青风藤配方颗粒的制备及与传统汤剂的比较

赵帆帆，王娇娇，李丽丽，李建晨,哈 婧

(河北科技大学化学与制药工程学院，河北石家庄 050018)



青风藤配方颗粒的制备及与传统汤剂的比较

赵帆帆，王娇娇，李丽丽，李建晨,哈 婧

(河北科技大学化学与制药工程学院，河北石家庄 050018)

为了研究青风藤配方颗粒制备工艺以及对青风藤配方颗粒与传统汤剂进行定性定量比较，运用正交试验方法，采用干法制粒，以出膏率、青藤碱含量为指标，优选青风藤配方颗粒制备工艺；采用薄层色谱法进行定性比较；以青藤碱为对照品，采用高效液相色谱法进行定量比较。青风藤配方颗粒最佳制备工艺如下：提取2次，加水量18倍(第1次加水量为10倍，第2次加水量为8倍)，各煎煮1.0 h。TLC结果显示，配方颗粒与传统汤剂化学成分的类型无明显差异。5批青风藤配方颗粒青藤碱含量分别为1.56%，1.58%，1.31%，1.20%和1.78%；5批青风藤传统汤剂青藤碱含量分别为0.94%，0.96%，0.85%，0.82%和1.02%。青风藤配方颗粒与传统汤剂中化学成分的类型基本相同，但青藤碱含量差异较大。

化学分析；青风藤；配方颗粒；传统汤剂；青藤碱

单味中药配方颗粒是以中药材饮片为原料，经现代制药技术提取、浓缩、干燥、制粒、包装而成的颗粒剂，使用时按处方量调剂后热开水冲兑即可，具有服用、携带、贮藏、运输方便，溶解迅速，免煎易服，生产自动化，条件恒定等优点[1-5]。与传统汤剂相比，中药配方颗粒虽然有一些优势，但在发展过程中也存在一些问题[6-17]。例如：单味配方颗粒与传统复方合煎汤剂是否等效；中药配方颗粒在尚无统一国家标准的情况下，如何控制其质量及服用剂量等。这些问题都制约着配方颗粒的发展，解决这些问题成为推动其发展的关键。本文通过正交试验，对配方颗粒的制备工艺以及配方颗粒与传统汤剂的定性定量比较进行研究，分析二者之间的差异，为临床用药提供实验依据。

青风藤为防己科植物青藤和毛青藤的干燥藤茎[18]，始载于宋代《图经本草》，具有祛湿、通经络、利小便的功效，用于风湿性及类风湿性关节炎、关节肿大、四肢疼痛麻木等症的治疗。其中，青藤碱等生物碱成分为祛风止痛的主要有效成分[19]。目前，临床上使用的青风藤制剂主要有注射剂、片剂、丸剂、胶囊剂及复方颗粒剂等剂型[20-23]。将青风藤配方颗粒作为一种新型的中药饮片应用于临床，有必要对其进行深入的研究和探讨。本实验通过正交试验，确定青风藤配方颗粒的最佳制备工艺，对青风藤配方颗粒和传统汤剂不同极性的化学成分进行薄层色谱(TLC)比较，并按照2015版《中华人民共和国药典》“青风藤”项下的含量测定方法对青藤碱含量进行比较，为青风藤配方颗粒的推广提供实验参考依据。

1 实验部分

1.1 主要仪器与试剂

岛津LC-2010A HT高效液相色谱仪；AL204电子天平(梅特勒-托利多仪器有限公司提供)；KQ5200DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司提供)；Merck硅胶60 F254薄层板(德国Merck公司提供)；电热恒温水浴锅(上海胜启仪器仪表有限公司提供)。

甲醇(色谱纯)，磷酸二氢钠(优级纯)，水(杭州娃哈哈集团有限公司提供)，其他试剂均为分析纯。青藤碱对照品(中国药品生物制品检定所提供，批号为110774-200507)。

1.2 样品

5批青风藤药材均购买于河北安国东方药城，经河北省药品检验研究院段吉平老师鉴定为毛青藤。样品来源为河南(QFT-001，QFT-002)、湖北(QFT-003，QFT-004)、江苏(QFT-005)。

1.3 配方颗粒的制备

分别称取5批青风藤50 g，以水为提取溶剂，从加水量、提取时间、提取次数、出膏率、是否加入辅料及辅料加入量等方面进行工艺考察，并通过正交试验优选工艺条件。综合考虑出膏率、转移率、生产成本、能耗等因素，确定最优工艺条件如下：浸泡1 h，提取次数2次，加水量分别为10倍、8倍，提取时间各1 h，不加辅料。合并2次滤液，减压浓缩至干，采用干法制粒得到青风藤配方颗粒。

