饲料中胆汁酸添加水平对齐口裂腹鱼幼鱼生长性能、形体指标及体成分的影响

郑宗林　曾本和,2　向　枭*　周兴华　陈　建　吕光俊朱成科　李代金　任胜杰

(1. 西南大学荣昌校区水产系，淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室，水产科学重庆市市级重点实验室，重庆402460；2.西藏自治区农牧科学院水产研究所，拉萨 850000)



饲料中胆汁酸添加水平对齐口裂腹鱼幼鱼生长性能、形体指标及体成分的影响

郑宗林1曾本和1,2向枭1*周兴华1陈建1吕光俊1朱成科1李代金1任胜杰1

(1. 西南大学荣昌校区水产系，淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室，水产科学重庆市市级重点实验室，重庆402460；2.西藏自治区农牧科学院水产研究所，拉萨 850000)

本试验旨在探索饲料中胆汁酸添加水平对齐口裂腹鱼幼鱼生长性能、形体指标及体成分的影响。以360尾健康、平均体重为(12.74±0.14) g的齐口裂腹鱼幼鱼为试验对象，随机分为4组，每组3个重复，每个重复30尾。4组试验鱼分别投喂添加0(对照组)、75、150、300 mg/kg胆汁酸的试验饲料，养殖时间为70 d。结果表明：随着胆汁酸添加水平的增加，齐口裂腹鱼幼鱼的增重率(WGR)、特定生长率(SGR)、饲料蛋白质效率(PER)均呈先升高后趋于稳定的变化趋势，饲料系数(FCR)则呈先降低后趋于稳定的变化趋势。各胆汁酸添加组的WGR、SGR、PER均显著高于对照组(P<0.05)，而FCR则显著低于对照组(P<0.05)。当胆汁酸添加水平为150 mg/kg时，WGR、SGR均达到最大值，分别为226.63%和1.69%/d；当胆汁酸添加水平为300 mg/kg时，PER达到最大值，为1.64%；FCR则在胆汁酸添加水平为75 mg/kg时有最小值，为1.56。通过二次回归分析可知，WGR、SGR、PER和FCR最佳时的胆汁酸添加水平分别为186.83、192.86、166.67和183.33 mg/kg。随着胆汁酸添加水平的增加，齐口裂腹鱼幼鱼的肥满度(CF)呈先升高后趋于稳定的变化趋势，脏体比(VSI)、肝体比(HSI)则呈先降低后趋于稳定的变化趋势。各胆汁酸添加组的CF显著高于对照组(P<0.05)，而VSI、HSI则显著低于对照组(P<0.05)。随着胆汁酸添加水平的增加，齐口裂腹鱼全鱼及肌肉粗蛋白质含量呈先升高后趋于稳定的变化趋势，全鱼、肌肉及肝胰脏中粗脂肪含量则呈先降低后趋于稳定的变化趋势，但全鱼及肌肉中水分、粗灰分含量则无显著变化(P>0.05)。由此得出，饲料中添加胆汁酸能有效地提高齐口裂腹鱼幼鱼的饲料利用率，促进其生长，改善其形体指标，减少其肌肉及肝脏中脂肪的沉积。综合考虑，齐口裂腹鱼饲料中胆汁酸适宜的添加水平为166.67～192.86 mg/kg。

