不同来源板蓝根种子质量比较△

王兴政，杜弢，王富胜，潘晓春

(1.甘肃省定西市农业科学研究院，甘肃 定西 743000；2.甘肃中医药大学，甘肃 兰州 730000)

不同来源板蓝根种子质量比较△

王兴政1*，杜弢2，王富胜1，潘晓春1

(1.甘肃省定西市农业科学研究院，甘肃 定西743000；2.甘肃中医药大学，甘肃 兰州730000)

目的：比较不同来源板蓝根种子质量，从而制定板蓝根种子的质量分级标准。方法：通过测定不同种质材料的板蓝根种子净度、种形指数、千粒重、含水量、生活力、发芽率，观察种子的外部特征，使用SPSS19.0软件，利用聚类分析方法，初步制订出板蓝根种子的质量分级标准。结果：板蓝根一级种子饱满、有紫色光泽、长宽比小、大小均匀、干燥、无杂质，净度≥88.3%，种形指数2.5～3.8之间，千粒重≥9.0g，含水量≦8%，生活力≥93%，发芽率≥90%；二级种子较饱满、略有光泽、大小较均匀、有少许瘪粒及杂质，净度在74.3%～88.3%之间，种形指数3.8～4.1之间，千粒重6.5～9g之间，含水量8～8.5%之间，生活力83.3～93%之间，发芽率70～90%之间；三级种子干瘪、瘦小、大小不均匀、有不少杂质，净度≦74.3%，种形指数﹥4.1，千粒重﹤6.5g，含水量≥8.5%，生活力﹤83.3%，发芽率≦70%。结论：初步制定出了板蓝根种子品质检验与分级质量标准。

板蓝根；种子；品质检验；质量标准

板蓝根是常用大宗中药材之一，又名靛青根、蓝靛根、大青根，根据《中华人民共和国药典》2010版，本品为十字花科植物菘蓝IsatisindigoticaFort.的干燥根[1]。板蓝根在临床上用途较广，除板蓝根注射液外，主要常与其它中药组成复方广泛用于治疗多种疾病如流感、腮腺炎、乙脑、肝炎，是公认的有较好抗病毒效果的少数中药之一。目前，绝大部分中药材种子还没有相应的种子检验规程和质量标准，导致中药材种子市场混乱，种子质量良莠不齐，使种植户蒙受损失。开展中药材种子质量检验标准研究，制定种子质量标准和检验规程，是推进中药材规范化种植工作的一项重要内容[2]。

为规范板蓝根种子检验标准和稳定其药材质量，笔者等对板蓝根种子净度、千粒重、含水量、生活力及发芽率等主要品质检验指标进行测定[3-4]，经过研究初步制定了种子品质检验及质量分级标准。

1 仪器与试剂

1.1仪器

GHP-9162电热恒温培养箱(上海金扬州慧科电子有限公司)，GZX-GF-MBS电热恒温鼓风干燥箱(上海跃进医疗器械有限公司)。

1.2试剂

pH6.8磷酸缓冲液(青岛高科园海博生物技术有限公司)，2，3，5-氯化三苯基四氮唑(TTC)(青岛高科园海博生物技术有限公司)，高锰酸钾(国药集团化学试剂有限公司)。

2 材料与方法

2.1材料

供试种子共计30份，收集于甘肃省定西市各县区和河北安国、安徽亳州等地，其中定西市农科院自有材料22份。所有种质材料经定西市农科院刘效瑞研究员鉴定为十字花科植物菘蓝的种子，样品具体来源和编号详见表1。

表1 板蓝根种质材料

2.2方法

2.2.1扦样 将整堆种子均匀混合后分成2半，每一半再对分1次，得到4个部分。在将每个部分减半分成8个部分，排成2行，每行4个部分；合并和保留交错部分，如将第1行的1、3部分和第2行的2、4部分合并，把其它的4部分拿开；将所得的合并作为试样样本。重复取样直至分至所需的样品重量为止。但重复样品需独立分取，在分取第1份试样后，第2份试样或半试样须将送检样品一分为二的另一部分中分取[5]。

2.2.2净度分析 将样品放在净度分析台上，将试样分离成干净种子和一般杂质2种成分后分别称重，计算。

2.2.3种子形态 取板蓝根净种子，每个批号100粒，用游标卡尺测量种子的长和宽。

2.2.4重量测定 采取千粒法测定板蓝根种子重量。将净度分析后的纯净种子用四分法分成4份，从每份中取250粒，共1000粒为1组，重复3次，称重计算平均值。

2.2.5含水量测定 采用高恒温烘干法。先将称量瓶于105℃下烘干至恒重然后称重；再将各个样品放入预先恒重的称重瓶内，称重。然后打开瓶盖，放入预热至145℃的烘箱内关好箱门，保持温度130℃。分别于1h、2h、3h和4h后取出，盖上盖子置于干燥器内冷却后取出称重。

