食用植物油中17种邻苯二甲酸酯类化合物的测定

杨卫花，赵浩军，徐 幸

(大理州质量技术监督综合检测中心，云南大理 671000)



食用植物油中17种邻苯二甲酸酯类化合物的测定

杨卫花，赵浩军，徐 幸*

(大理州质量技术监督综合检测中心，云南大理 671000)

[目的]建立一种可满足植物油中17种邻苯二甲酸酯类化合物的检测方法。[方法]利用气相色谱三重串联四级杆质谱技术，建立了植物油中17种邻苯二甲酸酯类化合物检测方法并进行了样品测试。[结果]该方法对食用植物油中17种邻苯二甲酸酯类化合物的检测，线性范围为10～1 000 μg/L，线性相关系数均大于0.999，样品中的检出限最低达到0.2 mg/kg。17种组分3个浓度梯度(1.0 、5.0 和10.0 mg/kg)的平均回收率均在80.4%～110.9%，相对标准偏差在2.4%～8.3%。[结论]该方法简便、快速、检出限低、结果准确，可应用于核桃油、菜籽油、玉米油等实际样品中17种邻苯二甲酸酯类化合物的测定。

气相色谱三重串联四级杆质谱；食用植物油；邻苯二甲酸脂类；塑化剂

邻苯二甲酸酯类化合物(phthalate acid esters，PAEs)因可增加塑料的柔韧性而被作为塑化剂使用[1]，目前是塑化剂的主体，其产量占塑化剂总量的80%左右[2]。塑料中脂溶性的PAEs 类物质在接触植物油的时候会被溶出而被人摄入体内[3]。长期食用含有PAEs类物质的食品可能会导致内分泌失调和生殖系统异常，甚至可引起畸形、癌症等[4-7]。食用植物油中的PAEs 类含量对人体健康有很大的风险，因此必须准确测定植物油中的塑化剂含量。

根据卫生部2011 年6 月15 日发布的551 号公告《卫生部办公厅关于通报食品及食品添加剂中邻苯二甲酸酯类物质最大残留量的函》，公告中规定了食品中邻苯二甲酸二(α-乙基)己酯(DEHP)、邻苯二甲酸二异壬酯(DINP)和邻苯二甲酸二正丁酯(DBP)最大残留量分别为1.5、9.0和0.3 mg/kg。目前国内颁布了GB/T 21911—2008《食品中邻苯二甲酸酯的测定》[8]，而此标准仅有16 种邻苯二甲酸酯的检测方法，无DINP的检测；另外，此标准中含油样品中的检出限为1.5 mg/kg，与551号公告内容存在矛盾。针对上述问题，需对现有的标准方法进行改进。

目前，塑化剂的测定主要有气相色谱-质谱法[7-8]、气相色谱-串联质谱法[9]、GPC-GC-MS/MS法[10]及液相色谱串联质谱法[1，11]等，这些方法中都未专门针对食用植物油中塑化剂的检测，也未解决GB/T 21911—2008[8]中的问题。笔者利用 GC-MS-MS 的多重反应监测(MRM)高选择性、高灵敏度[9，12]，建立了一种前处理更为简单、快速，结果准确，检出限更低的方法，可满足植物油中17种塑化剂包括DINP检测的方法。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 主要试剂及样品。正己烷(色谱纯)，默克公司；17 种PAEs混合标准溶液：邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二异丁酯(DIBP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯(DMEP)、邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯(BMPP)、邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯(DEEP)、邻苯二甲酸二戊酯(DPP)、邻苯二甲酸二己酯(DHXP)、邻苯二甲酸丁基苄基酯(BBP)、邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯(DBEP)、邻苯二甲酸二环己酯(DCHP)、邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)、邻苯二甲酸二苯酯(DPhP)、邻苯二甲酸二正辛酯(DNOP)、邻苯二甲酸二异壬酯(DINP)、邻苯二甲酸二壬酯(DNP)，以上溶液浓度均为1 000 mg/L，购自迪马科技有限公司。34个植物油样品，市场购买所得。

1.1.2 主要仪器。7890 气相色谱仪、7000A 三重串联四级杆气相色谱质谱联用仪，安捷伦公司；离子源为EI(电子轰击)源；AB204-E万分之一电子天平，梅特勒-托利多公司，VORTEX MAX MIX II型涡旋转振荡器，热电公司；其他为实验室常用设备。

