恩替卡韦对慢性乙型病毒性肝炎患者HBV DNA、 HBsAg及HBeAg定量的影响

彭凤英, 车小琼, 赵宏斌

(重庆医科大学附属第一医院 感染科, 重庆, 400016)



恩替卡韦对慢性乙型病毒性肝炎患者HBV DNA、 HBsAg及HBeAg定量的影响

彭凤英, 车小琼, 赵宏斌

(重庆医科大学附属第一医院 感染科, 重庆, 400016)

摘要:目的观察恩替卡韦对慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者血清乙肝病毒DNA(HBV- DNA)、乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝e抗原(HBeAg)定量的影响。方法 选取CHB患者160例，均给予恩替卡韦0.5 mg/d空腹口服，持续治疗96周。观察所有患者治疗前、治疗12、24、48及96周后HBV DNA、HBsAg、HBeAg定量以及谷氨酸氨基转移酶(ALT)水平，计算HBV DNA、HBeAg转阴率及ALT复常率，分析HBV DNA变化与HBsAg、HBeAg、ALT的相关性。结果随治疗时间延长，患者HBV DNA、HBeAg定量及ALT水平逐渐降低(F=11.562、28.034、22.417, P<0.01); HBeAg转阴率、HBV DNA转阴率以及ALT复常率逐渐增加；治疗前、治疗12及24周时，HBV DNA与HBsAg滴度负相关(r=-0.383、-0.293、-0.224, P<0.05或P<0.01)、与HBeAg滴度正相关(r=0.441、0.392、0.326，P<0.05或P<0.01)。结论恩替卡韦治疗CHB疗效确切，可有效促进HBV DNA、HBeAg转阴率及ALT复常。治疗早期，HBV DNA与HBsAg负相关、与HBeAg呈正相关，治疗后期无显著相关性，治疗过程中，应联合多项指标综合评价疗效。

关键词:慢性乙型病毒性肝炎; 恩替卡韦; 乙肝表面抗原; 乙肝e抗原; 乙肝病毒DNA

慢性乙型病毒性肝炎(CHB)由乙型肝炎病毒(HBV)感染所致，抑制病毒DNA复制、促使肝功能转氨酶恢复正常是CHB的治疗目标。HBV DNA复制情况是HBV传染性判断及疗效监测的指标[1]，乙肝表面抗原(HBsAg)为HBV感染的诊断金标准[2]，乙肝e抗原(HBeAg)阳性是病毒复制活跃的血清学标志，HBsAg及HBeAg水平可间接反映HBV复制情况。恩替卡韦为脱氧鸟嘌呤核苷类似物，是新一代强效、耐药性低、安全性高的抗HBV药物[3-4]，目前广泛应用于临床。本研究通过观察CHB患者接受恩替卡韦治疗前后血清HBsAg、HBeAg的变化及其与HBV DNA定量的相关性，探讨恩替卡韦对HBV DNA复制的影响，现报告如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选取2011年2月—2013年5月重庆医科大学附属第一医院感染科门诊及住院的CHB患者160例，均符合中华医学会肝病学分会制定的《慢性乙型肝炎防治指南(2010年版)》[5]规定的诊断标准。入组标准: ① HBeAg、HBsAg呈阳性且持续时间≥6个月; ② HBV DNA≥20 000 IU/mL; ③ 血清谷氨酸氨基转移酶(ALT)≥2×正常值上限(ULN); ④ 未接受过抗病毒治疗。排除标准: ① 合并其他嗜肝病毒感染; ② 酒精性肝病、自身免疫性肝病; ③ 肝硬化及肝癌患者。其中男94例，女66例；年龄21～66岁，平均(41.8±10.5)岁; HBV DNA定量值为(9.50～50.25)×105IU/mL, 平均(25.85±5.50)×105IU/mL; HBeAg滴度(322.25±105.56) COI, HBsAg滴度(4 352.41±1 073.61) COI; 血清ALT水平(140.40～390.80) U/L, 平均(255.50±90.50) U/L；天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平(90.50～220.30) U/L, 平均(160.50±45.50) U/L。所有患者均对本研究知情同意。