齐口裂腹鱼；胆汁酸；生长性能；形体指标；体成分

齐口裂腹鱼(Schizothoraxprenanti)是长江上游的一种底层冷水性鱼类，肉质细嫩、营养价值丰富、味道鲜美[1]，深受消费者喜爱，是我国重要的经济鱼类。近年来，国内齐口裂腹鱼养殖业发展迅猛，养殖产量逐年增加，然而，在集约化养殖条件下，为加快齐口裂腹鱼生长速度，养殖者多使用高脂配合饲料，导致其体脂肪含量偏高。这不仅降低了齐口裂腹鱼的肉质和可食部分比例，也导致饲料营养物质的浪费，增加了养殖成本。因此，如何促进齐口裂腹鱼脂肪分解代谢，提高体蛋白质沉积成为亟待解决的问题。胆汁酸是胆汁的主要成分之一，在动物脂肪代谢中起着重要作用。其分子结构一端具有亲油的烷基，一端具有亲水的羟基和羧基，这种结构使胆汁酸具有较强的表面活力，可以降低油和水两相间的表面张力，促进脂肪乳化，形成可以悬浮在水中的脂肪酸乳糜微粒，扩大脂肪与脂肪酶的接触面积，从而加速脂肪的消化吸收，提高脂肪的消化率。乳化作用能不同程度地改善动物对其他营养物质，特别是脂溶性维生素、类胡萝卜素及其他微量元素的吸收利用[2]，同时具有提高动物的生长性能、杀菌消炎、提高机体免疫力[3]等作用。Reinhart等[4]研究发现胆汁酸能显著提高断奶仔猪采食量、增重率、脂肪摄入量和氮保留率。Pullen等[5]研究表明胆汁酸能提高肉鸡对脂肪的消化吸收。胆汁酸对鱼类也具有促进生长、降低机体脂肪沉积、提高可食部分比例等作用[6-8]，但相关的研究报道还较少。本试验旨在探讨饲料中添加不同水平的胆汁酸对齐口裂腹鱼生长性能、形体指标和体成分的影响，以期为胆汁酸在齐口裂腹鱼配合饲料中的应用提供理论参考。

1　材料与方法

1.1试验饲料

以鱼粉、豆粕、菜籽粕等为蛋白质源，以大豆油为脂肪源，α-淀粉和次粉为糖源，设计齐口裂腹鱼的基础饲料配方。在基础饲料中分别添加0、75、150、300 mg/kg的胆汁酸(由广州信豚水产技术有限公司提供，其有效成分的质量分数为15%，主要成分为猪熊去氧胆酸和石胆酸等)，配制成4种等氮等脂的试验饲料。各原料均粉碎过60目筛，称重后混匀，量少的组分采用逐级扩大法混合，用试验室小型绞肉机制成粒径为1 mm的颗粒饲料，自然晾干后于-20 ℃冰柜中保存备用。基础饲料组成及营养成分见表1。

1.2试验设计及饲养管理

试验用齐口裂腹鱼购自雅安冷水鱼养殖场，为同一批繁殖的幼鱼。购回后先用4%的食盐水消毒后放入暂养池中暂养，以基础饲料饱食投喂，使其逐渐适应试验饲料及养殖环境。暂养7 d后，选择个体大小均匀，健康、无伤病，体重为(12.74±0.14) g的齐口裂腹鱼360尾，随机分为4组，设1个对照组和3个试验组，每组设3个重复，每个重复30尾鱼，以重复为单位随机放入12个试验水族箱(1.06 m×0.41 m×0.38 m)中。对照组投喂不添加胆汁酸的试验饲料，3个试验组分别投喂添加75、150、300 mg/kg胆汁酸的试验饲料，养殖时间为70 d。试验期间，每天表观饱食投喂3次(08:00、13:00、16:00)，养殖池保持微流水，各养殖池水体每天的交换量为30%。每日监测水温、试验鱼的摄食行为和死亡数量等。水温维持在15～20 ℃，溶氧浓度高于6.0 mg/L，pH 7.0～7.5。

表1　基础饲料组成及营养水平(风干基础)

1)预混料为每千克饲料提供The premix provided the following per kg of the diet:VA 30 000 IU，VC 200 mg，VD 325 000 IU，VE 600 mg，VK 100 mg，VB150 mg，VB260 mg，尼克酸 nicotinic acid 100 mg，泛酸钙 calcium pantothenate 120 mg，VB640 mg，VB120.2 mg，生物素 biotin 7 mg，叶酸 folic acid 20 mg，肌醇inositol 250 mg，FeSO4·7H2O 122.0 g，CuSO4·5H2O 7.20 g，MnSO4·H2O 5.16 g，ZnSO4·7H2O 15.56 g，KI 6.58 g，NaSeO32.10 g。

