顺德地区421例甲真菌病致病菌分离培养分析

广东省佛山市顺德区慢性病防治中心（528300）黄英河 梁海东 赵伟峰 匡玉宝 陈榕 梁意引

甲真菌病是一种常见的慢性浅部真菌病，是由皮肤癣菌、酵母菌及其他丝状真菌等致病菌侵犯甲板或甲下组织引起的一种传染性疾病。其流行状况因地区不同而存在较大的差异；随着现今社会的发展，甲真菌病对患者生理功能、日常工作生活、心理状态和社会活动等产生的影响日趋引起人们的重视。为了解本地区甲真菌病致病菌的种类和构成情况，观察其流行病学特点，笔者收集2012年2月～2016年3月的到本中心就诊而且甲屑真菌直接镜检为阳性的甲真菌病患者421例，对其病甲标本作真菌分离培养以及鉴定分析，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 标本来源 421例甲真菌病患者均临床症状明显，病甲真菌直接镜检阳性。其中，男186例，女235例，男女比例为1∶1.26，年龄3～92岁，平均35岁。

1.2 标本采集 先用经灭菌的棉签蘸取无菌生理盐水，对患者的病甲作适当的表面清洁，再用经灭菌的钝刀刮取病甲屑，放置于经灭菌的小纸袋中。

1.3 真菌分离培养 用接种钩挑取纸袋中的甲屑标本，多点平行接种于含氯霉素的沙氏真菌平皿培养基中，置于25℃～27℃恒温箱里培养2～4周，隔2天观察一次，连续4周无菌生长为阴性。

1.4 菌种鉴定 丝状型真菌主要根据菌落生长快慢、菌落形态、培养基颜色变化和小培养的镜下结构，以及在显微镜下大、小分生孢子形态特点等鉴定菌种。酵母类菌落则通过转种念珠菌显色培养基鉴定，严格按照说明书判读结果，假如不能得到确切结果，则需要作法国梅里埃ATB分析鉴定。

2 结果

2.1 甲真菌病临床分型：421例患者中，远端甲下型甲真菌病(DLSO)282例，全甲破坏型甲真菌病(TDO)59例，近端甲下型甲真菌病(PSO)26例，白色浅表型甲真菌病(SWO)54例，见附表1。

2.2 致病菌构成：421例甲真菌病患者标本分离培养中，培养阳性数为278例，阳性率为66.03%，构成见附表2。

3 讨论

甲真菌病的病原菌总体上分为皮肤癣菌、酵母菌和霉菌三类，其中皮肤癣菌无论是镜检阳性还是培养阳性均意味着是致病菌，对某些酵母菌和霉菌是致病菌还是污染菌，目前还没有统一标准。此外，由于皮肤癣菌往往生长缓慢，一些酵母菌或者霉菌则生长较快，容易掩盖或者竞争抑制皮肤癣菌的生长，因此导致各实验室的报道结果相差很大。国内学者提出，如分离酵母菌属(白色念珠菌除外)或霉菌，则连续做2～3次培养，并结合甲病理作出判断[1][2]。甲真菌病的易感染因素很多，包括原有癣病、甲外伤、糖尿病、潮湿环境、手足多汗者、免疫力低下或伴自身免疫性疾病、免疫抑制剂治疗史等等。甲真菌病的发病也与职业有着密切相关，手工作业者、厨师、清洁行业等发病率相对偏高，特别是指(趾)甲美容师、足疗浴足师自身发病率较高，而且还容易传给服务对象。另外，甲真菌病的发生还与个人不良的卫生生活习惯有关,如使用公用拖鞋、洗脚盆、公共浴池、共用指甲钳、常穿透气性差的鞋等等。

附表1 421例患者甲真菌病临床分型构成比

附表2 278例甲真菌分离培养阳性致病菌的构成比

从本次调查研究可以看出，在临床分型上，DLSO型甲真菌病最常见，占66.98%，且趾甲受累情况稍多于指甲，该分布特征与国外文献报道的流行规律相似[3][4]。而致病菌构成上，主要致病菌为酵母菌(63.31%)，其次为皮肤癣菌(32.73%)，与张晓军[5]，何艳嫦[6]等报道一致。然而从菌种来讲，皮肤癣菌属中的红色毛癣菌最为常见(占30.21%)，其次为酵母菌属中的白色念珠菌（占25.54%）。

大部分致甲真菌病的真菌对抗真菌药敏感，因此只要明确感染菌种和传播途径，做到早预防、早治疗、早诊断，则完全可以预防和治疗。本调查的意义在为临床诊断甲真菌病提供实验室依据，有助于明确诊断，指导合理用药，避免滥用抗真菌药；对群众和患者进行健康宣传教育，引导大家通过改变不良的个人卫生习惯，以减少感染的机会。综上所述，顺德地区的甲真菌病的临床分型以DLSO为主，致病菌以酵母菌为主，其次为皮肤癣菌；菌种以红色毛癣菌，白色念珠菌，近平滑念珠菌最为常见。临床上应重视甲真菌分离培养，最好结合相应的药敏试验，慎重选择相应的抗真菌药，提高甲真菌病的防治水平。