加工番茄溃疡病药剂防治的室内毒力测定及田间药效研究

司天桃，薛 林，贾会娟，杨德松

（1.石河子大学农学院／新疆绿洲农业病虫害治理与植保资源利用自治区普通高校重点实验室，新疆石河子 832000；2.新疆石河子蔬菜研究所，新疆石河子 830000）

加工番茄溃疡病药剂防治的室内毒力测定及田间药效研究

司天桃1，薛 林2，贾会娟1，杨德松1

（1.石河子大学农学院／新疆绿洲农业病虫害治理与植保资源利用自治区普通高校重点实验室，新疆石河子 832000；2.新疆石河子蔬菜研究所，新疆石河子 830000）

【目的】筛选出防治加工番茄溃疡病高效、低毒的药剂，为防治加工番茄细菌性溃疡病提供科学依据。【方法】通过室内毒力测定和田间药效测定方法，测定9种杀菌剂防治加工番茄细菌性溃疡病的效果。【结果】供试9种杀菌剂中，46%氢氧化铜的抑菌效果最好，EC50最小，为15.1 μg／mL。氯溴异氰尿酸的抑菌效果最差，EC50最大，为682.3 μg／mL。田间试验结果表明，2 500μg／mL 46%的氢氧化铜（可杀得三千），氢氧化铜（53.8%）对番茄溃疡病防治效果较好，达到50%～80%；400 μg／mL氯碘霉素，200 μg／mL N－N－二辛基二乙烯三肟，300 μg／mL农用硫链霉素，效果次之，防效为50%左右，春雷霉素易对番茄产生药害。【结论】施用46%的氢氧化铜（可杀得三千）、53.8%氢氧化铜，对番茄溃疡病防治效果好，且对番茄安全，禁止施用春雷霉素。

加工番茄；杀菌剂；番茄溃疡病菌；防效

0 引 言

【研究意义】新疆是中国最大的加工番茄产区，常年种植面积占全国90%以上［1］。近年来番茄溃疡病（tomato bacterial canker）日益严重，严重影响了加工番茄产量和品质，给加工番茄产业造成了巨大的经济损失，制约了区域经济的发展。番茄溃疡病严重危害时，造成造成的损失可达80%以上。种植抗病品种是防治该病害最简单、经济、有效的方法，但是市场上目前尚对番茄细菌性溃疡病表现出抗病、免疫、或者是耐病的品种，针对该病的防治，化学防治措施仍然占主导地位，也是最快捷、高效的措施，因此有必要针对市场上防治该病的杀菌剂进行筛选，以便生产提供理论依据。【前人研究进展】李春等［2］报道了该病害，确定该病菌的菌落有两种颜色—黄色和乳白色，并且都有较强的致病性。张国丽等［3］通过对供试菌株进行致病性测定、PCR检测确定了奎屯和石河子地区加工番茄上发生的病害为番茄溃疡病，其病原为密执安棒形杆菌密执安亚种（Clavibacter michiganensis subsp. Michiganensis）。番茄溃疡病是一种维管束系统病害，整个植株均可发病，典型的病株一侧叶片或顶叶开始萎蔫，叶缘上卷，叶片逐渐变褐枯死。茎、叶柄、枝条上产生褐色斑，表皮开裂呈溃疡状，病茎髓部呈褐色、溃烂。果实受害，开始呈现白色小疱状斑，以后病斑中心变成褐色，粗糙略呈突起，边缘为白色的晕圈似“鸟眼状”叶片被害时产生白色小疱状斑，后期变淡褐色［5］。【本研究切入点】目前没有找到番茄溃疡病的高抗品种，国内外对该病主要依赖化学防治。常用的防治药剂包括铜制剂、抗生素类、代森锰锌等［6］，但这些药剂均限于发病初期使用，防治效果也不是很好。在抗病育种过程中，美国虽然在栽培番茄品种中发现了一些对溃疡病有抗性或耐病性品种，但仍还没有选育出具有商业价值的抗溃疡病番茄品种［7］。【拟解决的关键问题】研究针对市场上防治植物病原细菌的常用药剂，采用室内毒力测定和田间试验的方法，筛选出高效、低毒、安全的药剂。寻求最佳的化学防治措施，减少加工番茄溃疡病危害造成的损失，为新疆加工番茄溃疡病的防治实践提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材 料