2)实测值Measured values。

1.3样品采集

试验结束后对试验鱼饥饿24 h，然后对每个重复进行计数、称重。在各组中随机取5尾试验鱼用50 mg/L的MS-222溶液麻醉，分别测定其体长和体重后解剖取内脏、肝胰脏及脂肪团，分别称重后用于计算肝体比、脏体比及分析肝胰脏营养成分；取背鳍以下侧线以上的肌肉，自封袋密封，保存于-20 ℃冰箱，用于测定肌肉营养成分。另外从每个重复中随机取5尾鱼，保存于-20 ℃冰箱，用于测定全鱼营养成分。

1.4指标测定

饲料及全鱼、肌肉、肝胰脏中水分、粗蛋白质、粗脂肪和粗灰分含量的测定参照AOAC(1995)[9]的方法。其中，粗蛋白质含量采用凯氏定氮法测定；粗脂肪含量采用索氏抽提法(乙醚为溶剂)测定；水分含量采用105 ℃常压干燥法测定；粗灰分含量采用550 ℃灼烧法测定。

1.5计算公式

增重率(weight gain rate，WGR，%)=

100×(Wt-W0)/W0；

特定生长率(specific growth rate，SGR，%/d)=

100×(lnWt-lnW0)/t；

蛋白质效率(protein efficiency ratio，PER，%)=

(Wt-W0)/F×P；

饲料系数(feed conversion ratio，FCR)=

F/(Wt-W0)；

成活率(survival rate，SR，%)=100×Nf/Ni；

肥满度(condition factor，CF，g/cm3)=Wt/L3；

脏体比(viscerasomatic index，VSI，%)=

100×Wv/Wt；

肝体比(hepaticsomatic index，HSI，%)=

100×Wh/Wt。

式中：W0为试验鱼的初始体重(g)；Wt为试验鱼的终末体重(g)；F为饲料摄入量(g)；P为饲料粗蛋白质含量(%)；Ni为试验开始时试验鱼的尾数；Nf为试验结束时试验鱼的尾数；t为养殖试验天数(d)；L为试验鱼体长(cm)；Wv为试验鱼内脏团重(g)；Wh为试验鱼肝胰脏重(g)。

1.6数据统计

试验结果采用“平均值±标准差”(mean±SD)表示。采用SPSS 19.0统计软件中单因素方差分析(one-way ANOVA)进行统计分析，若差异显著，则采用Duncan氏法进行多重比较，差异显著水平为P<0.05。以二次多项式来拟合WGR、SGR、PER和FCR与胆汁酸添加水平之间的相关关系。

2　结果与分析

2.1饲料中胆汁酸添加水平对齐口裂腹鱼幼鱼生长性能的影响

由表2可知，随着胆汁酸添加水平的增加，齐口裂腹鱼幼鱼的WGR、SGR、PER呈先升高后趋于稳定的变化趋势。当胆汁酸添加水平为150 mg/kg时，齐口裂腹鱼幼鱼的WGR、SGR均达到最大值，分别为226.63%和1.69%/d，较对照组分别提高了29.95%(P<0.05)和17.36%(P<0.05)；而PER则在胆汁酸添加水平为75和300 mg/kg时共同达到最大值，为1.64%，较对照组提高了8.44%(P<0.05)。当胆汁酸添加水平≥75 mg/kg时，试验鱼的WGR、SGR、PER各组间均无显著差异(P>0.05)，但均显著高于对照组(P<0.05)。齐口裂腹鱼幼鱼的FCR则随胆汁酸添加水平的增加呈先降低后趋于稳定的变化趋势，且在300 mg/kg组有最小值，为1.56，较对照组降低了6.59%(P<0.05)。当胆汁酸添加水平≥75 mg/kg时，试验鱼的FCR各组间差异不显著(P>0.05)，但均显著低于对照组(P<0.05)。以二次多项式来拟合WGR、SGR、PER及FCR与胆汁酸添加水平间的相关关系(图1至图4)，通过抛物线回归可知，齐口裂腹鱼幼鱼WGR(y1)、SGR(y2)、PER(y3)与胆汁酸添加水平(x)的回归方程分别为：y1=-0.001 5x2+0.560 5x+173.2(R2=0.987 4)；y2=-7E-06x2+0.002 7x+1.436 5(R2=0.995 3)；y3=-3E-06x2+ 0.001x+1.549 8(R2=0.833 5)，则在抛物线的最高点分别获得齐口裂腹鱼幼鱼WGR、SGR、PER的最大值，此时对应的胆汁酸添加水平分别为186.83、192.86和166.67 mg/kg；FCR(y4)与胆汁酸添加水平(x)的回归方程为：y4=-3E-06x2-0.001 1x+1.661 5(R2=0.891 8)，则PCR最小时胆汁酸添加水平为183.33 mg/kg。此外，胆汁酸的添加水平对试验鱼的成活率无显著影响(P>0.05)。

