细胞因子诱导杀伤细胞治疗晚期肺癌的临床疗效观察

龙倩　周航　王家辉　冯源　黄玲　周星　陈珺

细胞因子诱导杀伤细胞治疗晚期肺癌的临床疗效观察

龙倩①②周航①②王家辉②冯源②黄玲②周星②陈珺②

摘要目的：探讨细胞因子诱导杀伤（cytokine induced killer，CIK）细胞在晚期肺癌中的治疗价值。方法：收集遵义医学院附属医院腹部肿瘤科2011年1月至2013年12月经病理诊断的晚期肺癌患者90例，分为观察组41例和对照组49例，观察组进行最佳支持治疗的同时给予CIK治疗；对照组仅给予最佳支持治疗，并在入组前1个月内未行放化疗。对两组患者进行生存随访，比较两组生存质量（KPS评分）和生存期，并观察不良反应。结果：观察组治疗后KPS评分较对照组提高，差异具有统计学意义（P= 0.034）；观察组的中位生存期为8个月，高于对照组的7个月，中位生存期差为1个月（P=0.044）；主要不良反应为发热（51.22%）、关节酸痛（36.58%）和失眠（29.27%）。结论：CIK细胞治疗晚期肺癌患者可提高生存质量和延长生存期，不良反应可耐受。

关键词细胞因子诱导杀伤细胞肺癌临床疗效不良反应

据报道，2012年全球范围内有180万例肺癌新发患者，占所有癌症发病率的13%，肺癌在男性中发病率和死亡率均居首位，居女性发病率第三位，死亡率居第二位［1］。在中国，肺癌居恶性肿瘤发病率和死亡率的第一位，每年新发病例约60万例，死亡病例约49万例［2］。早期肺癌的治疗以手术为主，但大部分肺癌患者诊断时已属晚期或出现转移，失去手术机会，综合治疗后效果不佳的晚期肺癌患者，身体机能下降，免疫功能受损，不宜再进行放化疗。近年来，生物治疗成为一种全新治疗方式，是继手术、放疗、化疗后的第四种治疗手段。细胞免疫治疗是肿瘤生物治疗的一种，其在多种肿瘤治疗中显示了较好的临床疗效和较小的不良反应［3-7］。遵义医学院附属医院腹部肿瘤科自2011年开展了细胞因子诱导杀伤细胞（CIK）免疫治疗技术，对部分不宜进行放化疗的晚期肺癌患者行CIK治疗，经随访观察后报道如下。

1　材料与方法

1.1一般资料

收集2011年1月至2013年12月遵义医学院附属医院腹部肿瘤科收治的晚期肺癌患者90例，根据治疗方式分为对照组49例和观察组41例。观察组抽取自体外周血单个核细胞（peripheral blood mono⁃nuclear cells，PBMCs）进行CIK细胞培养后回输，同时行最佳支持治疗，对照组仅给予最佳支持治疗，并在入组前1个月内未行放化疗。所有患者均经病理学、细胞学和影像学检查确诊为晚期肺癌，不宜或不愿再进行放化疗。其中男性70例，女性20例；年龄30～83岁；肿瘤直径>7 cm者26例，≤7 cm者64例。Ⅲ期20例，Ⅳ期70例；鳞癌48例，腺癌42例；伴远处转移者79例，无远处转移者11例。

1.2方法

1.2.1治疗前评估所有患者在治疗前均行常规检查：血常规、肝肾功能、电解质、大小便常规、HIV、RPR、乙肝五项、凝血功能、心电图、胸部X线片等，并进行Karnofskey功能状态（KPS）评分≥60分，预计生存期>3个月，经本院伦理委员会批准，患者均签署知情同意书。

1.2.2CIK细胞制备及回输PBMCs采集和CIK细胞培养均由本院干细胞移植中心负责，制备的CIK细胞经检测、评价质量达标后送至病房回输。具体如下：首先采集外周血单个核细胞4～8×109（COM.TEC型血细胞分离机），其次加入IFN-γ、IL-2和anti-CD3McAb共培养，最后多次测定一系列指标（计数，活细胞比例，流式细胞仪测定CD3、CD8、CD56），达到标准后，于第11天开始回输，每次回输CIK细胞>1× 109/500 mL生理盐水，连输5天（表1）。

1.2.3随访所有患者在治疗前和治疗后进行KPS评分，并进行前后参考比对。不良反应：观察组41例患者在CIK治疗期间详细观察不良反应，记录患者的发热、关节疼痛、失眠、厌食和皮疹。生存期：治疗后的患者于门诊或电话随访，随访时间至2013年12月31日，记录患者确诊时间、治疗时间和死亡病例的死亡时间，绘制生存曲线，计算中位生存期。

1.3统计学处理

2　结果

2.1患者的临床特征

两组患者在性别、年龄、肿瘤大小、临床分期、病理分型和远处转移方面差异无统计学意义（均P> 0.05），具有可比性（表2）。

2.2KPS评分

治疗前观察组和对照组的KPS评分分别为（74.29±5.01）、（74.69±5.00），差异无统计学意义（P= 0.700）；治疗后观察组和对照组的KPS评分分别为（84.87±5.06）、（82.24±6.54），差异具有统计学意义（P=0.034，表3）。