供试品种为加工番茄里格尔（87－5）；供试药剂：2%春雷霉素水剂（陕西先农生物科技有限公司）、72%农用硫酸链霉素可溶性粉剂（成都惠普生物工程有限公司）、5%井冈霉素水剂（正红（品牌）股份有限公司）、53.8%氢氧化铜水分散粒剂（郑州志信农化有限公司）、46%氢氧化铜水分散粒剂（可杀得三千，上海杜邦农化有限公司）、78%波尔锰锌可湿性粉剂（美国仙农有限公司）、50%氯溴异氰尿酸可溶粉剂（河南银田精细化工有限公司）、85%三氯异氰尿酸可溶粉剂（天津百胜化工有限公司）、1.8%辛菌胺水剂（山西美源化工有限公司）。供试药剂设定 5个浓度。表1

表1 9种供试药剂及浓度Table 1 Concentration of nine kinds of supplied test fungicides

1.2 方 法

1.2.1 室内毒力测定

采用抑菌圈法进行测定。将分离纯化后在KB培养基上28℃培养48 h的病菌用无菌水制成108～109cfu／mL的菌悬液，取 3环于平板上涂抹均匀，然后将用无菌水配制的供试药液用移液器取20 μL滴于直径0.6cm的无菌滤纸片上，使滤纸片完全浸湿，再放置于涂有菌的平板上，每皿等距离放滴有不同浓度梯度药液的滤纸片3片，28℃下培养48 h后，十字交叉法测量抑菌圈的直径。以药剂浓度转换为对数值，抑菌圈的平均直径为因变量，求出毒力回归方程，并使抑菌圈直径达到一定值（试验以1.0 mm为基准）时的药剂有效浓度进行毒力比较。参照使用说明中提供的田间用药浓度，每种供试药剂按有效成分设5个浓度，每个处理重复3次，以无菌水为对照［10］。

1.2.2 田间药剂筛选

试验设置在石河子大学试验站和石河子北泉镇，试验按照表1共设置5个浓度梯度，并有清水对照；每隔7 d喷药1次，连续喷药2次。喷药前调查病级，分别于药后7d、第2次喷药后的10、25 d调查，共调查4次。采用随机区组设计，每个药剂设3个重复，调查时每个小区选取5株调查，共48个小区，小区面积为20m2。试验从播种到收获管理措施同大田一致。

1.3 数据统计

分别记录番茄病害各级株数和总株数，计算病情指数和防治效果，病情分级采用5级分级标准进行［8］：

0级，不出现叶片萎蔫或茎坏死；

1级，叶片轻度萎蔫或变黄；

2级，叶片中度萎蔫或轻度坏死；

3级，叶片严重萎蔫或严重坏死；

4级，植株死亡；

病情指数＝Σ（各级病株×各级代表数值）× 100／（样本总数×最高级代表数值）。

式中：T0为防治区初始病情指数，T为防治区终期病情指数，CK0为对照区初始病情指数，CK为对照区终期病情指数。

2 结果与分析

2.1 9种药剂对加工番茄溃疡病菌的室内毒力测定

研究表明，各供试药剂，随着浓度的增加，抑菌圈逐渐增大，当浓度达到一定程度，抑菌圈增大不明显。其中46%的氢氧化铜（可杀得三千）、春雷霉素的抑菌圈最大，53.8%氢氧化铜次之，其他药剂抑菌圈都较小，氯碘霉素和农用硫链霉素无抑菌圈。表2

表2 9种药剂对加工番茄细菌性溃疡病菌的室内毒力测定Table 2 The toxicity determination in lab for nine fungicide against bacterial canker pathogen of processing tomato

2.2 田间药效试验

研究表明，除氯碘霉素与农用硫链霉素外，各药剂防效均随时间的增加而降低，第一次喷药后7 d 1 500 μg／mL 46%氢氧化铜（可杀得三千）效果最好，防效将近达到80%，除此以外，只有1 500 μg／mL氯溴异氰尿酸，防效大于70%，第二次喷药7 d后，1 500 μg／mL 46%氢氧化铜（可杀得三千）效 果最好，只有 2 000 μg／mL氢 氧化 铜（53.8%）、1 500 μg／mL氯溴异氰尿酸、300 μg／mL农用硫链霉素效果防效大于 60%，第三次喷药7 d后，是1 500 μg／mL 46%氢氧化铜（可杀得三千）效果最好，防效为70%，其它药剂防效均未达到 60%。400 μg／mL氯碘霉素、1 500 μg／mL波尔锰锌N－N二辛基二乙烯三肟、1 500 μg／mL三氯异氰尿酸效果较差，每次调查防效均未高于50%。大多数参试药剂施药后初期药效表现较好，但是随着田间番茄溃疡病的发生趋于严重，防效逐渐降低。表3

