中华苦荬菜和苣荬菜抗炎保肝药理作用实验研究

2016-05-12 03:06刘海霞裴香萍裴妙荣李慧峰薛雨茂
山西中医药大学学报 2016年1期
关键词:保肝抗炎低剂量

刘海霞,裴香萍,裴妙荣,李慧峰,薛雨茂

(山西中医学院,山西太原030024)

中华苦荬菜和苣荬菜抗炎保肝药理作用实验研究

刘海霞,裴香萍,裴妙荣,李慧峰,薛雨茂

(山西中医学院,山西太原030024)

目的:比较中华苦荬菜与苣荬菜提取物的抗炎保肝作用。方法:用二甲苯致小鼠耳肿胀模型,以耳肿胀度为指标,比较中华苦荬菜与苣荬菜的抗炎作用。用四氯化碳致小鼠肝损伤模型,以小鼠血清中ALT、AST、MDA含量为指标,比较中华苦荬菜与苣荬菜的保肝作用。结果:中华苦荬菜与苣荬菜均具有良好的抗炎保肝作用,以二者高剂量给药时,苣荬菜抗炎、保肝的作用要优于中华苦荬菜(P<0.05)。结论:中华苦荬菜与苣荬菜提取物均可以有效地抑制二甲苯所致的小鼠耳肿胀,对四氯化碳致小鼠肝损伤也有显著的保护作用,说明二者具有良好的保肝、抗炎作用。

中华苦荬菜;苣荬菜;抗炎;保肝

苣荬菜(S.brachyotus)为菊科苦苣属一年或多年生草本植物,又名苦菜、苦苣菜,具有清利湿热、消肿排脓的功效,临床常用于阑尾炎、肠炎、痢疾等,在华北、西北、华南广泛使用。中华苦荬[3]菜[Ixeris chinensis(Thunb.)Nakai]为菊科苦荬菜属(Ixeris case)植物,又名苦菜、小苦苣、山苦荬等,主要分布在北部、南部及东部省区,全草入药,具有清热解毒、凉血消肿等功效,用于治疗肺痈、乳痈、痢疾肠炎及无名肿痛等多种疾病[1]。中华苦荬菜与苣荬菜具有相似的药理作用,在地方药材标准中同被收录为北败酱使用[2-3],但目前对于二者相似药理作用方面的说明还未见有报道。本实验就二者共同的保肝抗炎药理作用进行比较,为其临床用药提供依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物 昆明种小鼠,体质量(30±5)g,雌雄各半,由太原市晋源区曙光养殖场提供。

1.1.2 药物与试剂 中华苦荬菜为菊科苦荬菜的干燥全草,采于榆次;苣荬菜为菊科苦苣属苣荬菜的干燥全草,采于介休。药物分别用70%乙醇回流提取,浓缩备用。谷草氨酸氨基转氨酶(AST·GOT)试剂盒(批号:20150424)、谷氨酸氨基转移酶(ALT·GPT)试剂盒(批号:20150425)、丙二醛(MDA)试剂盒(批号:20150423)均购自南京建成生物工程研究所;联苯双酯滴丸(浙江万邦药业,批号:A02130205),阿司匹林肠溶片(沈阳奥吉娜药业,批号:141107),氯化钠注射液(山东华鲁制药,批号:014072305),乙醇、四氯化碳(CCl4)、二甲苯等试剂均为分析纯。

1.1.3 实验仪器 数显恒温水浴锅(HH-2型);连续光谱酶标仪(SPECTRA190);电子天平(FA3204B);高速离心机(湘仪H1650);紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器TU-1810)。

1.2 实验方法

1.2.1 样品提取物对四氯化碳致小鼠肝损伤模型的影响 参考文献[4],建立CCl4致肝损伤动物模型。将小鼠随机分为9组,每组10只,分别是正常组、模型组、阳性对照组,苦荬菜提取物高、中、低剂量组,苣荬菜提取物高、中、低剂量组。阳性对照组给予联苯双酯0.20 g/kg,苦荬菜高、中、低剂量组分别给予提取物1.95 g/kg、1.17 g/kg、0.78 g/kg,苣荬菜高、中、低剂量组分别给予提取物1.95 g/kg、1.17 g/kg、0.78 g/kg,正常组与模型组每日给予等体积生理盐水。连续灌胃给药8 d。在末次给药2 h后除正常组外,其余各组腹腔注射0.2%CCl4植物油10mL/kg,正常组腹腔注射等体积植物油,禁食不禁水,16 h后取血,5 000 r/min离心15min分离血清,测定血清中AST、ALT酶活力,按硫代巴比妥酸(TBA)比色法测定血清中MDA含量。

