饲粮铜含量对牦牛体外瘤胃发酵的影响

薛艳锋　郝力壮*　刘书杰*　柴沙驼　张晓卫　赵索南

(1.省部共建三江源生态与高原农牧业国家重点实验室，青海省高原放牧家畜动物营养与饲料科学重点实验室，青海高原牦牛研究中心，青海大学畜牧兽医科学院，西宁810016；2.海北州畜牧兽医科学研究所，海晏810200)



饲粮铜含量对牦牛体外瘤胃发酵的影响

薛艳锋1郝力壮1*刘书杰1*柴沙驼1张晓卫1赵索南2

(1.省部共建三江源生态与高原农牧业国家重点实验室，青海省高原放牧家畜动物营养与饲料科学重点实验室，青海高原牦牛研究中心，青海大学畜牧兽医科学院，西宁810016；2.海北州畜牧兽医科学研究所，海晏810200)

为了探究牦牛饲粮中微量元素铜的适宜含量，本试验以甘氨酸铜作为添加形式，以牦牛饲粮为底物进行体外瘤胃发酵，底物铜含量分别为5.0、10.0、15.0、20.0、25.0 mg/kg，共发酵48 h。测定发酵后的产气量、瘤胃发酵指标及消化酶活力。结果表明：当底物铜含量为15.0 mg/kg时，干物质消化率(DMD)，微生物蛋白质(MCP)、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸、总挥发性脂肪酸浓度，脂肪酶(LPS)、胰蛋白酶 (TYS)、纤维素酶(CLS)活力均达到最大值，分别为63.858%、4.289 g/L、24.475 mmol/L、0.470 mmol/L、8.977 mmol/L、1.159 mmol/L、1.607 mmol/L、81.583 mmol/L、0.504 U/mL、84.167 U/mL、79.956 U/mL，乙酸/丙酸最低为2.045；当铜含量为10.0 mg/kg时，MCP、乙酸浓度达到最大值，分别为4.289 g/L、51.075 mmol/L，且其他指标也都处于较高水平。综合得出，在体外条件下，牦牛饲粮推荐铜含量为10.0～15.0 mg/kg。

牦牛；甘氨酸铜；体外产气技术；消化酶活力；挥发性脂肪酸

牦牛作为环境条件极其恶劣(寒、旱、缺氧、强辐射)的青藏高原地区优势畜种，是当地牧民生存的物质基础和经济支柱[1-2]。但牦牛面临着寒冷的冬季和漫长的枯草期，不仅冬季掉膘严重，而且冻死、饿死的现象也屡见不鲜，严重制约着牦牛产业的发展，因此深入研究牦牛营养、制订饲养标准、合理补饲势在必行。关于牦牛能量[3]和蛋白质[4]营养方面已经有一定研究基础，但牦牛微量元素营养方面的研究基本上处于空白状态。

铜是动物机体所必需的微量元素之一[5]，参与造血和髓蛋白的合成[6-7]，促进骨和胶原的形成[8]，参与被毛色素沉积，增强机体免疫力[9-10]，促进家畜生长[11-12]。基础饲粮中铜往往处于缺乏状态，但添加过量又会影响牦牛消化代谢、生长繁殖和生产性能，甚至影响牦牛机体的健康状况。杨凤[6]指出动物饲粮中的微量元素铜、锰、碘、铁、锌处于临界缺乏状态，而实际生产中大多数以预混料的形式向动物饲粮中添加过量的微量元素复合物来满足动物的需求，这样虽然弥补了动物饲粮中微量元素的缺乏，起到了一定的积极作用，但却不能最大程度地发挥动物的生长性能。

杨红建[13]推荐肉牛饲粮中铜的添加量为10 mg/kg。Perry等[14]认为在较低的钼水平下，奶牛对铜的需要量为10～20 mg/kg。马长星[15]报道，体重在300～650 kg、妊娠250 d的青年母牛铜需要量为12～16 mg/kg。因此本试验以甘氨酸铜作为微量元素铜的添加形式，采用体外产气技术研究铜含量为5.0～25.0 mg/kg时对人工瘤胃发酵的影响，旨在筛选牦牛饲粮中微量元素铜的最适含量，为完善牦牛饲养标准和科学补饲提供参考。