1.2方法

所有患者均给予恩替卡韦0.5 mg/d, 空腹口服，持续治疗96周。治疗初期均给予复方甘草酸苷 还原型谷胱甘肽、复合维生素B等护肝药物。

于治疗前、治疗12、24、48及96周采集患者空腹静脉血，采用荧光定量PCR法检测样本HBV DNA(试剂盒购自美国罗氏公司)；采用电化学发光法检测HBeAg、HBsAg含量(试剂盒购自美国罗氏公司)；采用IFCC速率法检测ALT水平(日立全自动生物化学分析仪，试剂盒购自南京波音特生物科技有限公司，参考范围0～40 U/L)。

1.3观察指标

观察2组治疗前、治疗12、24、48及96周HBV DNA、HBsAg、HBeAg定量，以及ALT水平；计算HBV DNA、HBeAg转阴率及ALT复常率；分析HBV DNA变化与HBsAg、HBeAg、ALT的相关性。

1.4统计学分析

2结果

2.1治疗前后HBV DNA、HBsAg、HBeAg定量及ALT水平变化

随着治疗进展，患者HBV DNA、HBeAg定量及ALT水平逐渐降低，差异具有统计学意义(F=11.562、28.034、22.417,P<0.01)。HBsAg水平变化差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1　治疗前后HBV DNA、HBsAg、HBeAg定量及ALT水平变化

2.2HBV DNA、HBeAg转阴率及ALT复常率变化

第12周，19例(11.88%)HBeAg转阴，37例(23.13%)ALT复常，未出现HBV DNA转阴患者。第24周，35例(21.88%)HBeAg转阴，53例(33.13%)ALT复常，31例(19.38%)HBV DNA转阴。第48周，55例(34.38%)HBeAg转阴，97例(60.63%)ALT复常，81例(50.63%)HBV DNA转阴。第96周，73例(45.63%)HBeAg转阴，119例(74.38%)ALT复常，113例(70.63%)HBV DNA转阴。

2.3HBV DNA变化与HBsAg、HBeAg、ALT的相关性

治疗前，治疗12、24周时，HBV DNA拷贝量与HBsAg滴度负相关，与HBeAg滴度正相关(P<0.05或P<0.01)。见表2。治疗48、96周时，HBV DNA拷贝量与HBsAg滴度及HBeAg滴度无显著相关性(P>0.05)。治疗过程中HBV DNA与ALT水平无相关性(P>0.05)。

表2　HBV DNA变化与HBsAg、HBeAg、ALT的相关性

3讨论

HBeAg阳性CHB患者体内的HBV病毒处于活跃复制状态，导致肝细胞变性、坏死及肝脏纤维化发生，因此CHB的治疗目标就是抑制HBV复制，延缓肝功能失代偿，防止肝硬化、肝癌或肝性脑病的发生[6]。HBV DNA转阴、HBeAg血清学转换及HBsAg转阴为抗病毒治疗的终点，治疗过程中检测上述指标的变化，可评估临床疗效。研究[7]表明，慢性HBV感染者的HBsAg定量与病毒复制水平具有显著相关性，但该结论并非适用于感染或治疗的所有阶段。褚小慧等[8]研究发现，HBeAg血清学转换与HBeAg滴度在治疗早期下降幅度相关；而HBsAg浓度与血清ALT水平之间可能无显著相关性，即与肝脏的受损程度无明显关系[9]。因此，联合检测HBsAg定量和HBeAg血清学转换可作为CHB患者治疗的持续应答或获得持久免疫控制状态的预测指标。