1.2.2 样品提取物对二甲苯致小鼠耳肿胀模型的影响 根据文献[5-6],建立二甲苯致小鼠耳肿胀模型。将小鼠随机分为8组,每组10只,分别为模型组,阳性对照组,苦荬菜提取物高、中、低剂量组,苣荬菜提取物高、中、低剂量组。阳性对照组给予阿司匹林0.05 g/kg,苦荬菜高、中、低剂量组分别给予提取物1.95 g/kg、1.17 g/kg、0.78 g/kg,苣荬菜高、中、低剂量组分别给予提取物1.95 g/kg、1.17 g/kg、0.78 g/kg,模型组每日给予等体积生理盐水。连续灌胃给药5 d。在末次给药30min后给小鼠右耳涂二甲苯50μL/只,左耳作对照。15 min后颈椎脱臼处死小鼠,沿耳廓基线剪下两耳,用直径6mm的打孔器将双耳相同部位面积切下,用电子天平分别称重,以左、右耳片重量之差为肿胀度。按以下公式计算肿胀度及肿胀抑制率。

y=(c-d)×c×100%,其中y为肿胀抑制率(%),c为模型组平均肿胀度(mg),d为给药组平均肿胀度(mg)

1.3 统计学方法

实验结果均采用统计学软件SPSS 17.0进行统计学分析。

2 结果

2.1 样品提取物对CCl4致小鼠肝损伤模型的影响

小鼠腹腔注射CCl416 h后,模型组血清中ALT与AST的值显著升高,分别为正常组小鼠血清中酶活性的9.7倍以及10.7倍,表明造模成功,肝脏受到严重损害。当苦荬菜的给药剂量为0.78 g/kg时,血清中ALT以及AST活性分别为模型组的71.7%和61.2%;给药剂量为1.17 g/kg时,血清中ALT以及AST活性分别为模型组的64.5%和40.3%;给药剂量为1.95 g/kg时,血清中ALT以及AST活性仅分别为模型组的53.9%和27.7%。苦荬菜高、中、低剂量组之间比较差异有统计学意义(P<0.01),并且在计量范围内(0.78~1.95 g/kg),随着给药剂量的增加保肝作用也在增强。实验数据表明苦荬菜有较好的保肝活性。

当苣荬菜的给药剂量为0.78 g/kg时,血清中ALT以及AST活性分别为模型组的74.6%和56.7%;给药剂量为1.17 g/kg时,血清中ALT以及AST活性分别为模型组的60.4%和47.5%;给药剂量为1.95 g/kg时,血清中ALT以及AST活性仅分别为模型组的41.7%和23.7%。苣荬菜高、中、低剂量组之间比较差异有统计学意义(P<0.01),在给药剂量范围内(0.78~1.95 g/kg),随着给药剂量的增加保肝作用也在增强,高剂量的苣荬菜对CCl4造成的肝损伤的保护作用较明显。实验结果表明苣荬菜有较好的保肝活性。

分别对比中华苦荬菜高、中、低剂量提取物与苣荬菜高、中、低剂量提取物对小鼠肝损伤模型的影响,苣荬菜提取物高剂量组的保肝作用优于中华苦荬菜提取物高剂量组(P<0.05)。结果见表1。

表1 药材提取物对CCl4肝损伤小鼠血清ALT、AST和MDA的影响 (±s)

表1 药材提取物对CCl4肝损伤小鼠血清ALT、AST和MDA的影响 (±s)

注:与苦荬菜高剂量组比较,1)P<0.05

组别 n ALT(U/mL) AST(U/mL) MDA(nmol/mL)正常组 10 73.33±21.14 50.40±13.5 9.89±2.43模型组 10 712.10±98.97 540.73±109.21 11.81±0.31阳性对照组 10 132.99±25.31 90.60±30.79 8.86±1.09苦荬菜高剂量组 10 383.76±90.53 149.69±61.23 9.40±2.02苦荬菜中剂量组 10 459.34±181.78 218.11±81.12 9.71±1.55苦荬菜低剂量组 10 510.30±190.16 331.07±144.32 11.81±0.62苣荬菜高剂量组 10 297.03±100.011)128.36±110.631)9.48±0.621)苣荬菜中剂量组 10 430.21±120.30 256.82±150.98 10.57±1.03苣荬菜低剂量组 10 531.62±180.23 306.50±135.68 11.34±2.95

