肿瘤相关巨噬细胞与卵巢癌组织之间的关系及预后的影响

黄福海　潘丽英　徐楚燕

[摘要]目的 本研究旨在进一步研究阐明肿瘤相关巨噬细胞特异性标志物CD68相对表达量与卵巢癌发生发展及预后的关系。方法 纳入我院2012年1月～2015年1月卵巢癌手术切除患者的病例样本共计48例，对这48例卵巢癌病例采用逆转录实时定量聚合酶链反应RT-PCR的方法对肿瘤相关巨噬细胞特异性标志物CD68的相对表达量进行检测。结果 肿瘤相关巨噬细胞特异性标志物CD68相对表达量与患者的年龄、分化程度、肿瘤侵袭深度及瘤组织大小、是否转移等并不存在相关性（P>0.05）；而淋巴受累方面，淋巴受累组的肿瘤相关巨噬细胞相对表达量明显下调（P<0.05），无淋巴受累组的相对表达量与正常组相比差异无统计学意义（P>0.05），肿瘤相关巨噬细胞相对表达量明显下调与淋巴结受累转移的风险有关；生存分析方面，肿瘤相关巨噬细胞相对表达量明显下调的患者中生存时间较高表达的患者明显增长。结论 肿瘤相关巨噬细胞相对表达量水平与卵巢癌的淋巴结转移及预后有着相关性。

[关键词]肿瘤相关巨噬细胞；相对表达量；卵巢癌

[中图分类号]R737.31 [文献标识码]B [文章编号]2095-0616（2016）05-166-04

卵巢癌是最常见的妇科肿瘤之一，尽管对卵巢癌的诊断和治疗技术不断的提高，但是该病的预后仍不理想，早期诊断对疾病的及时发现及治疗具有重要的临床意义。目前认为肿瘤相关巨噬细胞在肿瘤淋巴结转移及预后有着相关性，为此学术界对肿瘤相关巨噬细胞进行不断深入研究。为了探讨肿瘤相关巨噬细胞与卵巢癌的相关性，我们通过对这48例卵巢癌病例采用逆转录实时定量聚合酶链反应的方法对肿瘤相关巨噬细胞的相对表达量进行检测，初步探讨肿瘤相关巨噬细胞的表达与卵巢癌的发生发展之间的作用关系。

1资料与方法

1.1一般资料

纳入我院2012年1月～2015年1月妇科行卵巢癌手术切除患者的病例样本共计48例，年龄为42～78岁，平均（613±1.1）岁，所有的患者均为初诊的患者，术前未进行任何放疗、化疗及分子靶向治疗等，收集标本前该临床试验研究通过了医院伦理委员会的批准，所有病例患者签订知情同意书。在术中取材之后，肿瘤的位置以病理组织报告为标准，对组织的病理学进行分型，肿瘤的浸润程度按照国际抗癌联盟标准分类，淋巴分化以及转移采用的国际WHO的诊断标准进行分析判断，对所有手术治疗的患者从出院到死亡进行随访观察，随访的时间以每月1次，最后一次随访时间为2015年7月25日，最长随访时间为3.5年，平均随访时间为（23±1.2）年。

1.2 RNA提取及RT-PCR反应

对48例卵巢癌组织采用RNA提取试剂盒（美国Invitroge公司）进行RNA提取，采用TaqMan肿瘤相关巨噬细胞试剂盒（美国Santa Cruz公司）检测肿瘤相关巨噬细胞在患者卵巢癌组织中的表达情况。

1.3统计学检测

数据采用SPSS18.0统计学软件进行分析，对临床病理因素之间的风险情况采用理论Logistic回归分析，组间比较用方差分析，组间均数比较采用t检验，组间率的比较用x²检验。运用Kaplan-Meier的生存曲线对肿瘤切除术后患者的生存情况进行分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1肿瘤相关巨噬细胞CD68的相对表达量与临床病理特征之间的比较

48例卵巢癌组织的肿瘤相关巨噬细胞CD68的相对表达量为0.436，95%CI为0.323～0.534.表达量低于平均值的有21例，高于平均值的有27例，淋巴受累组的肿瘤相关巨噬细胞相对表达量明显下调（P<0.05），而无淋巴受累组的相对表达量与正常组相比差异无统计学意义（P>0.05），见表1。