2.2饲料中胆汁酸添加水平对齐口裂腹鱼幼鱼形体指标的影响

由表3可知，随着胆汁酸添加水平的增加，齐口裂腹鱼幼鱼的CF呈先升高后趋于稳定的变化趋势，且在150 mg/kg组有最大值(0.92 g/cm3)，与75和300 mg/kg组的差异不显著(P>0.05)，但显著高于对照组(P<0.05)；齐口裂腹鱼幼鱼的VSI、HSI均随胆汁酸添加水平的增加而呈先降低后趋于稳定的变化趋势，胆汁酸添加水平为75～300 mg/kg时，齐口裂腹鱼幼鱼的VSI、HSI各组间差异不显著(P>0.05)，但均显著低于对照组(P<0.05)。

表2　饲料中胆汁酸添加水平对齐口裂腹鱼幼鱼生长性能的影响

同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，相同或无字母表示差异不显著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

图1　胆汁酸添加水平与齐口裂腹鱼幼鱼增重率的关系

2.3饲料中胆汁酸添加水平对齐口裂腹鱼幼鱼体成分的影响

由表2可知，随着胆汁酸添加水平的增加，齐口裂腹鱼幼鱼全鱼及肌肉中粗蛋白质含量呈先升高后趋于稳定的变化趋势，且均在150 mg/kg组达到最高值(分别为12.68%和15.44%)，胆汁酸添加水平在75～300 mg/kg时各组间差异不显著(P>0.05)，但均显著高于对照组(P<0.05)；肝胰脏中粗蛋白质含量则与胆汁酸的添加水平无明显的相关关系，各组间差异不显著(P>0.05)；全鱼、肌肉及肝胰脏中粗脂肪含量随胆汁酸添加水平的增加呈先降低后趋于稳定的变化趋势，且在胆汁酸添加水平为75～150 mg/kg时各组间差异不显著(P>0.05)，但均显著低于对照组(P<0.05)。全鱼、肌肉中水分、粗灰分含量和肝胰脏中水分含量各组间差异不显著(P>0.05)。

图2　胆汁酸添加水平与齐口裂腹鱼幼鱼特定生长率的关系

图3　胆汁酸添加水平与齐口裂腹鱼幼鱼蛋白质效率的关系

项目Items胆汁酸添加水平Bileacidsupplementallevel/(mg/kg)075150300肥满度CF/(g/cm3)0.82±0.02a0.86±0.01b0.92±0.08b0.88±0.05b脏体比VSI/%9.10±0.16b8.27±0.06a8.34±0.13a8.08±0.20a肝体比HSI/%1.78±0.14b1.46±0.11a1.52±0.12a1.47±0.09a

