝医疗系统公司提供。维护完成后对5个试剂进行校准，质控结果在控后待用。补体C3检测试剂盒(免疫比浊法)，批号为20111103。补体C4检测试剂盒(免疫比浊法)，批号为20120309。免疫球蛋白IgA检测试剂盒(免疫比浊法)，批号为20120116。免疫球蛋白IgG检测试剂盒(免疫比浊法)，批号为20120621。免疫球蛋白IgM检测试剂盒(免疫比浊法)，批号为20120109。5种试剂均由宁波美康生物科技股份有限公司生产。抗凝剂的选用[2]：临床检验常用的3种抗凝剂，枸橼酸钠(柠檬酸钠)，枸橼酸与血液的比例为1∶9；乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)；肝素：本次所用为肝素锂抗凝管。普通血清管：所用血清管为不加任何促凝剂的红色普通管。所有采血管均由美康国宾体检中心提供。

1.2方法在体检中，对自愿献血的43人抽4管静脉血(EDTA-K2抗凝管、肝素锂抗凝管、普通血清管、枸橼酸钠抗凝管各一管)。所有血样都是一针见血，以防止组织损伤外源性凝血因子进入试管影响试验结果[3]。立即将3种抗凝管进行混匀、编号、分类、静置。选择4 000 r/min(约1 160×g)的转速，离心10 min[4]。离心完成后，将4种采血管，每管用一次性吸管轻轻吸取中段血清或血浆，放入生化分析仪中进行检测并记录结果。

1.3统计学处理采用Microsoft Excel 2003软件对数据进行处理。

2结果

2.13种抗凝血浆与血清生化检验结果见表1。5个项目的肝素锂血浆管结果与普通血清管结果比较，差异均无统计学意义(P>0.05)；枸橼酸钠抗凝管结果与普通血清管结果比较，差异均有统计学意义(P<0.05)；3个免疫球蛋白IgA、IgG、IgM的EDTA-K2抗凝管结果与普通血清管结果比较，差异无统计学意义(P>0.05)；补体C3和C4的EDTA-K2抗凝管结果与普通血清管结果比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。

2.2结果分析血清和3种抗凝血浆生化检测结果的相关性和回归方程、血浆检测结果与血清检测结果的平均偏倚见表2、3。

表1　　血清与3种抗抗凝血浆的结果(g/L)

表2　　血清和3种抗凝血浆生化检测结果的相关性和回归方程

表3　　偏倚要求

3讨论

首先对每个项目的血清和血浆检测结果进行统计学分析，从表1结果可知，5个项目的肝素锂血浆管结果、IgA、IgG、IgM的EDTA-K2抗凝管结果与普通血清管的差异均无统计学意义(P>0.05)；而5个项目的枸橼酸钠抗凝管结果、补体C3和C4的EDTA-K2抗凝管结果与普通血清管差异均有统计学意义(P<0.05)。

对有统计学意义的项目进行相关性分析，对相关系数r2<0.95，计算每份血清和血浆样本的相对偏倚，再计算其平均偏倚。对r2≥0.95，以血清检测结果为X,血浆检测结果为Y，计算回归方程Y=a+bX,以临界水平的值带入回归方程,计算血浆(Y)与血清(X)检测结果之间的临界水平偏倚。本文的临界水平偏倚或平均偏倚需同时满足小于或等于1/2的说明书偏倚要求和美国临床实验室修正法规对室间评估偏倚[5]的要求(见表3)。若符合要求，则对生化检测结果的影响在临床可接受范围之内，可用血清参考区间解释血浆检测结果。因此，可以发现IgA、IgG、IgM的肝素与EDTA-K2血浆、C3的肝素血浆的偏倚均符合要求。而C4的肝素血浆的偏倚虽然符合说明书要求，但偏差超过了1/2的要求，有点偏大，故需要建立血浆参考区间。而枸橼酸钠抗凝管测定的5个项目结果均偏低应该与血液被稀释有关。

通常，血清样本中有纤维蛋白丝遗留及分离过程中血液有形成分易发生破坏等缺点[6]，而且肝素锂、EDTA-K2等血浆能为更快速f 的回报检测结果提供很多方便[7]。涉及血液的液体成分,究竟应当选择血浆抑或血清,主要取决于该指标的性质和检测的目的[8]；涉及免疫成分的指标,绝大多数宜选用血清。可能受到凝血过程影响的指标,应当尽量选择血浆；待检物既不受凝血过程影响,也不会因制备血清而改变的指标,可以使用血清或血浆[9]。

通过本次实验，发现宁波美康生物科技股份有限公司生产的IgA、IgM、IgG生化检验项目可用肝素锂抗凝血浆和EDTA-K2血浆代替血清，C3和C4生化检验项目可用肝素锂抗凝血浆代替血清；C4项目的血清和肝素锂抗凝

血浆相比有差异，临床实验室应为C4项目确定可靠的参考区间[10]，方可使用肝素锂抗凝血浆代替血清。

参考文献

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[9]贺石林,葛金文.正确选择血标本的思考[J].诊断学理论与实践,2005,4(6):433-434.

[10]杨有业,张秀明.临床检验方法学评价[M].北京:人民卫生出版社,2008:235.

Impact on the measurement results of five different specialty protein blood collection tube project

HuangYing1,LiuJingxi2

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,theFirstPeople′sHospitalofBaiyin,Baiyin,Gansu730900,China;2.NingboMedicalSystemBiotechnologyCo.Ltd.,Ningbo,Zhejiang315100,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the effects of a common four kinds of blood collection tubes for C3,C4,IgA,IgG,IgM test results of five biochemical projects,exploring the possibility of using an alternative anticoagulant plasma serum for biochemical testing.MethodsVein 43 medical personnel,continuous tube with EDTA-K2anticoagulant,heparin lithium anticoagulant tube,normal serum tubes,sodium citrate anticoagulation a tube of blood drawn each tube,after mixing,extracted after centrifugation the serum or plasma to the instrument while in using C3,C4,IgA,IgG,IgM kit were measured.ResultsUnder the same conditions,lithium heparin anticoagulant tube with normal serum tube difference five projects was not statistically significant (P>0.05),sodium citrate anticoagulation tube and pipe the results with normal serum difference was statistically significance (P<0.05),EDTA-K2anticoagulated tubes and compare the results with normal serum tubes,IgA,IgM,IgG was no significant difference (P>0.05),C3,C4 difference was statistically significant (P<0.05).ConclusionIgA,IgM,IgG biochemical test items available lithium heparin anticoagulant plasma and EDTA-K2plasma instead of serum,C3 and C4 biochemical test items available plasma instead of serum lithium heparin anticoagulant,but C4 should establish plasma reference range.

Key words:complement； immunoglobulin；anticoagulants

(收稿日期：2015-09-28)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.04.015

文献标识码：A

文章编号：1673-4130(2016)04-0468-03