牡荆素的镇痛及抗炎免疫作用研究

程建忠黄金华*

（1 南通大学医学院，江苏 南通 226001；2 南通大学药学院，江苏 南通 226001）

牡荆素的镇痛及抗炎免疫作用研究

程建忠1黄金华2*

（1 南通大学医学院，江苏 南通 226001；2 南通大学药学院，江苏 南通 226001）

目的 旨在探讨牡荆素镇痛作用和抗炎免疫调节作用的机制。方法 应用热板法测定痛阈值，以研究牡荆素的镇痛效果。通过对角叉菜胶诱发大鼠足趾肿胀试验，来观察牡荆素抗炎作用；利用醋酸影响小鼠腹腔毛细血管通透性的方法，观察牡荆素的免疫清除作用。结果 牡荆素大剂量组痛阈提高值的百分率（%）最大达（40.3±14.8），比同期对照组的（5.9±1.8）有显著差异（P＜0.01）；和模型组比较，牡荆素各剂量组在致炎后1、2、3、5 h均有不同程度的足趾肿胀抑制（P＜0.05），其中牡荆素大剂量组大鼠（200 mg/kg）在致炎后1 h开始到3 h达到最高值（45.3±14.8）；与对照组比较差异更为显著（P＜0.01）；与对照组比较，牡荆素大剂量组对小鼠腹腔毛细血管通透性的吸收度A明显低于对照组，差异有显著性意义（P＜0.01）。结论 牡荆素具有较好的镇痛效果，抗炎作用明显；并能明显增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力。

牡荆子；镇痛；抗炎

牡荆子为马鞭草科植物牡荆的带宿萼的果实。主产于我国长三角流域及其浙江福建地区；作为民间验方常用于小儿哮喘发作的治疗。牡荆素是从牡荆子中提取的主要有效成分，近来发现在治疗小儿哮喘的同时也具有止咳祛痰和止痛等其他功效。本实验旨在对牡荆素抗炎及免疫调节作用做进一步深入研究，以期探明其内在的药理活性和作用机制。

1　材料与方法

1.1药物和试剂：牡荆素：中国生物制品检定所；阿司匹林片：南通精华制药，批号：20140128；角叉菜胶：苏北药业公司；安乃近针剂：尼克美制药有限公司，批号：20150221。

1.2实验动物：昆明种小鼠、SD大鼠，SPF级，雌雄各半；均由南通大学实验动物中心提供，生产许可证号：SYXK（苏）2012-0031。

1.3主要仪器：GJ-8402热板测痛仪和大鼠足趾容积测定仪，成都医疗仪器厂生产；分光光度计，上海医疗器械厂生产。

1.4统计学方法：实验数据运用SPss115.0统计软件处理，采用单因素方差分析，结果以均数±标准差（）表示，以（P＜0.05）为统计学差异意义。

2　方 法[1-2]

2.1镇痛作用：取体质量18～25 g雌性小鼠，逐只放于（55.0±0.5） ℃热板仪上，记录小鼠放入后到舔后足反应所需时间作为小鼠的痛阈值；将经过预先筛选，符合痛阈值小于30S的小鼠50只，随机分为阳性对照组即安乃近组（10 mg/kg）；空白对照组用等体积生理盐水；牡荆素大、中、小剂量3组（灌胃给药，剂量为牡荆素50、100、200 mg/kg）。分别在给药前和给药后的30、60、90、120 min测定痛阈值。痛阈提高值的百分率（%）=（给药后平均痛阈-给药前平均痛阈）/给药前平均痛阈×100%。

表1　牡荆素对小鼠热板痛阈的影响（，n=10）

表1　牡荆素对小鼠热板痛阈的影响（，n=10）

注：与对照组比较：*P＜0.05，**P＜0.01

组别　　剂量(mg/kg)　　痛阈提高值的百分率(%)给药后30 min　60 min　90 min　120 min对照组　-　5.6±1.6　5.8±1.7　5.9±1.8　6.0±1.8安乃近组　10　21.5±10.8*　32.7±12.6**　41.9±15.6**　36.8±11.8*牡荆素小剂量　50　14.3±3.7　19.8±5.06*　22.7±8.9*　20.6±9.7*牡荆素中剂量　100　18.3±8.2*　24.0±10.2*　29.6±12.9**　28.3±9.4**牡荆素大剂量　200　21.0±9.2*　29.1±11.2**　40.3±14.8**　37.1±12.2**

表2　牡荆素对角叉菜胶所致大鼠足肿的影响（，n=10）

表2　牡荆素对角叉菜胶所致大鼠足肿的影响（，n=10）

注：和对照组比较：*P＜0.05，**P＜0.01

组别　　剂量(mg/kg)足趾肿胀率(%)致炎后给药1 h　3 h　5 h　7 h对照组　-　0.2±0.04　0.17±0.02　0.21±0.08　0.25±0.09安乃近组　10　31.5±12.8*　42.7±12.6**　46.9±15.6**　37.8±11.8**牡荆素小剂量　50　24.3±7.7　29.8±9.06*　32.7±10.9*　29.6±10.7牡荆素中剂量　100　27.3±8.2*　34.0±10.2**　39.6±12.9**　29.3±9.4*牡荆素大剂量　200　29.0±9.2*　39.1±11.2**　45.3±14.8**　37.1±12.2**