表3 供试药剂田间防治效果比较Table 3 The control efficiency of eight kinds of fungicides supplied in the filed

3 讨 论

由密执安棒形杆菌密执安亚种病原菌引起的加工番茄溃疡病严重影响了加工番茄的产量。带菌种子是远距离传播主要途径，种子带菌率可达1%［9－10］。加强种子检疫、种苗检验是预防和控制该病发生的重要措施。目前，防治细菌性溃疡的化学药剂有农用抗生素和铜制剂等，但是长期使用抗生素，容易造成细菌对抗生素产生抗药性，并且抗生素在农产品和动物制品中的富集从而威胁人类健康问题，人们越来越关注其潜在风险还要结合其他防治方法［11－12］，室内测定春雷霉素抑菌效果较好，但是在田间效果表现不明显。无论是高浓度还是低浓度的春雷霉素在大田中对番茄产生药害，加工番茄都出现了叶片枯焦、植株死亡等症状，因此不能作为防治番茄溃疡病的杀菌剂施用。供试药剂中也发现了室内结果和大田数据表现不一致的现象，例如300 μg／mL农用硫链霉素在室内抑菌试验中对溃疡病病原菌无抑制效果，但在田间试验中却表现出较好的防治效果。室内数据和田间试验结果差异很大，其原因是室内毒力测定仅仅是药剂对病原菌作用的结果，是在环境比较稳定的条件下进行的测试；而田间试验受到温度、湿度、光照、寄主植物等多种因素影响。室内毒力测定可以作为农药选择的指导；田间药效是衡量实际效果的标准。因此，通过田间筛选出加工番茄细菌性溃疡病的防治药剂为保证加工番茄的安全生产提供了保证。

4 结 论

46%氢氧化铜（可杀得三千）抑菌效果最好，在田间试验中也是表现出同样的效果。室内测定400 μg／mL氯碘霉素无抑菌圈，在大田试验中防治效果也是最差。防治加工番茄细菌性溃疡病推荐46%的氢氧化铜（可杀得三千）1 500 μg／mL进行防治，其具有防效好、持效期长的特点，且对加工番茄安全；不推荐使用氯碘霉素、波尔锰锌、N－N二辛基二乙烯三肟、三氯异氰尿酸以及春雷霉素。番茄溃疡病的化学防治，推荐氢氧化铜（53.8%）、46%的氢氧化铜（可杀得三千）这2种药剂作为防治加工番茄细菌性溃疡病的防治药剂。

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［1］崔元玗，杨华，孙晓军，等.新疆番茄细菌性病害研究初报［J］.新疆农业科学，2005，42（4）：229－231. CUI Yuan－yu，YANG Hua，SUN Xiao－jun，et al.（2005）. Studies on bacteriai diseases of tomato in Xinjiang［J］.Xinjiang Agricultural Sciences，42（4）：229－231.（in Chinese）

［2］李春，金潜，李国英，等.新疆加工番茄溃疡病的发生及其病原鉴定［J］.新疆农业科学，1995，（5）：221－224. LI Chun，JIN Qian，LI Guo－ying，et al.（1995）.Occurrence and Identification of Bacterial Canker of Processing Tomatoes in Xinjiang［J］.Xinjiang Academy Sciences，（5）：221－224.（in Chinese）

［3］张国丽，任毓忠，赵文，等.新疆加工番茄溃疡病的发生及其病原菌研究［J］.新疆农业科学，2011，48（5）：848－852. ZHANG Guo－li，REN Yu－zhong，ZHAO Wen，et al.（2011）.Occurrence and Identification of Bacterial Canker of Processing Tomatoes in Xinjiang［J］.Xinjiang Agricultural Sciences，48（5）：848－852.（in Chinese）

［4］Gleason，M.L.，Gitaitis，R.D.，＆Ricker，M.D.（1993）. Recent progress in understanding and controlling bacterial canker of tomato in eastern north america.Plant Disease，77（11）：1，069－1，076.