2.2 样品提取物对二甲苯致小鼠耳肿胀模型的影响结果见表2。

表2 中华苦荬菜与苣荬菜提取物对小鼠耳肿胀的影响 (±s)

表2 中华苦荬菜与苣荬菜提取物对小鼠耳肿胀的影响 (±s)

注:与苦荬菜高剂量组比较,1)P<0.05

组别 n 耳肿胀程度 耳肿胀抑制率(%)模型组 10 32.33±2.50 -阳性对照组 10 19.50±10.00 39.68苦荬菜高剂量组 10 19.00±3.56 41.23苦荬菜中剂量组 10 25.75±7.03 20.35苦荬菜低剂量组 10 29.77±7.12 7.92苣荬菜高剂量组 10 10.33±6.501) 68.05苣荬菜中剂量组 10 17.26±6.78 46.61苣荬菜低剂量组 10 23.50±10.12 27.31

由表2可知,与模型组对比,中华苦荬菜与苣荬菜提取物对二甲苯致小鼠耳肿胀模型都有显著的抗炎作用(P<0.01)。分别对比中华苦荬菜高、中、低剂量提取物与苣荬菜高、中、低剂量提取物对小鼠耳肿胀模型的影响,苣荬菜提取物高剂量组的抗炎作用优于中华苦荬菜提取物高剂量组(P<0.05)。中剂量与低剂量组,通过t检验分析样本数据可知抗炎作用比较差异无统计学意义(P>0.05)。

3 讨论

本实验中的给药剂量均根据地方药材标准中人给药剂量按照体表面积换算得出。实验表明,中华苦荬菜与苣荬菜提取物均可以有效地抑制二甲苯所致的小鼠耳肿胀,对CCl4致小鼠肝损伤也有显著的保护作用,说明二者具有良好的保肝、抗炎作用。按高剂量给药时,苣荬菜保肝、抗炎作用优于中华苦荬菜。本实验为中华苦荬菜与苣荬菜保肝抗炎方面药理作用的比较提供参考,为二者在保肝、抗炎方面临床用药及相关保健产品的开发提供依据。

[1]刘计权,裴妙荣,王彦梅.中华苦荬菜形态学特征和生物学特性的研究[J].山西中医学院学报,2009,10(2):26-28.

[2]温博栋,邱建波.苣荬菜的研究进展[J].中国医院药学杂志,2010,30(21):1 852-1 853.

[3]杨学浩.败酱草的品种鉴别和应用[J].山西中医,2005,21(6):44.

[4]谷斌,卢新华.苦菜提取物对实验性肝损害的保护作用研究[J].湘南学院学报,2007,9(4):24-25.

[5]卢新华,唐伟军.苦菜提取物抗炎作用的实验研究[J].中国中医药科技,2006,13(4):240-241.

[6]李娜.白花败酱草化学成分、抗炎作用以及总皂苷提取纯化工艺研究[D].成都:成都中医药大学,2006.

(编辑:翟春涛)

Research on anti-inflammatory and hepatoprotective activities between ixeris chinensis and s.brachyotus

Liu Haixia,Pei Xiangping,PeiMiaorong,LiHuifeng,Xue Yumao
(ShanxiCollege of TCM,Taiyuan Shanxi030024)

Objective:To compare anti-inflammatory and hepatoprotective activities between ixeris chinensis and s. brachyotus..Methods:Anti-inflammatory effect between ixeris chinensis and s.brachyotus.was compared by using ear edemamicemodel induced by xylene and index of swell degree.The hepatoprotective effect between ixeris chinensis and s.brachyotus.was compared by experimental liver injury mice model induced by CCl4and serum ALT,AST,MDA index. Results:Both of ixeris chinensis and s.brachyotus have a good effect on anti-inflammatory and hepatoprotective activities and the effectof S.brachyotus is superior to the effcetof ixeris chinensis.in high dose groups.Conclusion:Ixeris chinensis and s.brachyotus can effectively inhibit ear swelling in mice induced by xylene and also have significant protective effect on liver injury inmice induced by CCl4,which show that they have the good hepatoprotective and anti-inflammatory effect.

ixeris chinensis;S.brachyotus;anti-inflammatory;hepatoprotective

R285.5

A

1671-0258(2016)01-0019-03

刘海霞,硕士,E-mail:liuhaixinxin.169@163.com

裴香萍,副教授,E-mail:peixp69@163.com

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