1.4 传统汤剂的制备

参照《中药煎剂质量评定标准》，分别称取5批青风藤50 g，浸泡30 min，提取2次，分别加水至浸过药面2 cm(加水量约为6倍和4倍)，提取时间分别为30 min和25 min，不加辅料。合并2次滤液，减压浓缩至干，采用干法制粒得到青风藤传统汤剂颗粒。

1.5 薄层色谱定性比较

分别称取青风藤配方颗粒和传统汤剂颗粒2 g，加入25 mL乙醇，加热回流1 h，过滤，将滤液蒸干，加入1 mL乙醇溶解残渣，作为供试品溶液。另取青藤碱对照品，加入乙醇制成1 mL含1 mg青藤碱的溶液，作为对照品溶液。分别吸取上述2种溶液各5 μL，点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-水(体积比为2∶4∶3∶1)为展开剂，置于用浓氨水试液预饱和20 min的展缸内展开，取出，晾干，喷以碘化铋钾试液，日光下观察斑点数量及颜色深浅。

1.6 青藤碱的含量测定

1.6.1 色谱条件

色谱柱：Agilent HC-C18(4.6 mm×250 mm，5 μm，美国安捷伦科技公司提供)；流动相：甲醇-磷酸盐缓冲液(0.005 mol/L磷酸氢二钠溶液，以0.005 mol/L磷酸二氢钠调节pH值至8.0，再用体积分数为1%的三乙胺调节pH值至9.0，二者体积比为55∶45)；检测波长为262 nm；流速为1.0 mL/min；柱温为室温；进样量为5 μL。

1.6.2 对照品溶液的制备

取青藤碱对照品19.8 mg，精密称定，加入甲醇制成1 mL含0.5 mg青藤碱的溶液，作为对照品溶液。

1.6.3 供试品溶液的制备

精密称取青风藤配方颗粒和传统汤剂颗粒约0.5 g，置于具塞锥形瓶中，加入体积分数为70%的乙醇20 mL，称定质量。超声20 min，放冷，再称定质量。用体积分数为70%的乙醇补足减失的质量，摇匀，用0.45 μm滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液。

1.6.4 色谱系统适用性试验

按照“1.6.1”条件进样检测，青藤碱的保留时间为8.543 min，理论塔板数大于5 000，分离度良好。青藤碱对照品、青风藤配方颗粒及青风藤传统汤剂的高效液相色谱图见图1。

图1 青风藤HPLC色谱图Fig.1 HPLC chromatogram of Caulis Sinomenii

2 结果与讨论

2.1 配方颗粒制备工艺的筛选

本实验从提取次数A、加水量B、提取时间C共3个水平，通过正交试验优选制备工艺条件，实验设计及结果见表1—表3。

表1 正交试验因素水平Tab.1 Factors and levels of orthogonal experiment

表2 正交试验结果分析Tab.2 Results of orthogonal experiment

注：正交试验中提取次数与加水量的关系如下：若A=1，B1=12倍水，B2=18倍水，B3=24倍水；若A=2，B1=5倍水和7倍水，B2=10倍水和8倍水，B3=13倍水和11倍水；若A=3，B1=5倍水、4倍水和3倍水，B2=8倍水、6倍水和4倍水，B3=10倍水、8倍水和6倍水。

表3 出膏率方差分析Tab.3 Analysis of the variance of the ratio of extraction

表2直观分析的结果表明，各因素的影响效果依次为A>B>C，优选方案为A3B3C2。由于目前无法权重出膏率和青藤碱含量对于提取条件哪个影响更大，因此引入了“转移率”概念(转移率=有效成分含量×出膏率)，为进一步深入研究提供实验依据。

为了更好地应用于未来的工业化生产，本文仅就出膏率对提取条件的影响进行了简单分析。出膏率方差分析结果表明，提取次数的影响最大，具有显著性差异，加水量和提取(煎煮)时间无显著性差异。在出膏率、青藤碱含量及转移率无明显差异时，应综合考虑生产成本、人工、能耗等因素，最终建议选择A2B2C2，即提取2次，加水量18倍(第1次加水量为10倍、第2次加水量为8倍)，各煎煮1.0 h。

2.2 薄层条件的筛选

若选用甲苯-乙酸乙酯-甲醇-水(四者体积比为2∶4∶2∶1)于10 ℃放置的上层溶液作为展开剂，会发现原点较深；若将展开剂极性调大，甲苯-乙酸乙酯-甲醇-水的体积比为2∶4∶3∶1，色谱斑点数量增多且清晰，展开效果较好。因此本实验最终选择甲苯-乙酸乙酯-甲醇-水(四者体积比为2∶4∶3∶1)为展开剂。薄层色谱图见图2，其中1，2，3，4，5为配方颗粒；7，8，9，10，11为传统汤剂。