2.2.6种子生活力测定TTC溶液的配制：用pH6.8的磷酸缓冲溶液将2，3，5-氯化三苯基四氮唑(TTC)配成0.5%的溶液，装在棕色瓶中避光保存。染色前的预处理：将种子浸入清水中浸泡24h，除去不饱满的种子，用刀片纵切成两瓣，使胚1/2等分。在其他因子保持一致的条件下，染色1h，2h，3h，4h，5h后测定板蓝根种子生活力。

2.2.7发芽试验 种子预处理：将种子用0.2%高锰酸钾消毒10min后，冲洗干净。

温度处理：将同一批净种子中采用四分法取100粒浸泡约24h、冲洗后置于滤纸铺垫的培养皿发芽床上，每盘30粒，1次重复，分别置于10℃、15℃、20℃和25℃无光照培养。每日统计发芽情况，同时补充水分。

记录：发芽开始后，每天记录萌发的正常幼苗数直至无萌发种子出现为止。试验过程中出现的严重霉烂的种子随时拣出并加以记录。发芽标准以突破种皮的胚轴长度到达真种子自身的长度为发芽。相关指标的计算公式如下：

n为最终达到的正常发芽粒数；N为供试种子数。

3 结果与分析

3.1种子形态

板蓝根种子为角果，扁平翅状，中部有明显脊线，种皮褐色或紫色，稍有光泽。

3.2不同板蓝根种质材料净度分析

从表2可知，板蓝根种子的净度在56.4～91.78%之间，以样品BLG2012-13净度最高，达到91.78%，样品北京板蓝根种子净度最低，只有56.4%。

表2 不同种质材料板蓝根种子净度

3.3不同板蓝根种质材料种子形态和千粒重

经测定，板蓝根种子长度为1.26～1.87cm，宽度为0.16～0.50cm，种形指数(长宽比)为2.51～9.44(表3)。种子千粒重是种子活力指标之一，是指种子充实饱满的程度。种子充实饱满表明种子中储藏物质丰富，有利于种子发芽和幼苗生长。从表4中可知板蓝根种子的千粒重为5.21～13.77g，18号样品种子较大，故千粒重达到13.77g，而29号样品种子较小，皱缩严重，千粒重仅为5.21g。经方差分析，不同种质材料的千粒重差异之间极显著。

表3 不同种质材料板蓝根种子的形态值

3.4含水量测定

用130℃对2份板蓝根种质材料测定含水量，由图1可知高温法烘干4h后含水量不发生明显变化，故最终使用130℃高温法烘干4h测定板蓝根种子含水量。不同种质材料板蓝根种子的含水量在7.64～9.56%之间，见表6。

表4 不同种质材料板蓝根种子千粒重

注：差异显著性分析取A=0.01水平，数值后字母不同者为具有显著性差异(表4，5，7，8同)。

图1 130 ℃高温法不同烘干时间下板蓝根种子含水量

3.5生活力测定

根据观测，种子最后染色时间为染色4h，大于4h种子染色程度会加深而染色比例不变；染色5h后，随着时间的增加染色程度不变。5h染色程度差异见图2。故取5h为测定时间测定不同种质材料生活力。不同种质材料种子生活力相差较大，5份种质材料生活力达到100%，6份种质材料生活力低于70%，最低的只有40%(表5)。无活力种子、活力较弱种子、高活力种子染色程度区别见图3，随着种子活力的增加，染色的程度开始加深，按染色程度可相应划分为灰褐色、浅红色、深红色。

表5 不同种质材料板蓝根种子含水量、生活力和发芽率 (%)

3.6发芽率测定

根据测定，板蓝根种子10℃时活性受到抑制，没有发芽的种子，随着温度的增加，发芽率逐渐上升，25℃达到最高，因此以25℃为板蓝根种子的最适温度(图2)。从板蓝根种子的发芽趋势来看，板蓝根种子的发芽主要集中在第5～12d(图3)，第12d后再无发芽的种子，因此可将第5d作为初次计数时间，第12d作为末次计数时间，发芽高峰期在5～8d。不同种质材料板蓝根种子发芽率相差较大(表5)。其中处理5的种子发芽率达到了96%，最低为处理15，发芽率为4%，发芽率差值为92%。

