盐酸小檗碱对T2DM大鼠血内毒素的干预研究

贺娅莎 王 彦

（山西医科大学第一医院，山西 太原 030001）

盐酸小檗碱对T2DM大鼠血内毒素的干预研究

贺娅莎 王 彦

（山西医科大学第一医院，山西 太原 030001）

目的研究小檗碱对T2DM大鼠血内毒素的影响及意义。方法58只大鼠随机分为:对照组、T2DM组。14周后，将成模的T2DM组又分为：单纯饮食组（A组）、小檗碱组（B组）；于4、8、14、22周时处理大鼠，同期设对照组（n=6）。利用生化法测定相应指标。结果①成模过程中，T2DM组比NC组所测指标升高（P＜0.05）；②干预后A、B组大鼠指标降低，高于NC组（P＜0.05），B组较A组明显（P＜0.05）。结论盐酸小檗碱可以改善体内炎症水平，进而治疗T2DM。

2型糖尿病；内毒素血症；胰岛素抵抗；盐酸小檗碱

随着人民生活方式的改变，肥胖症的发生率逐年上升，已有研究表明，肥胖是引发糖尿病等代谢性疾病的主要诱因。2型糖尿病具有较高致残及致死率，已经成为全世界严重危害公共社会健康的疾病之一。目前研究发现，糖尿病和肥胖这两种代谢性疾病是以胰岛素抵抗和慢性低度全身性炎症为特征的[1]；小檗碱（又名黄连素）作为临床上长期使用于抗肠道细菌感染的药物，其对糖尿病降糖效果还未广为应用。本实验旨在检测大鼠血浆内毒素水平,探讨盐酸小檗碱对代谢性内毒素血症的保护作用，为临床治疗肥胖和胰岛素抵抗等相关疾病提供一点新的治疗依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料：健康雄性SD大鼠64只[6～8周，体质量（180±20）g]由山西医科大学生理实验室提供及饲养。高糖高脂饲料组成成分：基础饲料65%、猪油10%、蔗糖15%、干蛋黄10%。适应性喂养1周后，随机分两组:对照组（NC组，n=24）和T2DM组（T2DM组，n=40）。NC组大鼠普通饲料喂养。T2DM组大鼠经高糖高脂膳食喂养12周后，隔夜禁食8 h给予腹腔注射药物链脲佐菌素（STZ）30 mg/kg，之后每2 d于鼠尾静脉取血测空腹血糖（FBG），连续2次以上FBG＞7.8 mmol/L，即认为造模成功。将成模的2型糖尿病大鼠随机分为单纯饮食组（干预Ⅰ组，n=6，改为普通饲料喂养）、小檗碱联合饮食治疗组[干预Ⅱ组，n=6，改为普通饲料喂养，同时给予盐酸小檗碱200 mg/（kg•d）灌胃]、继续高糖高脂饮食喂养组（简称干预Ⅲ组，n=6，高糖高脂饲料喂养）。

1.2 实验方法

1.2.1 标本采集：T2DM大鼠成模高糖高脂饲料喂养第4、8周时，及成模后第14周，分别随机选取NC组和T2DM组各6只大鼠，禁食8 h后给予20%乌拉坦4 mL/kg的剂量腹腔注射麻醉大鼠后，测定大鼠体质量，无菌环境下开腹，采血，分离血浆、血清置EP管内，存于-80 ℃冰箱，样本集齐后统一处理。

1.2.2 检测方法：上述血标本同批测定以下指标，试剂显色基质法测血浆内毒素（LPS），免疫浊度法测血清C反应蛋白（CRP）、谷丙转氨酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆固醇（TC）、血三酰甘油（TG）、空腹血糖（FBG），放免法测空腹胰岛素（FINS），计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR），计算公式：FPG（mmol/L）×FINs（mIU/L）/22.5。