图2 青风藤配方颗粒、传统汤剂薄层色谱图Fig.2 TLC of formula granules and traditional decoction of Caulis Sinomenii

结果显示青风藤配方颗粒供试品溶液与传统汤剂供试品溶液斑点数量、色泽深浅基本一致，两者化学成分种类无显著差异。

2.3 样品含量测定

按供试品溶液配制方法分别配制配方颗粒和传统汤剂供试品溶液各5份。精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 μL，按照“1.6.1”条件进样测定，计算青藤碱的含量，结果见表4。

表4 青风藤配方颗粒、传统汤剂实验结果Tab.4 Experimental results of formula granules and traditional decoction ofCaulisSinomenii

3 结 论

1)对青风藤配方颗粒制备工艺进行了筛选，综合考虑出膏率、转移率、生产成本、能耗等因素，确定了青风藤配方颗粒的最佳制备工艺：浸泡1.0 h，提取次数2次，加水量分别为10倍、8倍，提取时间各1.0 h，不加辅料。从源头出发降低了制剂成本，为解决中药配方颗粒价格比传统饮片高的问题提供实验参考依据。

2)对青风藤配方颗粒和传统汤剂进行了比较分析，采用薄层色谱定性比较了不同极性的化学成分。结果表明，青风藤配方颗粒供试品溶液与传统汤剂供试品溶液显示相同斑点，两者化学成分种类无显著差异。

3)采用高效液相色谱法比较了青藤碱的含量，5批青风藤配方颗粒青藤碱平均含量为1.49%，5批青风藤传统汤剂青藤碱平均含量为0.92%。结果表明，青风藤配方颗粒青藤碱含量大于传统汤剂青藤碱的含量，为解决中药配方颗粒与传统汤剂化学成分和疗效差异问题提供了实验参考依据。

4)国家应综合分析各地配方颗粒的应用现状，建立统一标准，解决中药配方颗粒质量监管等问题。只有解决了这些问题，才能加快中药配方颗粒在中国的发展步伐。

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Preparation of formula granules ofCaulisSinomeniiand comparison between formula granules and traditional decoction ofCaulisSinomenii

ZHAO Fanfan， WANG Jiaojiao， LI Lili， LI Jianchen， HA Jing

(School of Chemical and Pharmaceutical Engineering, Hebei University of Science and Technology, Shijiazhuang, Hebei 050018, China)

In order to study the preparation ofCaulisSinomeniiformula granules and conduct qualitative and quantitative comparison of formula granules and traditional decoction, by adopting dry granulating and taking the ratio of extraction and the contents of sinomenine as indexes, the paper uses the orthogonal test method to prepareCaulisSinomeniiformula granules. TLC is used for qualitative comparison, and HPLC is used for quantitative comparison withSinomenineas reference substance. The results show that the best preparation of formula granules is adding 18 times water(the first added amount is 10 times, and the second added amount is 8 times) and extracting 2 times for 1.0 hour respectively. The sinomenine contents of 5 group of formula granules are 1.56%, 1.58%, 1.31%, 1.20% and 1.78%. The sinomenine contents of the 5 group of trdaditional decoction ofCaulisSinomeniiare 0.94%, 0.96%, 0.85%, 0.82% and 1.02%. The result shows that the chemical constituents of the formula granules and the traditional decoction are similar, but the contents of sinomenine are different.

chemical analysis;CaulisSinomenii; formula granules; traditional decoction;Sinomenine

1008-1534(2016)06-0479-05

2016-07-23;

2016-10-08；责任编辑：张士莹

河北省食品药品监督管理局科技项目(ZD2015025)

赵帆帆(1992—)，女，河北石家庄人，硕士研究生，主要从事中药制剂方面的研究。

哈 婧教授。E-mail：hajing02@163.com

R283；

A

10.7535/hbgykj.2016yx06007

赵帆帆, 王娇娇, 李丽丽，等.青风藤配方颗粒的制备及与传统汤剂的比较[J].河北工业科技,2016,33(6):479-483. ZHAO Fanfan, WANG Jiaojiao,LI Lili， et al. Preparation of formula granules ofCaulisSinomeniiand comparison between formula granules and traditional decoction ofCaulisSinomenii[J].Hebei Journal of Industrial Science and Technology,2016,33(6):479-483.