1　材料与方法

1.1试验动物与饲养管理

本试验选择3头健康、体况接近、装有永久性瘤胃瘘管的成年阉牦牛作为瘤胃液供体动物。试验饲粮包括精料和粗料(燕麦青干草)，精粗比6∶4，单头饲喂，每日2次(08:00、18:00)，自由饮水。饲喂15 d之后，清晨空腹采集瘤胃液。

1.2体外产气的试验方法

清晨空腹采集3头牛的瘤胃液，混匀之后4层纱布过滤，参考Menke等[16]的方法配制人工瘤胃发酵液，通入二氧化碳达到厌氧状态，使用自动分液器分装到装有200 mg底物的培养管中(每管30 mL)，转入(39.0±0.5) ℃的人工瘤胃培养箱中进行培养，当培养至2、4、6、8、12、16、20、24、30、36、48 h各时间点时，取出培养管，快速读取活塞所处的刻度值(mL)并记录。发酵48 h结束后，将培养管转移到冰水浴中终止发酵。同时设定无发酵底物的空白管。现场测定发酵液pH和氨态氮(NH3-N)浓度，备份发酵液，冷冻保存，用于测定消化酶活力，微生物蛋白质(MCP)、挥发性脂肪酸(VFA)浓度，收集发酵残渣，105 ℃烘干12～24 h，测定干物质消化率(DMD)。

1.3试验设计

参考《肉牛饲养标准》(NY/T 815—2004)和《牦牛营养研究论文集》[2]，按照150 kg牦牛日增重500 g设计牦牛基础饲粮的精料配方，以燕麦青干草作为粗料，精粗比6:4配制发酵底物。本试验采用单因素试验设计，共5个处理，每个处理设3个重复。首先通过原子吸收分光光度计测定发酵底物中铜的含量为4.395 mg/kg，然后在5个处理的发酵底物中以甘氨酸铜(含铜量20%)的形式分别添加0.605、5.605、10.605、15.605、20.605 mg/kg的铜，从而使5个处理中铜的总含量分别达到5.0、10.0、15.0、20.0、25.0 mg/kg。采用体外发酵技术研究不同铜含量对牦牛瘤胃发酵的影响。

1.4测定指标与方法

1.4.1铜含量

铜含量参考GB/T 13885—2003[17]，使用北京普析TAS-990 AFG型原子吸收分光光度计，采用火焰法测定。本试验所做出的铜含量标准曲线拟和公式为：

Abs=0.100 30Conc+0.000 466 67

(r=0.999 9，n=4)。

式中：Conc为铜含量(μg/mL)；Abs为吸光度值，波长为324.8 nm。

1.4.2产气量、产气速率和DMD

根据各时间点记录的产气量计算总产气量、甲烷产量和产气速率。

总产气量(mL)=试验管总产气量-

空白管总产气量;

甲烷产量(mL)=总产气量×甲烷所占百分比;

产气速率(mL/h)=阶段产气量/时间间隔。

DMD(%)={[样本干物质(DM)重-

残渣DM重+空白管DM重]/

样本DM重}×100。

1.4.3pH和NH3-N、MCP浓度

pH采用HANNA HI221型台式酸度计测定。

NH3-N浓度采用冯宗慈等[18]改进的比色法测定；本试验所作出的NH3-N浓度标准曲线拟和公式为：

Y=0.043 1X+0.024 1(r=0.995，n=5)。

式中：Y为NH3-N浓度(mg/dL)，X为吸光度值，波长为625.0 nm。

MCP浓度测定采用南京建成生物工程研究所提供的试剂盒进行测定。

测定原理：蛋白质分子中的肽键(—CONH—)能与碱性铜溶液作用，发生双缩脲反应，形成紫色复合物，因此可以测定显色反应后溶液的吸光度值(波长为540 nm)，计算溶液中蛋白质的浓度。

双缩脲试剂的配制：将试剂1中的粉剂加超纯水稀释到100 mL，试剂2中的粉剂加超纯水稀释到200 mL，然后将稀释后的试剂1、试剂2按照1∶2的比例配成双缩脲试剂，4 ℃保存。操作方法：准确吸取发酵液0.20 mL，加入0.80 mL的生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆，制成20%的匀浆液，在2 500 r/min的条件下离心10 min，取上清液50 μL进行测定；具体操作步骤见表1。使用TU-1810紫外可见分光光度计(提前预热30 min)在波长540 nm处测定各管吸光度值，比色皿光径1 cm，超纯水调零。