图2 染色5 h后的种子

图3 不同活力的种子染色区别

图4 不同种质材料在不同温度下的发芽率

图5 25 ℃时不同发芽天数下的种子发芽率

4 小结与讨论

由实验结果可知，不同种质材料的板蓝根种子质量存在较大差距。在分级的6项指标中，发芽率最为重要，发芽率对种子来说相对固定，可相对反映出种子的田间出苗率；生活力反映了种子的活力高低；千粒重反映了种子饱满程度和营养物含量；种形指数也从直观上反映了种子的饱满程度；净度和水分受人为和储藏条件的影响较大，可通过对种子的初加工与储藏来提高种子质量。在种子检测环节中，含水量的测定应采用130℃高温法烘干4h；生活力的测定可取5h为测定时间，随着种子活力的增加，染色的程度开始加深；在种子发芽率的测定中，25℃为板蓝根种子发芽的最适温度，可将第5d作为初次计数时间，第12d作为末次计数时间。为了对市场上的板蓝根种子质量进行检验和有效控制，加快制定板蓝根种子质量控制标准非常必要。在标准的制定中需要结合药用植物种子自身特征进行研究，笔者等以板蓝根种子净度、千粒重、种形指数、水分、生活力和发芽率6项指标为主要依据，初步制定了板蓝根种子质量的分级标准：板蓝根一级种子饱满、有紫色光泽、长宽比小、大小均匀、干燥、无杂质，净度≥88.3%，种形指数2.5～3.8之间，千粒重≥9.0g，含水量≦8%，生活力≥93%，发芽率≥90%；二级种子较饱满、略有光泽、大小较均匀、有少许瘪粒及杂质，净度在74.3%～88.3%之间，种形指数3.8～4.1之间，千粒重6.5～9g之间，含水量8～8.5%之间，生活力83.3～93%之间，发芽率70～90%之间；三级种子干瘪、瘦小、大小不均匀、有不少杂质，净度≦74.3%，种形指数﹥4.1，千粒重﹤6.5g，含水量≥8.5%，生活力﹤83.3%，发芽率≤70%。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：383.

[2] 畅晶，张媛媛，李莉，等.射干种子品质检验及质量标准研究[J].中国中药杂志，2011，34(7)：828-829.

[3] 陈瑛.实用中药种子技术手册[M].北京：人民卫生出版社，1999.

[4] 刘淑芹.常用发芽方法的比较试验[J].种子世界，1993(3)：52.

[5] 周涛，江维克，陈敏，等.何首乌种子品质检验及质量标准的制定[J].贵州农业科学，2011，39(7)：229-233.

StudyonSeedQualityofIsatidisRadixfromDifferentSources

WANGXingzheng1，DUTao2，WANGFusheng1，PANXiaochun1

(1.DingxiAcademyofAgriculturalSciences，Dingxi743000，China；2.GansuUniversityTraditionalChineseMedicine，Lauzhou730010，China)

Objective：To compare the seed quality of Isatidis Radix from different sources，then propose the seed quality standard of Isatidis Radix.Methods：The seed purity，shape index，1000-grain weight，water content，vitality，germination rate of seed of Isatidis Radix from different germplasm resources were measured，and seed characteristics were observed.Cluster analysis was used to analyze to data.Results：The first level seed was purple and thoroughly rounded，small aspect ratio，uniform size，dryness，without impurities，seed purity was above88.3%，1000-grain weight was above9.0g，water content was lower than8%，vitality was over93%，germination rate was over90%.The second level seed was relatively rounded，had a little flat grain and impurities，seed purity was between74.3～88.3%，1000-grain weight was between6.5～9g，water content was between8～8.5%，vitality was between83.3～93%，germination rate was between70～90%.The third level seed was thin，uneven size，there are many impurities，seed purity was lower than74.3%，1000-grain weight was below6.5g，water content was above8.5%，vitality was below83.3%，germination rate was below70%.Conclusion：The seed quality inspection and classification standard for Isatidis Radix was preliminarily drafted.

Isatidis Radix；seed；quality detection；quality standard

10.13313/j.issn.1673-4890.2016.9.016

2015-12-22)

2013年中医药部门公共卫生专项(国中医药办规财发[2013]41)；国家科技惠民项目(S2013GMG10004)

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王兴政，助理研究员；研究方向：中药材育种与栽培；E-mail：wangxingzheng763@163.com