1.3 统计学处理：采用SPSS 17.0软件包进行统计分析，定量数据以（x-±s）表示，定性资料用率或构成比表示。不同组间各指标均数的比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD法；不同组间不同时间点各指标的比较采用析因设计资料的方差分析；指标间相关性分析采用Pearson相关。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 T2DM大鼠成模过程中：①第4周末，与NC组相比，T2DM组大鼠体质量增加，FPG、FINS及HOMA-IR无明显变化， ALT、TG、CRP、LPS水平升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。②第8周末，与NC组相比，T2DM组大鼠体质量增加，FPG、FINS及HOMA-IR水平轻度增高，ALT、TG、CRP、LPS均升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。③T2DM大鼠成模时，与NC组相比，T2DM组大鼠毛色无光泽，活动少，体质量增加较为显著，FPG、FINS显著升高，HOMA-IR增大，ALT、TG、CRP、LPS显著升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.2 造模成功后各组的情况：即第22周末，①与干预Ⅲ组相比，干预Ⅰ组大鼠体质量、FPG、HOMA-IR、ALT、TG、CRP、LPS均低于干预Ⅲ组（P＜0.05），高于NC组（P＜0.05）。②与干预Ⅲ组相比，干预Ⅱ组大鼠体质量、FPG、HOMA-IR、ALT、TG、CRP、LPS有显著下降，差异有统计学意义（P＜0.05）；高于NC组（P＜0.05）。③与NC组比较，干预Ⅲ组大鼠体型肥硕，无活动，小便增多，体质量、FPG、FINS、HOMA-IR、ALT、TG、CRP、LPS均显著增高（P＜0.05）。干预后各组大鼠FPG、FINS、HOME-IR的变化。

3 讨 论

肥胖和糖尿病是胰岛素抵抗和全身慢性低度炎症性为特征的两种代谢性疾病，LPS则是参与早期全身炎症级联反应的触发因子。Cani等发现，高脂喂养4周的小鼠 LPS浓度升高了2～3倍，本实验经过高糖高脂喂养，发现大鼠的体质量增加，炎性因子CRP、LPS随着喂养时间的延长逐渐增高，这与Cani的研究一致，说明高脂饮食喂养后的大鼠体内存在着慢性低度炎症。随着造模时间的延长，于实验第14周成模时，大鼠的CRP、LPS、FPG、FINS、HOMA-IR增高，说明成模的大鼠体内伴发着胰岛素抵抗与慢性低度炎症。22周时，大鼠的体质量进一步增加，LPS与胰岛素抵抗程度加重，说明高脂饮食诱发的代谢性内毒素血症，致使的全身性慢性炎症与肥胖、胰岛素抵抗密切相关。

小檗碱是存在于黄连、黄柏等药材中的主要生物碱，临床上长期用于抗肠道细菌感染，现代药理研究发现它还有抗心律失常、扩张冠状血管、降血糖、降血脂、减轻体质量等多种作用。近年来动物实验及临床疗效观察均证实，小檗碱能安全、有效地降脂、降糖、减轻体质量等。但其对糖尿病的发生机制尚不明确，本实验的研究结果中，可以得出：经过小檗碱与单纯饮食干预后的大鼠炎症水平下降，胰岛素抵抗程度减轻；小檗碱表现明显；说明小檗碱对代谢性内毒素血症及系统性炎症有保护作用。Eva Tomas 还研究发现，高脂饮食可迅速改变肠道菌群的结构，但当其转变为正常饮食后，肠道菌群的结构则可以完全恢复，表明成年小鼠肠道菌群结构具有高度的弹性，饮食治疗后，肠道菌群结构改善，随着G-的减少体内LPS减少，因此可以得出，饮食于肥胖、糖尿病等代谢性疾病中起着至关重要的作用。

总之，代谢性内毒素血症引起的慢性低度炎症伴随着肥胖和2型糖尿病等代谢性疾病的发生发展。本实验研究可以得出：小檗碱作为一种临床上长期抗肠道感染的药物，可通过改善血浆内毒素水平，从而改善胰岛素抵抗。为2型糖尿病及肥胖的控制、治疗提供新的理论依据和新的治疗途径。

[1] 艾正琳.黄芩苷、苦参碱、小檗碱对NASH大鼠的治疗作用及对L-FABP的影响与机制研究[D].北京:北京协和医学院,2012.

R587.1 文献标识码：B 文章编号：1671-8194（2017）23-0026-02