老年白血病患者Survivin基因表达变化及其对预后的影响

刘　娜　姜丽波　张淑英　姚宇宁　许玲玲

(齐齐哈尔医学院附属第二医院血液内科，黑龙江　齐齐哈尔　161000)



老年白血病患者Survivin基因表达变化及其对预后的影响

刘娜姜丽波张淑英姚宇宁许玲玲

(齐齐哈尔医学院附属第二医院血液内科，黑龙江齐齐哈尔161000)

〔摘要〕目的探讨老年白血病患者Survivin基因表达变化及其对预后的影响。方法老年白血病患者41例，其中初治患者22例，缓解患者12例，复发患者7例。体检的健康人群中随机选择15例作为对照组。检测各组的Survivin基因表达情况及外周血白细胞计数情况。结果对Survivin基因在不同白血病细胞中的阳性表达率进行检测和比较，急性非淋巴细胞白血病组和急性淋巴细胞白血病组均显著高于对照组(P<0.05)。检测各组及对照组Survivin基因的阳性表达，初治组和复发组Survivin基因阳性表达率分别为90.91%和85.71%，均显著高于对照组的20.00%和缓解组的41.637%(P<0.05)。经白细胞计数和检测，处于正常水平11例，其余30例均存在计数异常。分析Survivin基因的阳性表达情况与白细胞计数的关系，白细胞计数异常组的Survivin基因阳性表达率(86.67%)显著高于正常组(45.45%，P<0.05)。结论对老年白血病患者而言，其体内Survivin基因表达水平的变化与疾病的发生、发展及预后存在十分密切的联系。

〔关键词〕白血病；Survivin基因；基因表达

Survivin基因属于一种十分重要的凋亡抑制蛋白，仅在胚胎组织及各种肿瘤组织中发生表达〔1〕。Survivin基因具有一定的肿瘤特异性，和各种肿瘤细胞的分化及转移等活动都具有十分密切的联系。以往有学者通过建立动物模型并进行实验研究发现〔2〕，Survivin基因和p53蛋白之间存在十分密切的联系，在胃癌前病变过程中，二者可以共同作用，发挥出一定的协同作用。为了对胃癌前病变予以有效的干预，并尽可能延缓癌变进程，可以采用下调Survivin基因的表达及降低凋亡促进基因P53突变等方式。本研究探讨老年白血病患者Survivin基因表达变化及其对预后的影响。

1资料与方法

1.1一般资料老年白血病患者41例，均为本院血液科住院患者。其中男25例，女16例，年龄60～81岁，平均(69.25±8.15)岁。均经临床诊断，确诊为白血病，急性非淋巴细胞白血病30例，急性淋巴细胞白血病11例。其中初治患者22例，缓解患者12例，复发患者7例。在本院接受体检的健康人群中随机选择15例作为对照组。本次研究相关内容和方法均经本院伦理部门审核并批准。

1.2收集标本无菌条件下采集骨髓样本，常规处理之后，分离单个核细胞。利用磷酸缓冲溶液(由天津百伦斯生物技术有限公司提供)进行2次洗涤，添加Trizol试剂(由北京飞美斯分析科技有限公司提供)，混合均匀之后保存待用。

1.3RT-PCR检测利用Trizol试剂盒(由北京厚生博泰科技有限公司提供)进行总RNA提取，严格按照说明书进行操作，并利用分光光度计对总RNA的纯度和完整性进行检测。进行逆转录，获得cDNA。进行PCR扩增，产物置于琼脂糖凝胶(由上海源培生物科技股份有限公司提供)中予以电泳，并进行半定量检测。

1.4白细胞计数抽取外周血，采用库尔特颗粒计数法，利用全自动细胞计数仪(由杭州新景生物试剂开发有限公司提供)进行白细胞计数。

1.5统计学方法采用SPSS19.0统计学软件进行分析，计数资料采用χ2检验。

2结果

2.1Survivin基因在不同白血病细胞中的表达情况急性非淋巴细胞白血病组和急性淋巴细胞白血病组Survivin基因阳性表达率〔20例(66.67%)、9例(81.82%)〕均显著高于对照组〔3例(20.00%)，P<0.05〕。见图1。

1～2为急性非淋巴细胞白血病组，3～4为急性淋巴细胞白血病组，5～8为对照组图1　Survivin基因在各组表达情况

2.2各组Survivin基因的阳性表达情况初治组和复发组Survivin基因阳性表达率〔20例(90.91%)和6例(85.71%)〕均显著高于对照组和缓解组〔5例(41.67%)，P<0.05〕。