恩替卡韦是核苷酸类似物，基础及临床研究[10-11]均表明，恩替卡韦具有抑制HBV DNA复制的能力，可显著降低血清病毒载量，促进HBeAg血清学转换，抑制肝炎活动，延缓肝功能损伤，目前是治疗CHB的首选药物。Chang等[12]报道恩替卡韦治疗1年时，HBV DNA低于检测下限率高达67%，HBeAg血清学转换率21%，而HBsAg水平变化不大。本研究使用恩替卡韦治疗CHB患者48周时，HBeAg转阴率为34.38%，HBV DNA转阴率为50.63%；96周时，HBeAg转阴率为45.63%，HBV DNA转阴率为70.63%，证实了恩替卡韦在促进HBeAg血清学转换及HBV DNA转阴方面的疗效。本研究发现，治疗前后HBsAg滴度差异无变化，表明单独检测HBsAg滴度并不能反映恩替卡韦的疗效，这可能与纳入本研究的对象感染的亚病毒颗粒及机体免疫状态不同有关，亚病毒颗粒虽然无感染性，但可强烈刺激机体，产生免疫反应[13-14]。恩替卡韦治疗前期，HBV DNA拷贝量与HBsAg滴度存在显著负相关、与HBeAg滴度存在显著正相关，而治疗后期与二者无相关性，符合临床观察到的CHB患者抗病毒治疗后DNA下降水平与HBsAg变化不成比例的事实。此外，本研究发现，尽管ALT水平在治疗后显著下降，但与HBsAg、HBeAg、HBV DNA均无相关性，表明临床不能单凭ALT变化来评估治疗效果，与Jaroszewicz等[15]研究一致。

综上所述，恩替卡韦治疗CHB早期，HBV DNA与HBsAg呈负相关、与HBeAg呈正相关，治疗后期相关性均消失[16-17]; 治疗过程中，单纯依靠单项指标无法判断临床疗效，需联合各项指标综合评判[18-19]。

参考文献

[1]Marcellin P, Gane E, Buti M, et al. Regression of cirrhosis during treatment with tenofovir disoproxil fumarate for chronic hepatitis B: a 5-year open-label follow-up study[J]. Lancet, 2013, 381(9865): 468.

[2]Sonneveld M J, Hansen B E, Piratvisuth T, et al. Response‐guided peginterferon therapy in hepatitis B e antigen‐positive chronic hepatitis B using serum hepatitis B surface antigen levels[J]. Hepatology, 2013, 58(3): 872.

[3]Ridruejo E, Marciano S, Galdame O, et al. Efficacy and safety of long term entecavir in chronic hepatitis B treatment na ve patients in clinical practice[J]. Ann Hepatol, 2014, 13(3): 327.

[4]马莎莎, 吴继周, 宁秋悦, 等. 恩替卡韦治疗HBV相关性肝衰竭随机对照试验的Meta分析[J]. 世界华人消化杂志, 2013, 21(25): 2594.

[5]中华医学会肝病学分会, 中华医学会感染病学分会. 慢性乙型肝炎防治指南(2010年版)[J]. 中华传染病杂志, 2011(9): 405.

[6]Hou J L, Jia J D, Wei L, et al. Efficacy and safety of entecavir treatment in a heterogeneous CHB population from a 'real-world' clinical practice setting in China[J]. J Viral Hepat, 2013, 20(11): 811.

[7]Tuaillon E, Mondain A M, Nagot N, et al. Comparison of serum HBsAg quantitation by four immunoassays, and relationships of HBsAg level with HBV replication and HBV genotypes[J]. PLoS ONE, 2012, 7(3): e32143.

[8]褚小慧. 慢性乙型肝炎患者血清 HBV DNA, HBeAg 和ALT 滴度与恩替卡韦疗效的关系[J]. 现代检验医学杂志, 2015, 30(2): 142.

[9]Günal , Barut , Etikan , et al. Relation between serum quantitative HBsAg, ALT and HBV DNA levels in HBeAg negative chronic HBV infection[J]. Turk J Gastroenterol, 2014, 25(Suppl 1): 142.

[10]周培, 陈辉, 王鲁文, 等. 恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎肝硬化失代偿期患者的近期疗效及安全性[J]. 中西医结合肝病杂志, 2014, 24(1): 27.

[11]Peng C Y, Hsieh T C, Hsieh T Y, et al. HBV-DNA level at 6 months of entecavir treatment predicts HBeAg loss in HBeAg-positive chronic hepatitis B patients[J]. J Formos Med Assoc, 2013, 114(4): 308.