2.2肿瘤相关巨噬细胞CD68相对表达量的高低与临床病理因素之间的关系

肿瘤相关巨噬细胞相对表达量的低增加了淋巴结转移的风险，调整之后风险的OR=5.05，95%CI为1.14～23.45，P<0.05，见表2。

2.3肿瘤相关巨噬细胞的相对表达量与预后之间的相关性

48例卵巢癌组织的肿瘤相关巨噬细胞的相对表达量为0.436，95%CI为0.323～0.534。21例肿瘤相关巨噬细胞相对表达量明显下调的患者中生存时间为（127.34±10.90）个月，而肿瘤相关巨噬细胞高表达的患者生存时间为（69.23±12.43）个月，两组比较差异具有统计学意义（t=6.647，P=0.000），肿瘤相关巨噬细胞表达的高低与预后有着一定的相关性。

3讨论

卵巢癌是来源于卵巢上皮的恶性肿瘤之一，每年我国有超过40万的新发病例，由于早期卵巢癌发病并无明显的临床症状，大部分卵巢癌患者初次入院检查已经是中晚期，因此探求研究卵巢癌发病的机制具有重要的现实意义。通过大量的临床研究发现，肿瘤相关巨噬细胞是一类在肿瘤发生及发展中发挥重要生物学效应的分子，卵巢癌患者腹膜汇总巨噬细胞的浸润明显增加。目前对肿瘤组织中巨噬细胞增多的机制尚未研究清楚，发现了相当多表型和功能出现一定的差异性。随着生物信息学的发展，肿瘤相关巨噬细胞在肿瘤中的相关研究越来越深入，研究发现肿瘤相关巨噬细胞参与者各类肿瘤的生长、发育，与肿瘤细胞的增殖凋亡以及侵袭转移密切相关，涉及到各类肿瘤的发生发展，且肿瘤相关巨噬细胞的表达谱还决定着肿瘤的基因反应，在肿瘤亚型、转移等临床病理因素中发挥着重要作用，尤其对于术后的生存期及预后具有一定的相关性，研究提示了肿瘤相关巨噬细胞可以用于对肿瘤预后的评估，其表达量与肿瘤的预后有着一定的相关性。

我们通过肿瘤相关巨噬细胞标志物CD68的表达水平与卵巢癌之间的相关性分析，该分子产生蛋白酶和生长因子直接促进肿瘤浸润和转移，以往的研究发现肿瘤相关巨噬细胞在不同肿瘤组织中均有差异性表达，其调控功能也有所不同。文献报道肿瘤相关巨噬细胞的下调在结肠癌、乳腺癌、宫颈癌等中具有预后判断介质。研究还发现在膀胱癌中肿瘤相关巨噬细胞表达的下调可作为膀胱癌晚期的标志性分子。过表达的肿瘤相关巨噬细胞可以诱导子宫内膜癌的发生，其中对Ishikawa细胞的生长具有显著的抑制作用，还能提高顺铂对子宫内膜癌的细胞毒作用。肿瘤相关巨噬细胞主要通过负调控肿瘤相关巨噬细胞对整个相关基因表达体系发挥着精细调节的作用。通过负相的调控机制，促进了肿瘤的发生发展，而抑制过表达的肿瘤相关巨噬细胞，可以从而可以抑制肿瘤细胞的增殖和迁移侵袭能力。因此可以说肿瘤相关巨噬细胞在肿瘤的调控中具有重要的作用。本研究结果显示了，淋巴受累组的肿瘤相关巨噬细胞相对表达量明显下调，而无淋巴受累组的相对表达量与正常组相比差异无统计学意义，肿瘤相关巨噬细胞相对表达量明显下调与淋巴结受累转移的风险有关；生存分析方面，肿瘤相关巨噬细胞表达的高低与预后有着一定的相关性。

综上所述，我们发现肿瘤相关巨噬细胞在卵巢癌表达下调与组织分化及预后有着密切的相关性，提示肿瘤相关巨噬细胞可能与卵巢癌的转移侵袭等影响预后的因素有关，该分子差异性表达推测可能是卵巢癌早期的潜在标志物。