胎盘组织缺氧诱导因子-1α和内皮素-1表达对糖尿病妊娠的影响

屈莉红，荆鲁宁

（山东省海阳市人民医院产科，山东 海阳 265100）

胎盘组织缺氧诱导因子-1α和内皮素-1表达对糖尿病妊娠的影响

屈莉红，荆鲁宁

（山东省海阳市人民医院产科，山东 海阳 265100）

目的探究分析胎盘组织缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和内皮素-1（ET-1）表达对糖尿病妊娠的影响。方法分别选取糖尿病妊娠患者30例（糖尿病妊娠组）、妊娠期糖尿病患者30例（妊娠糖尿病组）以及正常孕妇30例（对照组）。采用免疫组织化学法SP法测定EF-1及HIF-1α蛋白的含量，比较并分析各组检测结果差异及其对糖尿病妊娠结局的影响。结果糖尿病妊娠患者胎盘组织EF-1及HIF-1α蛋白阳性表达率显著高于妊娠糖尿病患者及对照组（P<0.05），糖尿病妊娠患者的产后出血、胎儿生长受限及妊娠高血压等并发症发生率（50.00%）显著高于妊娠糖尿病患者（30.00%）及对照组（10.00%），各组比较差异有统计学意义（P< 0.05）。结论胎盘组织EF-1及HIF-1α蛋白表达情况对糖尿病妊娠患者的妊娠结局具有不良影响，EF-1及HIF-1α蛋白阳性表达率越高，妊娠并发症发生率明显增加，胎盘损害越严重。

胎盘组织；HIF-α；ET-1；糖尿病妊娠

糖尿病是临床诊疗中较为常见的病症，目前，糖尿病患者的妊娠率也在不断增加，对母婴健康存在严重威胁[1]。胎盘组织在缺氧状态下可以促使缺氧诱导因子-1α（hypoxia-induciblefactor-1α，HIF-1α）表达，内皮素-1（endothelin-1，ET-1）是HIF-1α的下游靶基因，属于纤维化致炎因子，HIF-1α和ET-1共同参与糖尿病妊娠的进展过程[2-3]。胎盘功能对胎儿的健康起着至关重要的保护作用，其病理改变依赖于胎盘含氧量。本研究胎盘组织中HIF-1α和ET-1表达对母婴结局的影响作用。现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料

选取2013年10月-2015年10月于山东省海阳市人民医院产科接收的90例孕妇为研究对象。其中，糖尿病妊娠患者30例（糖尿病妊娠组）、妊娠期糖尿病患者30例（妊娠糖尿病组）以及正常孕妇30例（对照组）。糖尿病诊断符合中华医学会糖尿病学会制定的糖尿病诊断标准[4]，糖尿病妊娠组在本次妊娠前均已确诊为糖尿病。所选90例研究对象均为单胎妊娠，排除具有贫血、精神障碍及其他心、肝、肾器官肿瘤疾病患者。3组患者均对本研究知情并自愿参与研究，本次研究已经获得医院伦理委员会批准。3组差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2方法

无菌操作状态下取2块处于娩出30 min内的3组胎盘组织母体面中央组织，注意避开组织钙化及坏死区域，胎盘组织块大小在1 cm×1 cm×1 cm左右，经甲醛固定后，进行石蜡包埋处理。EF-1及HIF-1α蛋白定位采用免疫组织化学法SP法进行半定量检测。兔抗人ET-1单克隆抗体及兔抗人HIF-1α多克隆抗体均由北京中杉金桥生物技术有限公司提供，检测操作过程严格按照试剂盒说明书进行。

1.3观察指标

观察各组妊娠并发症发生情况，观察胎盘组织EF-1及HIF-1α蛋白的表达及定位情况。

1.4评价指标

免疫组织化学法染色结果判定：显微镜下观察到胞质或者胞膜出现棕黄色颗粒即为阳性表达。

1.5统计学方法

采用SPSS 18.0统计软件进行数据分析，计数资料采用（%）表示，行χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1各组胎盘组织HIF-1α和ET-1的表达情况

糖尿病妊娠组孕妇胎盘组织HIF-1α蛋白表达阳性率为66.67%，ET-1蛋白表达阳性率为73.33%，与妊娠糖尿病组及对照组胎盘组织HIF-1α和ET-1表达水平比较差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

表1　3组HIF-1α和ET-1蛋白表达阳性率比较例（%）

2.2HIF-1α和ET-1在各组胎盘组织中的定位情况

胎盘组织HIF-1α和ET-1蛋白表达定位在胎盘合体、细胞核及胞质部分，均可以见到棕黄色颗粒的阳性表达，糖尿病妊娠组的HIF-1α和ET-1蛋白表达明显增强，妊娠糖尿病组及对照组表达相对较弱，糖尿病妊娠组、妊娠糖尿病组及对照组中HIF-1α和ET-1蛋白表达的定位结果见附图。

