白酒中邻苯二甲酸二丁酯检测方法的研究

熊秋萍，谢小兰，何信，罗莉，孙琪

（四特酒有限责任公司，江西樟树331200）

白酒中邻苯二甲酸二丁酯检测方法的研究

熊秋萍，谢小兰，何信，罗莉，孙琪

（四特酒有限责任公司，江西樟树331200）

研究开发了一种用于白酒中二甲酸二丁酯（dibutyl phthalate，DBP）的新的检测方法：以氘代邻苯二甲酸酯（D4-DBP）为内标的内标法。使用气相色谱-质谱仪为研究手段，和国标中的外标法做了对比，评估了内标法的精密度和准确度。研究结果显示，当DBP浓度处于0.6 mg/kg以下时，内标法的精密度和准确度与外标法类似。DBP浓度高于0.6 mg/kg时，内标法测量数据比外标法偏低。因此，内标法更适合在DBP浓度偏低时使用，在不影响测量结果的前提下，省去了配置标准曲线的步骤，比传统外标法操作更为便利。

内标法；外标法；气相色谱-质谱；DBP；D4-DBP

白酒在中国历史悠久，蕴藏与传承着深厚的中华文化。然而近年来白酒中的塑化剂问题引起人们的强烈关注。塑化剂是一类邻苯二甲酸酯物质，可干扰人体内分泌系统，导致男性生殖能力减弱、引发女性性早熟，并且可能通过胎盘脂质及锌代谢影响胎盘发育，导致胚胎生长缓慢，甚至具有致癌性［1］。

由于塑化剂在乙醇中的迁移率与时间有关，白酒会在贮存、运输与包装过程中与塑料制品接触而产生邻苯二甲酸酯物质的迁移。目前白酒中的塑化剂问题已成为整个白酒行业面临的问题。本研究参照国标方法GB/T 21911—2008《食品中邻苯二甲酸酯的测定》，结合白酒的实际情况，对标准中条件进行优化和摸索其他方法，得出适合白酒中塑化剂的检测方法，对白酒塑化剂的检测和白酒产品质量的控制提供指导。

1　材料与方法

1.1材料、试剂及仪器

白酒：四特酒。

正己烷：色谱纯（赛默飞）；标准品：邻苯二甲酸二丁酯（DBP，纯度≥99.6%），氘代邻苯二甲酸二丁酯（D4-DBP，纯度≥99.6%）；德国Dr.Ehrenstorfer GmbH公司。

仪器设备：气相色谱-质谱联用仪（GC-MS），7890A-5975C安捷伦公司；旋涡混合器。

1.2实验方法

1.2.1色谱条件

色谱柱：HP-5MS 30 m×25 μm×0.25 μm；载气（氦气纯度≥99.999%）：流速为1.2 mL/min，尾吹3 mL/min；进样器温度：280℃；四级杆温度：150℃；柱箱二阶升温程序：60℃（保持1 min），20℃/min升至220℃（保持1 min），5℃/min升至280℃（保持4 min）。

进样量：1 μL。

1.2.2质谱条件

色谱与质谱接口温度：280℃；四级杆温度：150℃；电离方式：电子轰击源（EI）；监测方式：选择离子扫描模式（SIM）；电离能量：70 eV；溶剂延迟：5 min。

1.2.3内标法与外标法

标准储备溶液和中间液的制备：准确称取100.0 mg标准物质DBP（精确至0.1 mg），用正己烷定容至100 mL容量瓶中，配制为1000 mg/L的混合标准储备液，于冰箱保存待用。临用时，准确移取内标的标准储备溶液1000 μL（精确至0.1 μL）于100 mL容量瓶中，用正己烷稀释至刻度制成10 mg/L的中间液。

内标的标准储备溶液和中间液的制备：准确称取100.0 mg标准物质D4-DBP（精确至0.1 mg），用正己烷定容至100 mL容量瓶中，配制为1000 mg/L的混合标准储备液，于冰箱保存待用。临用时，准确移取内标的标准储备溶液1000 μL（精确至0.1 μL）于100 mL容量瓶中，用正己烷稀释至刻度即制成10 mg/L的中间液。

1.2.3.1外标法

用移液枪准确分别移取标准溶液中间液10 μL、20 μL、30 μL、50 μL、100 μL、200 μL加正己烷至最终体积为1000 μL，制备含DBP浓度为0.1 mg/L、0.2 mg/L、0.3 mg/L、0.5 mg/L、1.0 mg/L、2.0 mg/L或使用梯度稀释法，进样后制成标准曲线。