MCP计算公式如下：

MCP(g/L)=(Am-AK)/(As-Ak)×Ck×w。

式中：Am为测定管吸光度值；AK为空白管吸光度值；AVs为标准管吸光度值；Ck为蛋白质标准品浓度56.3 g/L；w为稀释倍数。

表1　双缩脲反应操作流程

1.4.4VFA浓度

VFA浓度测定参考相关文献[19-20]，对样品进行前处理。发酵瘤胃液经4层纱布过滤后，取5 mL于干净的离心管中，3 000 r/min离心10 min，取上清液2 mL于Tube管中，准确加入0.2 mL、25%的偏磷酸溶液，混匀之后，静置10 min充分反应后，在12 000 r/min、4 ℃的条件下离心10 min，转移上清到新的Tube管中，-80 ℃冻存，备用。

VFA的测定方法：用岛津2014气相色谱仪分析。测定条件：FID检测器，色谱柱为毛细管柱(30 m×0.32 mm×0.5 μm)；色谱柱升温程序，初始60 ℃，以10 ℃/min升温至120 ℃，保留2 min，以15 ℃/min升温至180 ℃，保留5 min；汽化温度250 ℃；检测温度250 ℃；进样量：1 μL，载气为高纯氮气(99.99 %)，压力0.7 MPa，检测器氢气压力0.4 MPa，空气压力0.4 MPa，毛细管柱压力0.6～0.8 MPa，分流比40。得到标准曲线见表2。

表2　VFA浓度计算标准曲线

标准曲线中：Y为进样的峰面积；X为组分浓度(mmol/L)。

In standard curves:Ywas peak area of the sample;Xwas the concentration of the fraction(mmol/L).

1.4.5消化酶活力

淀粉酶(AMS)、脂肪酶(LPS)、胰蛋白酶(TYS)、纤维素酶(CLS)活力测定采用南京建成生物工程研究所提供的试剂盒进行测定。活力单位定义：每毫升含酶溶液在37 ℃下与底物作用30 min，水解10 mg淀粉定义为1个AMS活力单位；每毫升含酶溶液在37 ℃下与底物作用1 min，每消耗1 μmol底物为1个LPS活力单位；每毫升含酶溶液在37 ℃、pH=8.0的条件下，每分钟使反应体系的吸光度值(波长为253 nm)变化0.003即为1个TYS活力单位；每毫升含酶溶液每分钟催化产生1 μg葡萄糖定义为1个CLS活力单位。

1.5统计分析

试验数据采用SAS 9.0软件的ANOVA程序进行单因素方差分析，Duncan氏法进行多重比较，P<0.05为差异显著，各组试验数据以“平均值±标准差”表示。

2　结果与分析

2.1产气量、产气速率和DMD

从表3中可以看出，以甘氨酸铜作为添加剂时，随着铜含量的升高，瘤胃发酵总产气量呈现出先上升后达到稳定的趋势，铜含量在10.0～20.0 mg/kg时，总产气量处于稳定状态，在75.0 mL左右波动，只有铜含量达到25.0 mg/kg时的总产气量显著高于铜含量为5.0 mg/kg时(P<0.05)，其他各组之间总产气量差异均不显著(P>0.05)。随着铜含量的升高，甲烷产量呈现先上升后下降的趋势，在铜含量为10.0 mg/kg时达到最大值10.54 mL，显著高于铜含量为5.0、20.0、25.0 mg/kg时(P<0.05)，但与铜含量为15.0 mg/kg时的甲烷产量10.42 mL之间差异不显著(P>0.05)。随着铜含量的升高，DMD出现先上升后下降的趋势，当铜的含量为15.0 mg/kg时，DMD达到最大值63.858%，并且显著高于铜含量为5.0和25.0 mg/kg时(P<0.05)。

表3　底物铜含量对体外瘤胃发酵产气量和DMD的影响

同行数据肩标不同字母表示差异显著(P<0.05)，相同字母表示差异不显著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same letter superscripts mean no significant different (P>0.05). The same as below.

