重症脑瘫儿童外周血中微量营养元素和氧化应激状态的改变及意义

汤有才

郑州大学第五附属医院儿童康复医学科　郑州　450052



重症脑瘫儿童外周血中微量营养元素和氧化应激状态的改变及意义

汤有才

郑州大学第五附属医院儿童康复医学科郑州450052

目的检测重症脑瘫儿童外周血中微量元素和氧化应激状态的改变，探讨其临床意义。方法根据世界卫生组织的诊断标准，选取重症脑瘫患儿和年龄匹配的健康儿童各20例，抽取空腹血，分离血浆和红细胞。按照相应试剂盒提供的方法分别检测GSH、GSSG、LPO、ROS和SOD的氧化应激指标以及微量元素水平并进行统计学分析。结果重症脑瘫儿童外周血中氧化应激指标明显高于健康儿童组，微量元素则明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。结论微量元素和氧化应激损伤参与了儿童重症脑瘫的发病，加强营养管理可改变患儿的氧化应激，可能有利于脑瘫的康复治疗。

重症脑瘫儿童；微量营养元素；氧化应激状态

脑性瘫痪(CP)是由于发育中的胎儿或婴幼儿脑部非进行性损伤所致的一组持续存在的中枢性运动和姿势发育障碍、活动受限症候群。由于非自愿的肌肉痉挛和僵直影响吞咽困难，脑瘫患儿常有喂养困难[1]，导致营养包括微量元素等的摄入障碍，并严重影响患儿的健康[2]。许多微营养缺乏，如铁、钙、铜、锌、叶酸，维生素A、B6、B12、C和D，可抑制针对入侵病原的特异性抗体的形成，且作为抗氧化剂的成分利于自由基的清除[3]。我们推测，微量元素缺乏和氧化应激状态的改变可能参与了小儿脑瘫的发病。本文的目的是检测脑瘫患儿外周血中微量元素水平和氧化应激状态的改变并探讨其临床意义。

1　资料与方法

1．1临床资料儿童脑瘫20例，年龄 3～11岁(7.6±2.5岁)均为郑州大学第五附属医院自2014—2016年在儿童康复科住院的重型患儿。对照组20例，年龄匹配，发育正常的健康儿童，平均(7.3±2)岁，为幼儿园健康志愿者，与家长签署知情同意书。

1．2收入标准本研究收入的病例均为重症脑瘫患儿，如5岁以前不能行走但能够爬或滚；不能握物但能扶物或丧失有作用的运动功能者。

1．3排除标准排除特殊的慢性疾病，如肾、心或代谢性疾病及胃切除者等。

1．4检测GSH和GSSG的水平试剂盒购于Cayman Chemical(美国)。收集受试者空腹血标本，分离红细胞用于测谷胱甘肽(GSH，pmol/mg Hb)和氧化型谷胱甘肽(GSSG，pmol/mg Hb)，按照公司提供的说明书的方法进行。

1．5检测LPO的水平过氧化物酶(LPO，U/ mg Hb)检测试剂盒购置于上海盈公生物技术有限公司，按公司提供的说明书的方法进行检测。

1．6检测ROS的水平收集受试者空腹血标本，分离血浆用于测ROS(nmol/mg Hb)，通过分析dichlorofluorescein荧光的方法检测ROS水平。

1．7检测SOD(U/mg Hb)的活性水平SOD的活性用Rice-Evans C等的方法[4]，稍加改良。

1．8血清微量元素检测抽取空腹血，分离血浆检测血红蛋白(Hb，g/L)、铁(SI，μmol/L)、钙(Ca2+，mmol/L)、铜(Cu2+，μmol/L)和锌(Zn2+，μmol/L)的浓度。

1．9统计学分析使用微软办公软件Excel 2007(微软公司，Redmond，WA)，通过方差分析(ANOVA)比较组间的平均值。P<0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2．1氧化应激指标检测结果显示，与同龄健康儿童比较，重症脑瘫儿童外周血中氧化应激指标明显增高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1　重症脑瘫患儿外周血氧化应激指标