2.3不良反应

在观察组41例晚期肺癌患者中，主要不良反应为免疫性发热，发生率为51.22%，是CIK治疗的主要不良反应，一般无需处理，可自行缓解，遇有持续性高热的患者，可肌肉注射地塞米松5mg，使体温降至正常；其他非特异性不良反应为关节酸痛（36.58%），失眠（29.27%），厌食（12.19%）；偶见皮疹（4.87%，表4）。

2.4生存期

两组患者治疗后进行随访，随访3～17个月。观察组中位生存期为8个月；对照组中位生存期为7个月，对两组中位生存期进行Log-rank检验，P=0.044。两组生存曲线见图1。

表1　CIK细胞的质量控制Table 1　Quality control of CIK cells

表2　观察组与对照组临床特征比较Table 2 Comparison of the clinical features between the observation and control groups

表2　观察组与对照组临床特征比较（续表2）Table 2 Comparison of the clinical features between the observation and control group

表3　观察组与对照组KPS评分比较（±s）Table 3 Comparison between the KPS scores of the two groups of patients（±s）

表3　观察组与对照组KPS评分比较（±s）Table 3 Comparison between the KPS scores of the two groups of patients（±s）

Clinical feature Before treatment After treatment Observation group 74.29±5.01 84.87±5.06 Control group 74.69±5.00 82.24±6.54 P 0.700 0.034

表4　观察组41例晚期肺癌CIK治疗不良反应Table 4 Adverse reactions in 41 cases of lung cancer CIK treatment

图1　两组患者生存曲线比较Figure 1 Lung cancer survival curves of patients in the two groups

3　讨论

CIK细胞由Schmidt-Wolf等［8］在1991年首次报道，其具有增殖能力强、细胞毒性高的特点，有较强的肿瘤杀伤活性。CIK是将PBMCs中加入抗IL-2、 CD3McAb、IFN-γ等多种细胞因子共培养之后得到的一群异质细胞［9］，细胞表面主要表达CD3、CD56，具有T淋巴细胞强大的抗瘤活性和NK细胞非主要组织相容性复合体（major histocompability complex，MHC）限制性杀瘤的特点［10］。在此基础上，本研究将不宜进行放化疗的晚期肺癌患者给予CIK治疗，观察临床疗效，得到了较好的效果。

本临床治疗病例的回顾性分析，按照有无接受生物治疗分为观察组和对照组，两组的分组具有一定程度的随机成分，至少在一定程度上保证了两组背景治疗的均衡，并对背景治疗的几个主要参数，尤其是对于生存期有重要影响的病理类型和临床分期这两个关键参数进行了两组间的比较，差异无统计学意义。

本研究显示，两组患者KPS评分存在显著性差异，CIK治疗组患者KPS评分明显高于对照组。其原因是肿瘤患者的免疫系统被破坏后，淋巴细胞比例失调，自身免疫功能低下，输注CIK（含大量活化的淋巴细胞）后，淋巴细胞比例得到最大化纠正，从而增强了患者的细胞免疫功能，改善患者的生存质量，这与曾金武等［11］报道一致。

另外，本研究结果还观察到两组患者的中位生存期也存在显著性差异，CIK治疗组患者的中位生存期较对照组延长1个月，与马英恒等［12］报道相符。其原因是CIK细胞兼具T细胞和NK细胞的功能，通过在体内外调节增加细胞免疫功能展现出抗肿瘤活性［13-14］，从而延长患者的生存期，提高OS。其杀瘤途径［15］可能有以下3种：1）通过黏附分子LFA-1/ICAM-1结合肿瘤细胞，分泌大量BLT酯酶颗粒直接穿透靶细胞膜，导致肿瘤细胞裂解；2）分泌IL-2、IL-6等细胞因子促使特异性T细胞增殖活化间接杀伤瘤细胞；3）诱导肿瘤细胞凋亡。

本结果表明CIK免疫治疗对不宜继续治疗的晚期肺癌患者具有治疗价值，可以提高患者的生存质量，延长生存期，并且患者能够耐受CIK治疗的不良反应，CIK免疫治疗可以作为晚期肺癌的一种治疗手段，使患者在生存质量和生存期方面获益。

参考文献

[1] Torre LA, Bray F, Siegel RL, et al. Global Cancer Statistics, 2012[J]. CA Cancer J Clin, 2015, 65:87-108.

[2] Chen WQ, Zhang SW, Zeng HM, et al. Cancer Incidence and Death In China 2010[J]. Bulletin of Chinese Cancer, 2014, 23(1):1-10.[陈万青,张思维,曾红梅,等.中国2010年恶性肿瘤发病与死亡[J].中国肿瘤,2014,23(1):1-10.]

[3] Zhang J, Zhu L, Zhang Q, et al. Effects of cytokine-induced killer cell treatment in colorectal cancer patients[J]. A retrospective study. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2014, 68(6):715-720.