从图1中可以看出，随着发酵时间的延长，5组的产气速率都出现先上升后下降的趋势，最后产气速率趋近于0，在5～9 h之间产气速率达到最大值，呈现单峰形状。

图1　底物铜含量对体外瘤胃发酵产气速率的影响

2.2pH和NH3-N、MCP浓度

从表4中可以看出，以甘氨酸铜作为添加剂时，随着铜含量的升高，体外发酵后pH呈现先上升后下降的趋势，铜含量在10.0～15.0 mg/kg时，pH达到稳定趋势，并且显著高于铜含量为5.0 mg/kg时(P<0.05)。各组体外发酵后pH处于6.71～7.16之间，都属于牦牛瘤胃液pH正常范围之内。随着铜含量的升高，体外发酵后的NH3-N浓度出现先稳定后降低的趋势，当铜的含量在5.0～15.0 mg/kg时NH3-N浓度处于稳定居高的状态，都在10.00 mg/dL之上，当铜的含量在20.0～25.0 mg/kg时NH3-N浓度略低，在10.00 mg/dL之下。铜含量为5.0 mg/kg时NH3-N浓度显著高于铜含量为20.0和25.0 mg/kg时(P<0.05)。随着铜含量的升高，体外发酵后MCP浓度出现先升高后降低的趋势，在铜含量为10.0～15.0 mg/kg时达到稳定状态，都为4.289 g/L，显著高于铜含量为5.0 mg/kg时的MCP浓度(P<0.05)。

2.3VFA浓度

从表5中可以看出，以甘氨酸铜作为添加剂时，随着铜含量的升高，发酵后乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸、总挥发性脂肪酸(TVFA)的浓度都出现先上升后下降的趋势。乙酸的浓度在铜含量为10.0 mg/kg的时候达到最大值51.075 mmol/L；丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸、TVFA的浓度都在铜含量为15.0 mg/kg的时候达到最大值，分别为24.475、0.470、8.977、1.159、1.607、81.583 mmol/L。乙酸/丙酸出现先下降后上升的趋势，在铜含量为15.0 mg/kg的时候达到最小值2.045。当铜含量为10.0 mg/kg时，体外发酵后乙酸浓度显著高于铜含量为5.0和25.0 mg/kg时(P<0.05)；当铜含量为15.0 mg/kg时，体外发酵后丙酸浓度显著高于其他所有组(P<0.05)，铜含量为10.0 mg/kg时，体外发酵后丙酸浓度显著高于铜含量为5.0和25.0 mg/kg时(P<0.05)；当铜含量为10.0和15.0 mg/kg时，体外发酵后异丁酸浓度差异不显著(P>0.05)，但显著高于其他各组(P<0.05)；当铜含量为10.0和15.0 mg/kg时，体外发酵后丁酸浓度都显著高于其他各组(P<0.05)，且这2组之间差异显著(P<0.05)；当铜含量为10.0和15.0 mg/kg时，体外发酵后异戊酸浓度都显著高于其他各组(P<0.05)，这2组之间差异不显著(P>0.05)；当铜含量为10.0和15.0 mg/kg时，体外发酵后戊酸浓度都显著高于其他各组(P<0.05)，且这2组之间差异显著(P<0.05)；当铜含量为10.0和15.0 mg/kg时，体外发酵后TVFA浓度都显著高于铜含量为5.0和25.0 mg/kg时(P<0.05)，这2组之间差异不显著(P>0.05)；当铜含量为15.0 mg/kg时，体外发酵后乙酸/丙酸显著低于铜含量为5.0、10.0、20.0 mg/kg时(P<0.05)。

表4　底物铜含量对体外瘤胃发酵pH和NH3-N、MCP浓度的影响

表5　底物铜含量对体外瘤胃发酵VFA浓度的影响

2.4消化酶活力

从表6中可以看出，随着铜含量升高，体外发酵后AMS活力出现先保持较高水平后下降再上升的趋势，LPS、TYS和CLS活力都出现先升高后降低的趋势。AMS活力在铜含量为5.0 mg/kg时达到最大值0.531 U/mL，但与铜含量为10.0、25.0 mg/kg时差异不显著(P>0.05)，这3组显著高于其他2组(P<0.05)；当铜含量为15.0 mg/kg时，LPS活力达到最大值0.504 U/mL，显著高于其他所有组(P<0.05)；当铜含量为15.0 mg/kg时，TYS活力达到最大值84.167 U/mL，显著高于铜含量为5.0、20.0、25.0 mg/kg时(P<0.05)，但与铜含量为10.0 mg/kg时差异不显著(P>0.05)；当铜含量为15.0 mg/kg时，CLS活力达到最大值79.956 U/mL，与铜含量为25.0 mg/kg时差异不显著，且这2组都显著高于铜含量为5.0 mg/kg时(P<0.05)。