表4　饲料中胆汁酸添加水平对齐口裂腹鱼幼鱼体成分的影响

3　讨　论

3.1饲料中胆汁酸添加水平对齐口裂腹鱼幼鱼生长性能的影响

3.2饲料中胆汁酸添加水平对齐口裂腹鱼幼鱼形体指标的影响

VSI主要受鱼类的种类及摄食情况等的影响，而肝脏是鱼类的代谢器官和主要的营养储藏器官，一定发育阶段鱼类HSI的大小反映了其肝脏的健康程度。向枭等[20]认为，鱼类的VSI和HSI会随着鱼体的生长而相对降低，此时鱼体主要通过提高对饲料的转化利用来满足自身生长发育所需的能量。胆汁酸还可促进动物对干物质、蛋白质的转化利用率[11]，并通过胆汁酸调控脂肪代谢酶活性而促进机体对脂肪的利用[21]，减少能量在内脏中的沉积，增加其可食部分的比例。黄炳山等[22]研究发现，胆汁酸显著提高了大菱鲆肝脂酶及脂蛋白脂酶的活性，提高肝脏对脂肪的分解和利用，起到保肝的作用。本试验中，各胆汁酸添加组齐口裂腹鱼幼鱼的VSI、HSI均显著低于对照组，但各胆汁酸添加组间无显著差异。但周书耘等[8]研究发现，胆汁酸可显著提高军曹鱼的HSI及VSI；胡田恩等[11]研究发现，胆汁酸可显著降低牛蛙的VSI，但对其HSI的影响不显著；孙建珍等[13]研究发现，大菱鲆幼鱼的VSI及肠体比均随胆汁酸添加水平的增加而呈先上升后平稳的趋势。上述结果与本研究的结果有一定的差异，其具体原因还需要进一步的研究。CF是一个粗略的衡量鱼类的能源储备和健康的指标[23]，其变化情况可以反映鱼类的营养状况[24]。研究发现，军曹鱼[8]、大菱鲆[22]的CF随胆汁酸添加水平的增加而呈微弱的升高趋势。本试验中，各胆汁酸添加组齐口裂腹鱼幼鱼的CF显著高于对照组，但各胆汁酸添加组间无显著差异，与上述研究结果基本一致，说明胆汁酸能增加齐口裂腹鱼幼鱼对饲料的利用率，促进营养物质在鱼体中的贮存。

3.3饲料中胆汁酸添加水平对齐口裂腹鱼幼鱼体成分的影响

本试验中，胆汁酸能有效地降低齐口裂腹鱼幼鱼全鱼、肌肉及肝胰脏中粗脂肪含量，提高其全鱼及肌肉中粗蛋白质的含量，与对军曹鱼[8]、大菱鲆[13,22]、罗氏沼虾[7]等的研究所得结果基本一致。这说明胆汁酸能促进动物体内脂肪的分解，提高多不饱和脂肪酸(PUFA)在鱼体内的吸收和利用[7]，为养殖动物的生命活动提供能量。此外，有研究发现，胆汁酸能使脂肪酶结合到甘油三酯的脂滴表面，提高脂肪酶活性，促进脂肪消化[13]。Watanabe等[25]研究表明，胆汁酸可激活小鼠褐色脂肪细胞表面G蛋白偶联胆汁酸受体(TGR5)，从而提高胞内环腺苷酸(cAMP)和甲状腺激素水平，加快机体的基础代谢，提高机体中脂肪组织的代谢强度，改善脂肪在动物体内的转运，降低鱼体粗脂肪的含量；胡田恩等[11]研究表明，胆汁酸能显著提高牛蛙对饲料氮的保留率。因此，胆汁酸可通过促进动物脂肪分解代谢而节约饲料蛋白质，提高养殖动物体内蛋白质的沉积。同时，胆汁酸降低了脂肪在肝脏中的沉积，减少了养殖鱼类脂肪肝发生的可能性。上述结果说明胆汁酸可有效地改善鱼类机体营养成分，减少肝脏中脂肪的沉积，预防脂肪肝的发生。

4　结　论

本试验条件下，饲料中添加胆汁酸能有效地提高齐口裂腹鱼幼鱼的饲料利用率，促进其生长，改善其形体指标，减少其肌肉及肝胰脏中脂肪的沉积。齐口裂腹鱼幼鱼的WGR、SGR、PER、FCR均与胆汁酸添加水平呈二次曲线关系，经二次回归分析可知，齐口裂腹鱼幼鱼饲料中胆汁酸的适宜添加水平为166.67～192.86 mg/kg。