[4] Jin C, Li J, Wang Y, et al. Impact of Cellular Immune Function on Prognosis of Lung Cancer Patients after Cytokine-induced Killer Cell Therapy[J]. Asian Pac J Cancer Prev, 2014, 15(15): 6009-6014.

[5] Chen B, Liu L, Xu H, et al. Effectiveness of immune therapy combined with chemotherapy on the immune function and recurrence rate of cervical cancer[J]. Experimental And Therapeutic Medicine, 2015, 9:1063-1067.

[6] Yajing Zhang, Jin Wang, Yao Wang, et al. Autologous CIK Cell Immunotherapy in Patients with Renal Cell Carcinoma after Radical Nephrectomy[J]. Clinical & Developmental Immunology, 2013, 2013 (1):195691.

[7] Schmeel FC, Schmeel LC, Gast SM, et al. Adoptive Immunotherapy Strategies with Cytokine-Induced Killer (CIK) Cells in the Treatment of Hematological Malignancies[J]. Int J Mol Sci, 2014, 15(8):14632-14648.

[8] Schmidt-Wolf IG, Negrin RS, Kiem HP, et al. Use of a SCID mouse/ human lymphoma model to evaluate cytokine -induced killer cells with potent antitumor cell activity[J]. Exp Med, 1991, 174(1):139-149.

[9] Kaijian Lei, Jing Wang, Yuming Jia, et al. The effects of CIK cells on the treatment of renal cell carcinoma[J]. Chinese-German Journal of Clinical Oncology, 2009, 8(6):346-348.

[10] Nagaraj S, Ziske C, Schmidt-Wolf IG. Human cytokine -induced killer cells have enhanced in vitro cytolytic activity via non-viral interleukin-2 gene transfer[J]. Genet Vaccines Ther, 2004, 2(1):12-16.

[11] Zeng JW, Feng QQ. Clinical observation on CIKcells in the treatment of 50 patients with advanced non-small cell lung cancer[J]. Journal of Clinical Pulmonary Medicine, 2014, 19(1):118-120.[曾金武,冯茜茜.CIK细胞治疗晚期非小细胞肺癌50例临床观察[J].临床肺科杂志,2014,19(1):118-120.]

[12] Ma YH, Hu X, Chen Z, et al. Clinical effect of 80 patients with advanced malignant solid tumors treated by DC-CIK cells[J]. Journal of Modern Oncology, 2015, 23(1):48-50.[马英桓,胡祥,陈哲, 等.DC-CIK细胞联合治疗80例晚期肺癌的临床观察[J].现代肿瘤医学,2015,23(1):48-50.]

[13] Helms MW, Prescher JA, Cao YA, et al. IL-12 enhances efficacy and shortens enrichment time in cytokine-induced killer cell immunotherapy[J]. Cancer Immunol Immunother, 2010, 59:1325-1334.

[14] Schlimper C, Hombach AA, Abken H, et al. Improved activation toward primary colorectal cancer cells by antigen-specific targeting autologous cytokine- induced killer cells[J]. Clin Dev Immunol, 2012, 2012:238924.

[15] Zeng YX. Oncology[M]. 3rd Edition. BeiJing: People's medical publishing house, 2012:732.[曾益新.肿瘤学[M].第3版.北京:人民卫生出版社,2012:732.]

（2016-01-28收稿）

（2016-03-03修回）

（编辑：杨红欣校对：邢颖）

Efficacy of cytokine-induced killer cells on patients with advanced lung cancer

Qian LONG1,2, Hang ZHOU1,2, Jiahui WANG2, Yuan FENG2, Ling HUANG2, Xing ZHOU2, Jun CHEN2

Correspondence to: Hang ZHOU; E-mail: zhouhangcno55@126.com
1Zunyi Medical University, Zunyi 563003, China; Department Oncology, Affiliated Hospital of Zunyi Medical College, Zunyi 563003, China

AbstractObjective: To observe the efficacy of cytokine-induced killer (CIK) cells on patients with advanced lung cancer. Methods: A total of 90 patients with advanced lung cancer were identified from January 2011 to December 2013. CIK therapy was given to 41 patients in the observation group, whereas the other 49 patients in the control group received the best support treatments without chemotherapy or radiotherapy within one month of inclusion. Following up was conducted for the patients in the two groups, and KPS scores, median survival, and adverse reactions compared. Results: The KPS score in the observation group was higher than that of the control group after treatment (P=0.034). The median survival period of the observation group was eight months, which was one month longer than that of the control group (P=0.044). Major adverse reactions included fever, joint pain, and insomnia, which were recorded 51.22%, 36.58%, and 29.27% of occurrence, respectively. Conclusion: CIK cell therapy improved the quality of life and prolonged the survival of advanced lung cancer patients with tolerable adverse reactions.

Keywords:cytokine-induced killer cells, lung cancer, efficiency, adverse reaction

doi:10.3969/j.issn.1000-8179.2016.07.118

作者单位：①遵义医学院（贵州省遵义市563003）；②遵义医学院附属医院腹部肿瘤科

通信作者：周航zhouhangcno55@126.com

作者简介

龙倩专业方向为腹部肿瘤的综合治疗。

E-mail：517677403@qq.com