2.2抗炎作用：取180～220 g体质量的SD大鼠50只，雌雄各半。每组10只，随机分为5组，既模型对照组、阳性药对照组即阿司匹林组（30 mg/kg），牡荆素大、中、小剂量3组（灌胃给药，剂量为牡荆素50、100、200 mg/kg）。对照组给予等体积生理盐水（灌胃给药量均为0.2 mL/100 g），连续灌胃给药9 d，于末次给药1 h后，在每只大鼠左后足跖皮下注射0.1 mL的1%角叉菜胶生理盐水液，用游标尺测量各组致炎前和致炎后1、3、5、7 h足跖厚度，计算足趾肿胀率。足趾肿胀率（%）=（致炎后平均足趾肿胀厚度-致炎前平均足趾肿胀厚度）/致炎前平均足趾肿胀厚度×100%。

2.3对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响：取昆明小鼠50只，雌雄各半，分组方法和给药方式同2.1。每天灌服给药1次，第7天给药0.5 h后。尾静脉注射1%伊文思蓝溶液（0.1 mL/20 g）、马上随即腹腔注射0.6%的新配制的醋酸生理盐水溶液（0.1 mL/10 g），20 min后脱臼处死，剪开腹腔，用6 mL生理盐水多次冲洗腹腔，再用吸管充分吸出冲洗液于刻度试管中，合并后加生理盐水定容到8 mL。采用3000 r/min离心5 min后，取上清液作样品液；将样品液在波长596 nm处测吸收度A值。抑制率=（空白组的吸收度-用药组吸收度）/空白组的吸收度× 100%。

3　实验结果

3.1镇痛作用：热板法对小鼠痛阈的测定 空白对照组小鼠由于对热的耐受性，对痛阈有一定延长，但前后没明显差异。与对照组比较，牡荆素小剂量组对小鼠在给药后的30 min痛阈就开始延长，牡荆素中剂量组、大剂量组对小鼠在给药后的各时间段均可显著延长小鼠的痛阈（*P＜0.05，**P＜0.01）。结果见表1。

3.2抗炎作用。对角叉菜胶所致大鼠足趾肿胀的影响：和模型组比较，牡荆素剂量组在致炎后1、2、3、5 h均有不同程度的足趾肿胀率差异（P＜0.05），其中大小剂量组均在3、5 h达到药效高点，之后作用开始减退。牡荆素大剂量组大鼠（200 mg/kg）在致炎后1 h就开始明显作用，其足趾肿胀率为（29.0±9.2），与对照组比较出现差异（P＜0.05），3 h达到最高值（45.3±14.8）与对照组比较差异更为显著（P＜0.01）；而且作用稳定，持续时间长；结果见表2。

3.3对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响：与对照组比较，牡荆素大、中剂量组对小鼠腹腔毛细血管通透性吸收度明显少于对照组，差异有显著性意义（P＜0.01）；结果显示能明显增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬伊文思蓝的能力。见表3 。

表3　对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响（n=10）

4　讨 论

炎症是一种损伤和修复的对立统一的防御反应：一方面损伤因子直接或间接造成组织和细胞的损伤，另一方面炎症通过充血渗出反应，以稀释、杀灭和包围损伤因子，并通过间质细胞的再生，使被破坏的组织得以修复。本实验结果表明：牡荆素能显著延长小鼠的热板痛阈值，减低大鼠角叉菜胶所致的足趾肿胀度和肿胀率，同时能显著增强吞噬伊文思蓝的能力，减少醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管的炎性渗出，具有显著的镇痛和抗炎免疫作用。牡荆素的作用机制可能于减少细胞的损伤，促进间质细胞的再生，修复炎症组织有关[3-5]。

临床上小儿的支气管炎症和哮喘的治疗使用的甾体和非甾体抗炎药物，都有一定的不良反应；牡荆素提取于植物中药[6]，不良反应较小且具有良好的药理作用，值得进一步开发利用。

[1]李仪奎.中药药理实验方法[M].上海:上海科学技术出版社,2006: 764-771.

[2]国家中医药管理局.中华本草[M].上海:上海科技出版社,1999: 6058.

[3]韦桂宁,刘智生,周军,等.炎见宁片抗菌、抗炎及镇痛作用的实验研究[J].中药药理与临床,2009,31(12):1873-1875.

[4]肖国珍,罗宗铭.牡荆子乙醇提取物抗氧化活性的研究[J].广东工业大学学报,2006,23(3):32-33.

[5]宋妍,杨雪,许伯慧,等.牡荆素抗豚鼠哮喘活性研究[J].现代医药卫生,2014,30(6):18-19.

[6]黄敬耀,徐彭,朱家谷,等.牡荆子平喘作用的药理实验研究[J].江西中医学院学报,2012,14(4):13-14.

R282.710.5

B

1671-8194（2016）31-0029-02

南通市科技项目（AS2011019）；江苏省高校优势学科建设工程资助项目（PAPD2013028）

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