［5］赵廷昌，王克，白金恺，等.东北地区番茄细菌性溃疡病的发生和端原菌鉴定研究［J］.植物病理学报，1993，23（1）：29－34. ZHAO Ting－chang，WANG Ke，BAI Jin－kai，et al.（1993）. Occurrence and Diagnosis of Tomato Bacterial Canker in Northerneast China［J］Acta Phytopathologica Sinica，23（1）：29－34.（in Chinese）

［6］胡俊，塔娜，胡宁宝，等.内蒙古西部地区番茄溃疡病发生特点及防治对策［J］.内蒙古农业科技，1998，（增刊）：147－148. HU Jun，Tana，HU Ning－bao，et al.（1998）.Objective to Characteristics and Control Strategies of Tomato Canker［J］.Inner Mongolia Agricultural Science and Technology，（Suppl.）：147－148.（in Chinese）

［7］罗来鑫，赵廷昌，李健强，等.番茄细菌性溃疡病研究进展［J］.中国农业科学，2004，37（8）：1 144－1 150. LUO Lai－xin，ZHAO Ting－chang，LI Jian－qiang，et al.（2004）.Progress in Research on Bacterial Canker of Tomato Caused by Clavibacter michiganensis subsp.Michiganensis［J］. Scientia Agricultura Sinica，37（8）：1，144－1，150.（in Chinese）

［8］方中达.植病研究方法［M］.北京：中国农业出版社，1998：192－193. FANG Zhong－da.（1998）.Plant Disease Research［M］.Beijing：Chinese Agriculture Press：192－193.（in Chinese）

［9］Frenkel，O.，Bornestein，M.，Shulhani，R.，Sharabani，G.，Sofer，M.，＆Abo－Moch，F.，et al.（2016）.Secondary spread of clavibacter michiganensis，subsp.michiganensis，in nurseries and the conditions leading to infection of tomato seed-lings.European Journal of Plant Pathology，144（3）：569－579.

［10］Sen，Y.，Feng，Z.，Vandenbroucke，H.，Wolf，J.V.D.，Visser，R.G.F.，＆Heusden，A.W.V.（2012）.Screening for new sources of resistance to clavibacter michiganensis，subsp. michiganensis，（cmm）in tomato.Euphytica，190（2）：309－317.

［11］Utkhede，R.，＆Koch，C.（2004）.Biological treatments to control bacterial canker of greenhouse tomatoes.Biocontrol，49（3）：305－313.

［12］Lanteigne，C.，Gadkar，V.J.，Wallon，T.，Novinscak，A.，＆Filion，M.（2012）.Production of dapg and hcn by pseudomonas sp.lbum300 contributes to the biological control of bacterial canker of tomato.Phytopathology，102（10）：967－973.

Toxicity and Efficacy Evaluation of Nine Fungicides against Clavibacter michiganensis subsp．Michiganensis of Processing Tomato

SI Tian－tao1，XUE Lin2，JIA Hui－juan1，YANG De－song1
（1．College of Agronomy，Shihezi University／Key Laboratory for Oasis Agricultural Pest Management and Plant Resource Utilization at Universities of Xinjiang Uygur Autonomous Region，Shihezi Xinjiang 832003，China；2．Shihezi Vegetalte Institute of Xinjiang，Shihezi Xinjiang 832000）

【Objective】The experiment was designed to screen better prevention and treatment to Clavibacter michiganensis subsp.Michiganensis．【Method】The toxicity determination in lab and field efficacy test of six fungicides against C．michiganensis were conducted using by paper plates.【Result】Laboratory test results showed that 46%cupric hydroxide EC got minimum value of EC50（15.1μg／mL），while Chloroisobromine cyanuric acid EC got maximum value of EC50（682.3 μg／mL）.Field test results indicated the best control effect of fungicides was 46%cupric hydroxide（cocide thousand）and 53.8%cupric hydroxide was the best，which was 50%－80%.The control effect of chlorine Iodine neomycin，N－N－dioctyl ethylene three oxime，agricultural sulfur streptomycin was followed with the control efficiency about 50%.Kasugamycin may easily cause injury to Tomato.【Conclusion】Alternate use 46%or 53.8%cupric hydroxide was suggested for the control of C.michiganensis in processing tomato field，which had good control effect on Tomato ulcer disease and was safe to tomato，and kasugamycin was not recommended.

processing tomato；Fungicide；Clavibacter michiganensis subsp.Michiganensis；control effects

S482.2；S436.412.1

A

1001－4330（2016）09－1647－05

10.6048／j.issn.1001－4330.2016.09.011

2016－04－20

兵团博士资金项目“麦后复播加工番茄主要病害的发病机制及防治研究”（2011BB007）

司天桃（1988－），女，硕士研究生，研究方向为农药毒理学，（E－mail）1643624740＠qq.com

（Cotresponding author）：杨德松（1977－），男，副教授，博士，研究方向为农药毒理学，（E－mail）yds_agr＠shzu.edu.cn

Fund project：Doctoral fund of the XPCC＂Study on the pathogenesis and control of main diseases in processing tomatoes after wheat harvest.（2011BB007）＂