1.2.3.2内标法

用移液枪准确分别移取标准溶液中间液10 μL、20 μL、30 μL、50 μL、100 μL、200 μL加正己烷至最终体积为990 μL，再分别加标准溶液中间液10 μL内标中间液制备为含DBP浓度为0.1 mg/L、0.2 mg/L、0.3 mg/L、0.5 mg/L、1.0 mg/L、2.0 mg/L或使用梯度稀释法，进样后制成标准曲线。

1.2.4样品前处理

外标准确称取样品2.00 g，加入正己烷2.0 mL，在漩涡混合器上振荡1 min，静置分层，取上层清液进行分析。内标法准确称取样品2.00 g，加入20 μL内标中间液，再加入正己烷2.0 mL，在漩涡混合器上振荡1 min，静置分层，取上层清液进行分析。

2　结果与分析

2.1标准曲线

按照安捷伦工作站操作程序由安捷伦工作站自动生成，见图1。

监测的主要碎片离子及保留时间见表1，离子图见图2。

2.2样品测定

抽取10个不同酒体或不同读数的酒样分别采用外标法和内标法，用GC-MS进行测定，测定结果见表2。

2.3精密度与准确度实验

图1　标准曲线的制作

表1　监测结果

表2　测定结果

用2种实验方法测定酒精度为35%vol～45%vol的10个四特酒样，参照国家标准中对不含油脂类物质中的塑化剂检测精密度要求为：在重复性条件下测定的2次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15%，结果见表3。以10个样品中的DBP 2次独立测定结果为例，结果分析中的相对误差均能满足精密度要求。选择样品6进行加标实验，验证实验方法的准确性，外标法回收率平均值为99.0%，内标法回收率平均值为94.0%，结果表明2种方法的精密度以及准确度均能满足实验要求，结果见表4。

将内标法与外标法所做平行样的相对误差作图分析见图3。

图2　2种化合物离子图

3　结论

本研究参照国标GB/T 21911—2008《食品中邻苯二甲酸酯的测定》，开发了内标测定方法，为白酒中邻苯二甲酸酯类物质检测提供更多检测方法。从精密度和准确度与外标法的对照实验数据可以得出，在浓度为0.6 mg/kg以下的范围是适用的。同时从数据分析可见在DBP浓度更高时，内标法测量数据比外标法偏低，虽然能满足准确度要求，在含量更高的情况下应再进行实验来确定是否适用。

表3　塑化剂检测精密度结果

表4　外标法及内标法回收率实验结果

塑化剂是指一类邻苯二甲酸酯类物质，白酒中主要存在的塑化剂是DBP（邻苯二甲酸二丁酯）和DEHP（邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯，这2种物质在本文所研究的方法中能得到很好分离，内标法检测开启了白酒中塑化剂检测的新思路，同样也可以延伸至其他种类的邻苯二甲酸酯类，为白酒中塑化剂检测带来更广阔的思路。

图3　内标法与外标法平行样的相对误差图

［1］靳秋梅，孙增荣.邻苯二甲酸酯类化合物的生殖发育毒性［J］.天津医科大学学报，2004（10）：15-18.

［2］国家质量监督检验检疫总局.食品中邻苯二甲酸酯的测定：GB/T 21911—2008［S］.北京：中国标准出版社，2008.

Detection of Dibutyl Phthalate in Baijiu

XIONG Qiuping，XIE Xiaolan，HE Xin，LUO Li and SUN Qi
（Site Liquor Co.Ltd.，Zhangshu，Jiangxi 331200，China）

In this study，a new detection method of dibutyl phthalate in Baijiu by using deuterated phthalic acid ester（D4-DBP）as the internal standard has been developed.Compared with the external standard method in ISO Standards via GC-MS，the precision and the accuracy of both methods were close as DBP concentration was below 0.6 mg/kg，however，the detection data of internal standard method were comparatively lower than that of external standard method as DBP was above 0.6 mg/kg.Accordingly，internal standard method was more suitable as DBP concentration was low，which could shorten the operation time of preparing the standard curve without any adverse effects on the analytic results.

internal standard method；external standard method；GC-MS；DBP；D4-DBP

TS262.3；TS261.7；TS261.4

A

1001-9286（2016）10-0061-04

10.13746/j.njkj.2016205

2016-06-17

熊秋萍（1986-），女，江西宜丰人，主要从事白酒检测及质量控制。

优先数字出版时间：2016-08-05；地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.1051.TS.20160805.1337.004.html。