1.2 方法

1.2.1 定量工作曲线。用正己烷将混合标准溶液定容于100 mL 容量瓶，得到10 mg/L 的混合储备液，将混合储备液逐级稀释成10、50、100、200、500、1 000、10 000 μg/L 的一系列标准溶液，在优化的色谱条件下测定色谱峰面积，用定量离子对的峰面积与含量绘制标准工作曲线。

1.2.2 样品处理。称取0.1 g (精确至0.001 g)样品于10 mL 比色管中后准确加入10.0 mL 正己烷，涡旋2 min。

1.2.3 测定条件。

1.2.3.1 气相色谱条件。DB-5MS 色谱柱( 30 m×0.25 mm，0.25 μm)；He流速，40.12 cm/s，1.2 mL/min；柱温：60 ℃(1 min)，20 ℃/min升温至 220 ℃，5 ℃/min 升温至265 ℃，再以10 ℃/min升温至 285 ℃(5 min)，共25 min；进样口温度，270 ℃；进样体积，1 μL(不分流)。

1.2.3.2 质谱条件。EI 源温度为230 ℃；电离能量为70 eV；分辨率为1.2 amu；溶剂延迟时间为7 min；传输线温度为285 ℃；真空度为10-5Pa。

2 结果与分析

2.1 质谱多重反应监测条件优化 在优化的色谱分析条件下，运行一个全扫描方法，扫描离子质量范围为50～300 amu，NIST 谱库检索，得到特征一级质谱图，选定母离子，编辑产物离子的扫描条件，优化碰撞电压和增益，选择丰度高的2个特征离子作为子离子，设定的多重反应监测(MRM)条件见表1。

用表1设定的MRM 条件采集17种PAEs 的标准品，得到提取离子色谱图(图1)。从图1中可以看出，BMPP 为分叉峰，DINP 为五指峰[13]，其余15个组分的谱峰完全分离，峰形尖锐、对称性好。

表1 17种邻苯二甲酸酯类化合物多重反应监测的条件

注：1.DMP；2.DEP；3.DIBP；4.DBP；5.DMEP；6.BMPP；7.DEEP；8.DPP；9.DHXP；10.BBP；11.DBEP；12.DCHP；13.DEHP；14.DPhP；15.DNOP；16.DINP；17.DNP。Note：1.DMP；2.DEP；3.DIBP；4.DBP；5.DMEP；6.BMPP；7.DEEP；8.DPP；9.DHXP；10.BBP；11.DBEP；12.DCHP；13.DEHP；14.DPhP；15.DNOP；16.DINP；17.DNP.图1 17种邻苯二甲酸酯标准品的多反应监测(MRM)色谱(1 000 μg/L)Fig.1 Multiple reaction monitoring(MRM)chromatogram of 17 PAEs

2.2 方法的线性范围与检出限 在优化条件下，对10、20、50、100、200、500、1 000 μg/L浓度的标准溶液进行了MRM的测定，并用仪器所带软件MassHunter 工作站将峰面积对标准溶液浓度作曲线，得回归方程及相关系数，同时以信噪比S/N=10确定17种PAEs的检出限为0.2～1.0 mg/kg，具体见表2。

由表2可知，样品中DBP的检出限为0.2 mg/kg，低于551 号公告《卫生部办公厅关于通报食品及食品添加剂中邻苯二甲酸酯类物质最大残留量的函》中规定的DBP为 0.3 mg/kg的最大残留量。

2.3 方法的回收率及精密度 对供试核桃油样品进行1.0、5.0、10.0 mg/kg 3个水平添加并按“1.2.2”方法进行处理后，在优化的色谱条件下进行测定，每个浓度做5个平行样测试，计算回收率及相对标准偏差(RSD)。由表3可知，样品加标回收率均在80.4%～110.9%，RSD均在2.4%～8.3%，能够满足样品测试要求。

2.4 植物油中17种邻苯二甲酸酯类化合物的分布情况及分析 用所建立的方法，对34批次的植物油进行17种邻苯

表2 17种邻苯二甲酸酯类化合物的线性方程、相关系数及检出限

表3 17种邻苯二甲酸酯类化合物的加标回收率和相对标准偏差(RSD)(n=5)

二甲酸酯类化合物的检测，其中DMP、DEP、BMPP、 DPP、DHXP、BBP、DPhP、 DNOP 8种塑化剂都未检出或低于检出限，另外9种塑化剂的检出情况如表4所示。