2.3Survivin基因的阳性表达情况与白细胞计数的关系经白细胞计数和检测，处于正常水平的有11例，其余30例均计数异常。白细胞计数异常组Survivin基因的阳性表达率 〔26例(86.67%)〕显著高于白细胞计数正常组〔5例(45.45%)，P<0.05〕。

3讨论

在各种肿瘤的发生及发展过程中，细胞凋亡都发挥着十分重要的作用〔3〕。而对肿瘤细胞而言，其凋亡会受到诸多凋亡相关基因的控制和影响。凋亡抑制蛋白是一类特殊的调节因子，可以参与细胞周期之中，并在终效应阶段发挥出十分重要的作用〔4〕。Survivin即为一种重要的凋亡抑制蛋白，由142个氨基酸组成，位于染色体的17q25。Survivin没有环指结构，仅含有单一的BIR功能区〔5〕。Survivin基因可以有效防止细胞发生凋亡，其作用机制主要通过对凋亡酶产生移植来阻碍细胞的凋亡。Survivin基因在正常细胞中几乎不存在，但在人类各种肿瘤组织癌细胞中，Survivin含量十分丰富〔6〕。Survivin可在多种转化细胞系中表达，并见于所有人类十分常见的肿瘤组织，例如前列腺癌、乳腺癌、胰腺癌、肺癌、结肠癌等。胡梦泽等〔7〕指出，在多种肿瘤之中，均存在survivin基因表达的情况，为了对肿瘤细胞的增殖予以有效的抑制，可以积极设计不同的具有一定活性的survivin 小干扰RNA序列，以实现对survivin基因表达的有效沉默。孙文宣〔8〕对Survivin在急性髓系白血病中的表达及其在白血病中的致病作用进行了分析，Survivin表达量和白血病患者的、外周血、血红蛋白水平及骨髓原始细胞计数、年龄、白细胞计数、性别等变量之间不存在关系，但如果经检测Survivin呈现出阳性，则表明可能会出现严重感染。对于经检测Survivin呈现出阳性的患者，其治愈率低于Survivin呈阴性的患者，但复发率高于阴性患者。最终认为，在急性髓系白血病患者的骨髓中，Survivin会出现高水平表达的情况，表明Survivin和急性髓系白血病的发生及发展之间存在十分密切的联系，且可作为急性髓系白血病患者预后不良的重要参考指标。本研究表明在白血病患者体内白血病细胞的各项活动中，包括增殖和分化、抗凋亡等，Survivin基因的表达均可以发挥出十分重要的作用来。

4参考文献

1曲延章，王苏亮，韩英杰，等.中枢神经系统白血病与非中枢神经系统白血病患者脑脊液中基质细胞衍生因子-1α的表达对比〔J〕.中国老年学杂志，2014；34(22)：6295-6.

2李美丽，朱西杰，李卫强，等.复方蜥蜴散不同微粒组合剂对胃癌前病变模型大鼠Bcl-2和Survivin表达的影响〔J〕.中国实验方剂学杂志，2014；20(15)：150-3.

3李勇，王力利，王银洁，等.胃癌原发灶和淋巴结转移灶中锌指蛋白139与肿瘤细胞凋亡和生存素及B细胞淋巴瘤/白血病-2的关系及意义研究〔J〕.中国全科医学，2015；18(3)：250-4.

4李世武，陈瑶.X连锁凋亡抑制蛋白表达对肿瘤患者生存预后影响的Meta分析〔J〕.中国新药与临床杂志，2015；34(4)：262-70.

5Tsubaki M，Komai M，Itoh T.etal.By inhibiting Src，verapamil and dasatinib overcome multidrug resistance via increased expression of Bim and decreased expressions of MDR1 and survivin in human multidrug-resistant myeloma cells〔J〕.Leukemia Res,2014；38(1)：121-30.

6檀碧波，李勇，范立侨，等.胃癌凋亡相关蛋白Survivin、B淋巴细胞/白血病-2、bax表达与肿瘤细胞体外化疗药敏性的关系〔J〕.中华实验外科杂志，2012；29(7)：1315-7.

7胡梦泽，师晓东，王天有，等.小干扰RNA沉默survivin基因表达对肿瘤细胞A549、Hela S3和K562的影响及小干扰RNA序列的筛选〔J〕.中华实用儿科临床杂志，2014；29(3)：194-8.

8孙文宣.Survivin在急性髓系白血病中的表达及AML1a对小鼠造血干祖细胞的调节作用及其在白血病中的致病作用研究〔D〕.北京：北京协和医学院中国医学科学院，2013.

〔2014-12-11修回〕

(编辑苑云杰)

第一作者：刘娜(1979-)，女，硕士，主治医师，主要从事白血病研究。

〔中图分类号〕R733.7

〔文献标识码〕A

〔文章编号〕1005-9202(2016)09-2178-02；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.09.059