[12]Chang T T, Gish R G, de Man R, et al. A comparison of entecavir and lamivudine for HBeAg-positive chronic hepatitis B[J]. N Engl J Med, 2006, 354(10): 1001.

[13]刘朝阳, 李红广. 乙肝病毒感染者淋巴细胞亚群失衡与细胞免疫功能紊乱的临床研究[J]. 胃肠病学和肝病学杂志, 2014, 23(5): 560-562.

[14]Beaumont E, Roingeard P. Chimeric hepatitis B virus (HBV)/hepatitis C virus (HCV) subviral envelope particles induce efficient anti-HCV antibody production in animals pre-immunized with HBV vaccine[J]. Vaccine, 2015, 33(8): 973.

[15]Jaroszewicz J, Calle Serrano B, Wursthorn K, et al. Hepatitis B surface antigen (HBsAg) levels in the natural history of hepatitis B virus (HBV)-infection: a European perspective[J]. J Hepatol, 2010, 52(4): 514.

[16]金生. 慢性乙型肝炎抗病毒治疗—2012年欧洲肝病研究学会指南简介[J]. 中国实用内科杂志, 2013, 33(3): 193.

[17]宋晓西. 护理干预对乙肝患者抗病毒治疗依从性的影响[J]. 中华全科医学, 2011, 9(9): 1479.

[18]贺丽, 王莲莲, 施展, 等. 乙型肝炎病毒感染合并肝内胆汁淤积症妊娠妇女外周血辅助性T细胞表达分析[J]. 中国实用内科杂志, 2010, 30(9): 834.

Influence of entecavir on quantification of HBV DNA,HBsAg and HBeAg in patients with chronic hepatitis B

PENG Fengying, CHE Xiaoqiong, ZHAO Hongbin

(DepartmentofInfectiousDiseases,TheFirstAffiliatedHospitalofChongqingMedicalUniversity,Chongqing, 400016)

ABSTRACT:ObjectiveTo observe the influence of entecavir on the quantification of serum hepatitis B virus (HBV) DNA, hepatitis B surface antigen (HBsAg) and hepatitis B e antigen (HBeAg) in patients with chronic hepatitis B (CHB). MethodsA total of 160 patients with CHB were selected and treated with oral entecavir 0.5 mg/d at an empty stomach for 96 weeks continuously. The quantification of HBV DNA, HBsAg and HBeAg as well as the level of alanine aminotransferase (ALT) before treatment and 12, 24, 48 and 96 weeks after treatment were observed to calculate the negative conversion rates of HBV DNA and HBeAg and the normalization rate of ALT. Relationships between HBV DNA changes and HBsAg, HBeAg and ALT were analyzed. ResultsWith the prolonging of therapeutic time, the quantification of HBV DNA and HBeAg as well as level of ALT reduced gradually (F=11.562, 28.034, 22.417, P<0.01), while negative conversion rates of HBeAg and HBV DNA as well as normalization rate of ALT increased gradually. Before treatment and 12, 24 weeks after treatment, HBV DNA was negatively associated with HBsAg titer (r=-0.383, -0.293, -0.224, P<0.05 or P<0.01) and positively correlated with HBeAg titer (r=0.441, 0.392, 0.326, P<0.05 or P<0.01). ConclusionEntecavir has a definite efficacy in the treatment of CHB, and it can effectively improve the negative conversion rate of HBV DNA and HBeAg and normalization rate of ALT. During the early treatment, HBV DNA is negatively correlated with HBsAg and positively with HBeAg, and there is no association between them in the late stage of treatment. Therefore, multiple indexes should be used to comprehensively evaluate the clinical efficacy during treatment.

KEYWORDS:chronic hepatitis B; entecavir; hepatitis B surface antigen; hepatitis B e antigen; hepatitis B virus DNA

中图分类号:R 512.6

文献标志码:A

文章编号:1672-2353(2016)07-041-04

DOI:10.7619/jcmp.201607012

基金项目:重庆市教委科技项目(KJ070317)

收稿日期:2015-12-06