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(责任编辑菅景颖)

, associate professor, E-mail: howlet@126.com

Effects of Bile Acid Supplemental Level on Growth Performance,Physical Indices and Body Composition of JuvenileSchizothoraxprenanti

ZHENG Zonglin1ZENG Benhe1,2XIANG Xiao1*ZHOU Xinghua1CHEN Jian1LYU Guangjun1ZHU Chengke1LI Daijin1REN Shengjie1

(1. Key Laboratory of Freshwater Fish Reproduction and Development, Ministry of Education, Key Laboratory of Aqucatic Science of Chongqing, Desect1ment of Fisheries in Rongchang Compust, Southwest University, Chongqing 402460, China; 2. Tibet Academy of Agricultural and Animal Husbandry Seiences,Fisheries Research Institute, Lasa 850000, China)

This experiment was conducted to study the effects of bile acid supplemental level on the growth performance, physical indices and body composition of juvenileSchizothoraxprenanti. A total of 360 healthy juvenileSchizothoraxprenantiwith the average body weight of (12.74±0.14) g were randomly divided into four groups with three replicates of 30 fish per replicate. Each group was fed a experimental diet containing either 0 (control group), 75, 150 or 300 mg/kg bile acid for 70 days. The results showed as follows: with bile acid supplemental level raising, the weight gain rate (WGR), specific growth rate(SGR), protein efficiency ratio (PER) had a trend of going up first and then leveled off. Conversely, the feed conversation ratio (FCR) was firstly decreased and then to stabilization. The WGR, SGR and PER in bile acid supplemental groups were significantly higher than those in control group (P<0.05), while the FCR in bile acid supplemental groups was significantly lower than that in control group (P<0.05). The WGR and SGR were all the highest (226.63% and 1.69%/d, respectively) when the bile acid supplemental level was 150 mg/kg, and the PER was the highest (1.64%) when the bile acid supplemental level was 300 mg/kg, while the FCR was the lowest (1.56) when the bile acid supplemental level was 75 mg/kg. Based on square regression analysis, the suitable bile acid supplemental level was 186.83, 192.86, 166.67 and 183.33 mg/kg, respectively, when WGR, SGR, PER and FCR of juvenileSchizothoraxprenantiwere optimum. With bile acid supplemental level raising, the condition factor (CF) was initially increased and then leveled off, the viscerasomatic index (VSI) and hepaticsomatic index (HSI) were initially increased and then decreased. The CF in bile acid supplemental groups was significantly higher than that in control group (P<0.05), while the VSI and HSI in bile acid supplemental groups were significantly lower than those in control group (P<0.05). The crude protein content of whole body and muscle was initially increased and then to stabilization with bile acid supplemental level raising, while the crude lipid content of whole body, muscle and hepatopancreas was initially decreased and then leveled off. There were no significant differences in moisture and crude ash contents of whole body and muscle with bile acid supplemental level raising (P>0.05). Results of above show that bile acid supplementation can improve feed efficiency, promote growth, improve physical indices and reduce fat deposition in muscle and liver of juvenileSchizothoraxprenanti. After comprehensive consideration, the suitable bile acid supplemental level in juvenileSchizothoraxprenantidiet is 166.67 to 192.86 mg/kg.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2016, 28(8)：2423-2430]

Schizothoraxprenanti; bile acid; growth performance; physical indices; body composition

10.3969/j.issn.1006-267x.2016.08.013

2016-02-04

重庆市基础与前沿研究计划项目(cstc2013jcyjA80033)；西南大学青年基金项目

郑宗林(1978—)，男，重庆荣昌人，副教授，博士，主要从事水产动物疾病控制与营养研究。E-mail： zhengzonglin@126.com

向枭，副教授，硕士生导师，E-mail： howlet@126.com

S963

A

1006-267X(2016)08-2423-08