由表4可知，34个样品中仅1个样品未检出DBP，1个样品的检出值等于0.3 mg/kg，其余的32个样品DBP检出值都高于卫生部2011 年6 月15 日发布的551 号公告中的0.3 mg/kg的最高限量，16个样品的检测值高于文献[8]中1.5 mg/kg的检出限；34个样品中有31个检出DEHP，检出数值为0.3～38.8 mg/kg，其中，21个样品的检测值高于1.5 mg/kg；34个样品DINP检测中检出29个样品，检出数值为1.5～191.2 mg/kg，其中，8个样品的检测值高于9.0 mg/kg的最高限量值。

34个样品中有33个检出DIBP，数值在0.8～19.3 mg/kg；DMEP有6个样品检出，数值在1.0～11.7 mg/kg；DEEP有7个样品检出，数值在0.3～6.0 mg/kg；DBEP有22个样品检出，数值在0.5～4.5 mg/kg；DCHP有19个样品检出，数值在1.1～9.9 mg/kg；DNP有9个样品检出，数值在0.5～1.9 mg/kg。

34个样品中DIBP、DBP、DEHP基本都检出，与文献[14]食用油中DIBP、DBP和DEHP 3种塑化剂检出率高的结论相一致。

表4 34个植物油样品中邻苯二甲酸脂类化合物检测情况

注：“—”代表未检出。

Note：— stands for not detected.

3 结论与讨论

植物油作为食品的重要组成部分，是人们日常生活的必需品，提高植物油质量，保证我国植物油的安全是每个从事油脂行业人的责任。 该试验采用正己烷提取植物油中的塑化剂，并利用GC-MS-MS中MRM方式的高灵敏度、高选择性，建立了植物油中包括DINP在内的17种PAEs的检测方法。该方法前处理简单、快速、结果准确，可作为植物油生产企业和政府质量控制部门日常质量控制的方法。

该研究对34个植物油样品进行了检测，DIBP、DBEP、DCHP等检出较为普遍，但国标中都未规定其限量值。另外，DIBP、DIOP等在我国允许使用的PAEs 在欧盟、美国都不得使用[15]，因此对植物油中的各种PAEs进行风险评估后制定相应的标准非常重要。另外，卫生部于2011 年6 月15 日发布的551 号公告《卫生部办公厅关于通报食品及食品添加剂中邻苯二甲酸酯类物质最大残留量的函》中的限量与标准方法[8]中的检测方法有矛盾，因此有必要对公告或者标准进行风险评估后重新制定相应的标准。同时，植物油中普遍检出DBP、DEHP的现象，应引起各植物油生产、包装企业的注意，不使用塑化剂含量高的包装容器，尽量降低产品中塑化剂的含量。参考文献

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Determination of 17 Phthalates in Edible Vegetation Oil

YANG Wei-hua, ZHAO Hao-jun, XU Xing*

(Dali Quality and Technical Supervision Comprehensive Inspection Centre, Dali, Yunnan 671000)

[Objective] The aim was to establish a method for detecting 17 phthalates esters(PAEs) in edible vegetation oil. [Method] A method for the determination of PAEs in edible vegetation oil by gas chromatography coupled with triple quadrupole mass spectrometry (GC-MS-MS) was established and samples were tested. [Result] The linear range of detection changed from 10 to 1 000 μg/L (r>0.999). The detection limits of samples of the 17 kinds of PAEs were 0.2 mg/kg. The average recoveries of three different concentrations (1.0, 5.0 and 10 .0 mg/kg) were ranged between 80.40% to 110.9% and the relative standard deviations were ranged from 2.4% to 8.3%. [Conclusion] This method is simple, quick, accurate, which can be applied to the determination of 17 PAEs in walnut oil, rapeseed oil, corn oil and other edible vegetation oil samples.

Gas chromatography-triple quadrupole mass spectrometry (GC-MS-MS); Edible vegetation oil; Phthalates esters(PAEs); Plasticizer

云南省质量技术监督局科技计划项目(2013ynzjkj16)。

杨卫花(1979- )，女，白族，云南丽江人，工程师，硕士，从事食品中添加剂及污染物限量检测工作研究。*通讯作者，工程师，博士，从事食品中添加剂及污染物限量检测研究。

2016-09-30

TS 225.1

A

0517-6611(2016)33-0086-04