表6　底物铜含量对体外瘤胃发酵消化酶活力的影响

3　讨　论

瘤胃气体发酵产物主要包括二氧化碳、甲烷、氢气、VFA等[21]，来源于饲粮中有机物质的降解，总产气量的多少反映饲粮的降解程度[22]，产气量越高，表明饲粮发酵越充分，为机体提供的能量越多，越有利于动物的生长。本试验中总产气量和甲烷产量随着底物铜含量的升高而增加，由此可见，添加甘氨酸铜有利于瘤胃发酵。产气速率出现先上升后下降的单峰趋势，这是由于发酵初期，发酵底物中的可溶性糖等成分易于被微生物所利用，迅速产生气体，随着发酵时间的延长，可发酵成分越来越少，产气速率也慢慢降低，最终趋近于0。pH是瘤胃发酵的综合反映，受发酵底物类型、有机酸沉淀等各种因素的影响[23]，只有当pH处于正常范围之内，才能够保证瘤胃发酵、饲料降解的正常进行。本试验不同铜含量下体外发酵后的pH都在反刍动物瘤胃液pH正常范围5.6～7.5之内。

DMD直接反映饲粮在瘤胃中的降解程度，本试验中，随着铜含量的提高，DMD先增大后减小，在铜含量为15.0 mg/kg的时候达到最大值63.858%，由此可见铜含量15.0 mg/kg最有利于饲料的降解。这与瘤胃消化道酶活力的测定结果基本吻合，其中LPS、TYS和CLS 3种消化酶的活力都在铜含量为15.0 mg/kg的时候达到最大值。只有AMS的活力出现了先降低后升高的趋势，并且DMD在铜含量为10.0 mg/kg的时候也处于较高水平。因此从瘤胃消化酶活力和DMD的角度看，当铜的含量在10.0～15.0 mg/kg的时候，最有利于饲粮的降解。本试验中所测定的牦牛瘤胃消化酶活力与张海涛等[24]测定的犊牛瘤胃内AMS活力0.29～1.74 U/mL，刘彩娟等[25]测定的奶牛瘤胃中CLS活力71.43～99.05 U/m，Moharrery等[26]测定的奶牛十二指肠中AMS活力0.70～31.99 U/mL、LPS活力0.15～0.81 U/mL都基本上处于同一水平；只有TYS活力远高于Moharrery等[26]测定的奶牛十二指肠中TYS活力5.55～11.42 U/mL、王杰[27]测定的羊瘤胃中TYS活力18.09～24.56 U/mL，而达到32.713～84.167 U/mL。Goodrich等[28]给瘤胃液中添加不同含量的铜进行体外培养的试验表明，铜对纤维素的降解有很大的促进作用。Saxena等[29]的研究也表明，饲粮中添加铜可以促进瘤胃微生物对纤维素的降解作用，而本试验中添加铜也显著提高了牦牛瘤胃体外发酵后CLS活力，这将对瘤胃微生物降解纤维素起到积极的作用。

NH3-N来源于饲粮中蛋白质的降解，主要用于微生物合成MCP[30]，在瘤胃中基本处于动态平衡。本试验中5组的NH3-N浓度都处于正常范围0.35～29.0 mg/dL[31-32]之内，并且随着铜含量的提高，NH3-N浓度出现降低的趋势，但当铜含量在10.0～15.0 mg/kg的时候，NH3-N浓度还处于整体较高值。MCP提供了反刍动物机体40%～60%的蛋白质需要量，随着铜含量的提高，MCP浓度出现先升高后降低的趋势，且在铜含量为10.0～15.0 mg/kg的时候达到最大值。由此可见，铜含量为10.0～15.0 mg/kg的时候，最有利于NH3-N和MCP的形成。当铜含量较低的时候，可能是由于微生物合成MCP的能力较弱，从而使MCP浓度处于较低水平，并且也导致NH3-N转化成MCP的反应受到抑制，从而使NH3-N浓度处于较高的水平。