注：GSH：谷胱甘肽；GSSG：氧化型谷胱甘肽；LPO：过氧化物酶；ROS：活性氧；SOD：超氧化物岐化酶

2．2微量元素指标检测另外，我们对重症脑瘫儿童外周血中常用微量元素指标也进行了检测，与同龄健康儿童比较，指标明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2　重症脑瘫患儿外周血微量元素指标

注：Hb：血红蛋白；Fe2+：铁离子；Ca2+：钙离子；Zn2+：锌离子；Cu2+：铜离子

3　讨论

脑性瘫痪临床表现轻重不一，但目前还没有一个很精确的描述程度的标准，世界卫生组织将运动障碍程度分为4级，本研究收入的均为3～4级运动障碍者，属于重型小儿脑瘫。本文对重型小儿脑瘫和健康儿童间的氧化应激(oxidative stress)状态进行了研究，结果显示，微量元素明显降低，氧化应激明显失衡，CP组明显高于对照组。

氧化应激是指机体的氧化还原平衡被打破，使内环境倾向于氧化状态，导致中性粒细胞的炎性浸润，并产生大量的氧化中间产物，是自由基对机体的一种负面调节，被认为是导致衰老和多种疾病的重要因素。氧化应激反应在许多疾病中发挥重要作用，参与疾病的发病过程。如允许这种情况长时间存在，势必引起细胞功能的损害，一旦损害形成就不再被正常的代偿机制修复[5]。

营养与氧化应激之间的关系是双重的，营养素在代谢过程中可产生自由基和活性氧，而金属微量元素，如铜离子和铁离子，反过来促进生成活性氧。另外，合理的营养膳食可提高机体的抗氧化能力。SOD一种很重要的金属酶，可以保护脂质细胞膜免受氧化损害。在红细胞内，SOD依赖铜并因此用作铜缺乏的指标。大宗病例研究显示过多摄入微量元素，如铁和锌，可影响铜的吸收和(或)代谢[6]，并因此导致铜缺乏。

考虑到本文列举的结果，需要进一步研究导致重症脑瘫儿童外周血中氧化应激增高的具体机制。我们认为某些微量元素缺乏可能是导致重症脑瘫儿童外周血中氧化应激增高的原因之一。良好的营养管理有利于维持微量元素的稳定，进而减少由于微量元素缺乏导致的氧化应激损伤，促进脑瘫儿童的康复。

[1]Rosenbaum P．The natural history of gross motor development in children with cerebral palsy aged 1 to 15 years[J]．Dev Med Child Neurol，2007，49(10)：724．

[2]Strauss DJ，Shavelle RM，Reynolds RD，et al．Survival in cerebral palsy in the last 20 years：signs of improvement?[J]．Dev Med Child Neurol，2007，49(2)：86-92．

[3]Prasad AS，Beck FW，Bao B，et al．Zinc supplementation decreases incidence of infections in the elderly：effect of zinc on generation of cytokines and oxidative stress[J]．Am J Clin Nutr，2007，85(3)：837-844．

[4]Rice-Evans C，Miller NJ．Total antioxidant status in plasma and body fluids[J]．Methods Enzymol，1994，234(1)：279-293．

[5]Jackson AA．Severe malnutrition．In：Warrell DA，Cox TM，Firth JD，eds．Oxford Textbook of Medicine[M]．4th ed．New York：Oxford University Press，2003：1 580．

[6]Schoendorfer NC，Tinggi U，Sharp N，Boyd R，Vitetta L，Davies PSW．Micronutrient intakes in enterally and orally fed children with severe cerebral palsy[J]．e-SPEN，2011，6(1)：e259-e262．

(收稿2016-01-12)

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1673-5110(2016)18-0093-02