附图　HIF-1α和ET-1的定位（SP×100）

2.3各组妊娠不良并发症发生率比较

糖尿病妊娠组孕妇出现胎儿生长受限3例，并发症发生率为50.00%，较妊娠糖尿病组孕妇及对照组并发症高（P<0.05），见表2。

表2　3组妊娠结局比较结果例（%）

3 讨论

糖尿病妊娠是临床上造成孕产妇及围产儿死亡的重要原因，糖尿病妊娠患者胎盘滋养细胞功能出现障碍。正常妊娠过程中，孕10周左右时胚胎滋养叶细胞开始逐渐侵入母体蜕膜，增加血流动力，确保胎盘和胚胎发育的营养需求[5]。糖尿病妊娠患者存在不同程度的糖耐量异常，女性妊娠期会出现胰岛素代谢异常将造成糖代谢异常。糖尿病妊娠会对孕妇和胎儿产生较大的不良影响，妊娠晚期妇女的血糖代谢障碍导致先兆子痫、妊娠期糖尿病、妊娠期抑郁症、细菌性阴道病、影响胎儿的宫内发育，增加新生儿患心血管疾病、免疫系统疾病和糖尿病等慢性疾病的风险，例如造成早产、子痫前期等等，影响着孕妇和胎儿的健康。而糖尿病的发生，有很多的危险因素，例如高血糖、高血脂等等。糖尿病妊娠孕妇的机体状态往往呈现高血糖状态，这将在一定程度上造成胚胎组织细胞缺氧，进而导致机体发生血管增生、间质纤维等效应[6]。HIF可以对机体缺氧状态进行适应调节，调控缺氧反应基因的表达。HIF主要在缺氧环境下活化，同时在富氧环境下降解，所以HIF表达可以提高机体缺氧的适应能力。妊娠胎盘发育早期长期处于缺氧状态，滋养细胞分泌HIF-1α激活靶基因ET-1表达，从而促进胎盘心血管生成，维持营养供应。临床研究表明，血管内皮生长因子、ET-1等基因均受HIF-1α调控，HIF-1α能够促进血管生成、调节血管舒缩功能，维持机体的氧稳态[7-9]。ET-1是由血管内皮细胞合成的纤维化因子，可以在缺氧环境中与HIF-1α实现特异性结合。ET-1参与糖尿病并发症的发生与发展过程，通过引发胎盘滋养细胞的应激化反应导致胎盘局部损伤[10]。本组糖尿病妊娠组HIF-1α蛋白表达量相对较高，其胎盘绒毛微血管内皮细胞胞质中的ET-1蛋白表达也显著高于对照组和妊娠糖尿病组（P<0.05），说明糖尿病妊娠组孕妇血糖水平存在较大的波动，高血糖状态下HIF-1α水平升高，进而刺激ET-1表达的增多，导致孕妇胎盘结构功能出现严重损害，影响妊娠结局。糖尿病是典型的血糖代谢障碍疾病，对患者的血液微循环及流变性造成了一定影响，容易导致患者出现缺血、缺氧甚至水肿等并发症[11-12]。糖尿病患者妊娠后将导致胎盘滋养细胞及胎盘绒毛发生间质纤维化，引发胎盘缺血缺氧。本组研究结果显示，糖尿病妊娠患者的HIF-1α及ET-1蛋白表达水平升高导致妊娠并发症的发生率增加，说明HIF-1α及ET-1表达情况引发了糖尿病妊娠患者的不良妊娠结局。

综上所述，糖尿病妊娠患者胎盘组织HIF-1α及ET-1表达参与了妊娠结局的发生、发展，临床治疗中应关注以HIF-1α及ET-1为靶点的抗糖尿病并发症治疗，积极改善预后。

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[12]黄艳丽,王晶,徐东方,等.缺氧诱导因子在异位子宫内膜中的表达意义[J].山东医药,2009,49(7):72-73.

（张蕾编辑）

Influence of placental hypoxia inducible factor-1α and endothelin-1 in gestational diabetes patients

Li-hong Qu，Lu-ning Jin
（Department of obstetrics，Haiyang People's Hospital，Haiyang，Shandong 265100，China）

Objective To explore the the influence of placental hypoxia inducible factor 1 alpha（HIF-1α）and endothelin-1（ET-1）in gestational diabetes.Methods A number of 30 patients diabetes during pregnancy and 30 gestational diabetes patients were selected，and 30 cases of normal pregnant women were selected at the same time as a control group.Immune histochemical method and SP method were used to detect EF-1 and HIF-1α protein content.Differences between groups of test result and its influence on pregnancy outcomes of diabetes were compared and analysis.Results The placental tissue EF-1 and HIF-1α protein positive expression rate in patients with diabetes during pregnancy was significantly higher than that of gestational diabetes mellitus patients and the control group（P＜0.05）.Patients with diabetes during pregnancy had higher rate of postpartum hemorrhage，fetal growth restriction and higher incidence of complications（P＜0.05）.Conclusions The expressions of EF-1 and HIF-1α protein in placental tissue have adverse effects on patients with diabetes during pregnancy.

placenta tissue；HIF-1α；ET-1；gestational diabetes

R 714.256

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2016.20.010

1005-8982（2016）20-0044-04

2016-04-06