VFA是反刍动物重要的能量物质，提供了反刍动物60%～80%的消化能[33-34]。本试验中丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸、TVFA的浓度都在铜含量为15.0 mg/kg的时候达到最大值，乙酸的浓度在铜含量为10.0 mg/kg的时候达到最大值。同时，对于反刍动物来说，动物机体所需要的能量主要来源于肝脏组织糖异生作用产生的葡萄糖，而丙酸是糖异生作用的重要前体物质，是一种高效酸，乙酸/丙酸越低，表明丙酸所占比例也越大，越利于反刍动物的生长，本试验中乙酸/丙酸的比例在铜含量为15.0 mg/kg的时候达到最低值。由此可见，铜含量为10.0～15.0 mg/kg的时候，最有利于能量物质的生成，最有利于牦牛的生长。

4　结　论

综上所述，体外条件下，对于生长期牦牛，若以甘氨酸铜作为铜元素的添加形式，牦牛饲粮铜含量在10.0～15.0 mg/kg时，有利于瘤胃发酵和饲粮降解。而本试验牦牛饲粮中的微量元素铜的基础含量只有4.395 mg/kg，远低于牦牛对铜的需要量10.0～15.0 mg/kg，处于极度缺乏状态，必须额外补充微量元素铜，才能更大限度地改善牦牛瘤胃发酵，提高生长性能。

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(责任编辑王智航)

s: HAO Lizhuang, associate professor, E-mail： lizhuanghao1122@foxmail.com; LIU Shujie， professor, E-mail： mkylshj@126.com

Effects of Dietary Copper Content on Rumen Fermentation of YaksinVitro

XUE Yanfeng1HAO Lizhuang1*LIU Shujie1*CHAI Shatuo1ZHANG Xiaowei1ZHAO Suonan2

(1. State Key Laboratory of Plateau Ecology and Agriculture, Key Laboratory of Plateau Grazing Animal Nutrition and Feed Science of Qinghai Province, Qinghai Plateau Yak Research Center, Qinghai Academy of Science and Veterinary Medicine of Qinghai University, Xining 810016, China; 2. Academy of Science and Veterinary Medicine of Haibei Prefecture, Haiyan 810200, China)

To find an optimal content of copper in diet for yaks, cupric glycinate was used as additive, and diet for yaks was used as a substrate forinvitrorumen fermentation in the present study. Copper contents in substrates were designed as 5.0, 10.0, 15.0, 20.0, 25.0 mg/kg, respectively. The fermentation lasted for 48 h. After fermentation, gas production, rumen fermentation parameters and digestive enzyme activities were measured. The results showed as follows: when the content of copper in substrate was 15.0 mg/kg, dry matter digestibility (DMD), the concentrations of microbial protein (MCP), propionic acid, isobutyric acid, butyric acid, isovaloric acid, valeric acid and total volatile fatty acids, as well as the activities of lipidase, trypsinase , cellulase reached the highest, which were 63.858 %, 4.289 g/L, 24.475 mmol/L, 0.470 mmol/L, 8.977 mmol/L, 1.159 mmol/L, 1.607 mmol/L, 81.583 mmol/L, 0.504 U/mL, 84.167 U/mL and 79.956 U/mL, respectively; when the content of copper in substrate was 10.0 mg/kg, acetic acid/propionic acid reached the lowest, which was 2.045; when the content of copper was 10.0 mg/kg, MCP and acetic acid concentrations reached the highest, which were 4.289 g/L and 51.075 mmol/L, respectively, and the values of other indexes were also on high level. Therefore, underinvitroconditions, the copper content recommended in yak’s diet is between 10.0 and 15.0 mg/kg.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2016, 28(8)：2599-2606]

yak; cupric glycinate;invitrogas production technique; digestive enzyme activity; volatile fatty acid

10.3969/j.issn.1006-267x.2016.08.033

2016-02-27

“973”国家重点基础研究发展计划项目(2012CB722906)；“十二五”国家科技支撑计划项目(2012BAD13B01)；国家国际科技合作专项项目(2015DFG31870)；公益性行业(农业)科研专项(201203008)；教育部长江学者和创新团队发展计划项目(IRT13074)；青海省重大科技平台建设项目(2013-Z-Y03)

薛艳锋(1990—)，男，河南南阳人，硕士研究生，研究方向为动物营养与饲料科学。E-mail： 945982845@qq.com

郝力壮，副研究员，E-mail： lizhuanghao1122@foxmail.com；刘书杰，研究员，硕士生导师，E-mail： mkylshj@126.com

S823

A

1006-267X(2016)08-2599-08