自然流产患者封闭抗体检测及相应免疫治疗的对策分析

孙 智

（大连市妇女儿童医疗中心遗传基因诊断实验室，辽宁 大连 116001）

自然流产患者封闭抗体检测及相应免疫治疗的对策分析

孙 智

（大连市妇女儿童医疗中心遗传基因诊断实验室，辽宁 大连 116001）

目的 分析复发性自然流产（RSA）患者采用淋巴细胞主动免疫治疗的临床效果及治疗前后封闭抗体（BA）指标的检测变化及对再次妊娠的临床价值。方法以 2010 年 8 月至 2014 年 7 月在我院妇产科就诊的 520 例复发性自然流产患者为对象，采用酶联免疫法（ELISA）对这些患者的封闭抗体进行测定，从中选取480例封闭抗体阴性患者为研究对象，实行淋巴细胞主动免疫疗法，经过2 个疗程治疗后，再次测定封闭抗体的变化情况及再次妊娠的情况。结果520 例复发性自然流产患者中封闭抗体阳性率为 7.69%（40/520×100%）。从中选取的 480 例封闭抗体阴性患者经过 1 个疗程的淋巴细胞主动免疫治疗后复测，封闭抗体阳性率为 75.00%（360/480×100%），经过 2 个疗程的淋巴细胞主动免疫治疗后再复测，封闭抗体阳性率为 90.60%（435/480×100%），与治疗前相比，P＜0.05，差异有统计学意义；经免疫治疗后，患者再次妊娠成功率为 91.28%（398/436× 100%），其中封闭抗体阳性患者再次妊娠成功率为 93.78%（392/418×100%），封闭抗体阴性患者再次妊娠成功率为 33.33%（6/18×100%），二者相比，封闭抗体阳性患者再次妊娠成功率明显高于封闭抗体阴性患者，P＜0.05，差异有统计学意义。结论采用淋巴细胞主动免疫对复发性自然流产患者进行治疗，能有效提高封闭抗体阳性率及再次妊娠成功率，对临床治疗复发性自然流产及提高再次妊娠率具有重要意义，值得临床推广应用。

自然流产；封闭抗体检测；免疫治疗；淋巴细胞

复发性自然流产（recurrent spontaneous abortion，RSA）是妇产科常见病，多发生于妊娠早期，其中有30%～40%RSA患者因不明原因而流产[1]。在这些不明因素中，以免疫因素为重。近年来，随着医学技术的快速进步及免疫学的高度发展，在20世纪70年代末人们将白细胞抗原（HLA）成功分型后，众多医学家们意识到：女性妊娠中的种种异常现象，比如RSA与HLA及其相关免疫应答密切相关。经过医学家们多年的临床经验，总结分析：RSA患者的封闭抗体（blocking antibody，BA）阳性率非常低，而临床采用患者配偶或健康第三者的淋巴细胞主动免疫来医治患者，能明显提升患者的再次妊娠率，增加患者的BA阳性率[2]。本文通过对BA阴性的RSA患者在采取淋巴细胞主动免疫治疗后的BA进行测定，观察BA在治疗前后的变化情况及患者再次妊娠的情况，现将探究结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：以2010年8月至2014年7月在我院妇产科就诊的520例复发性自然流产患者为对象，采用酶联免疫法（ELISA）对这些患者的封闭抗体进行测定，从中选取480例封闭抗体阴性患者为研究对象，排除生殖器官解剖异常、内分泌异常、夫妻双方胚胎染色体异常、生殖道感染等所致习惯性流产患者，患者丈夫精液经检查均正常。这些RSA患者年龄24～38岁，平均（30.7±3.5）岁，流产次数3～7次，平均4.3次；流产天数46～125 d，平均（70.1±4.8）d。所有患者及其丈夫、健康第三者在进行治疗前已签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 淋巴细胞主动免疫治疗：对480例BA阴性患者实行淋巴细胞主动免疫疗法。在选择淋巴细胞时，应优先选择患者配偶淋巴细胞，配偶经检查无梅毒螺旋体、艾滋病及肝炎病毒才可进行下一步。若患者配偶以上任一项无法达到，其淋巴细胞即无法使用。这时，应选择健康的第三者的淋巴细胞进行治疗。患者可自愿选择健康第三者，经检查排除肝炎病毒、艾滋病病毒、梅毒螺旋体等，且与患者无血缘关系条件下，才可提供血源。

选定好淋巴细胞提供者后，应在无菌环境下抽取供血者外周血30 mL，无菌操作下，取适量肝素抗凝来分离淋巴细胞，再将提取出的淋巴细胞制成悬液，浓度为（40～70）×106/mL；用一次性注射器抽取淋巴细胞悬液3 mL，对患者前臂的6～8个点进行皮下注射，30 min后，若注射局部出现水泡、红肿等不良反应，可实行抗感染、抗过敏及冷敷等来进行治疗。1疗程3次，3周注射1次。2个疗程结束后，再间隔2周复测BA。在治疗过程中，应注意避孕，一旦复测BA呈阳性，请尽快在6个月内受孕；一旦BA复测仍为阴性，主治医师可建议患者让健康的第三者为自己提供淋巴细胞，采取2次主动免疫治疗，疗程与上一次相同，同样也间隔2周复测BA。若确诊患者已怀孕，需继续实行1疗程淋巴细胞主动免疫来维持治疗，方法如上，孕16～20周才可停止。医护人员在为患者进行主动免疫疗法时，应提醒患者注意休息，保持情绪愉悦，且妊娠早期尽量避免性生活，还能及时观察妊娠早期反应。

1.2.2 BA测定 480例复发性自然流产：患者应在实行主动免疫治疗前后都测定BA。方法为：抽取患者2 mL外周血，无菌操作下，取适量肝素抗凝来分离淋巴细胞，采用ELISA法进行测定，测定试剂由北京普赞生物技术有限公司提供，严格按照试剂盒说明书进行操作。

1.3 妊娠成功判断标准及观察指标：①孕龄5个月以上，B超检查胎儿无任何异常或分娩正常成活婴儿为妊娠成功。②观察患者实行淋巴细胞主动免疫治疗后的不良反应。

1.4 统计学方法：所有数据均使用SPSS 19.0软件包处理分析，以均数±标准差（x-±s）表示计量资料数据，采用t检验比较，采用百分率表示计数资料，采用χ2检验组间对比，P＜0.05，差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 实施主动免疫前后BA变化情况：520例复发性自然流产患者实行主动免疫治疗前BA呈阳性者仅40例，阳性率为7.69%（40/520× 100%）；480例BA阴性反复性自然流产患者在采取主动免疫治疗1疗程后，BA阳性率为75.00%（360/480×100%）；余下的120例BA阴性患者继续进行1个疗程，2个疗程后复测，BA阳性率为90.60%（435/480×100%），与治疗前相比，P＜0.05，差异有统计学意义。

2.2 再次妊娠成功率：经主动免疫治疗后，480例BA阴性患者中444例患者再次妊娠，其中宫外孕者3例，孕龄不足5个月妊娠结果不清者6例，确认再次妊娠者435例，其中，孕龄未达5个月流产者37例再次妊娠成功率为91.49%（398/435×100%），均为单胎。其中，BA阳性者再次妊娠成功率为93.78%（392/418×100%），BA阴性患者再次妊娠成功率为33.33%（6/18×100%），二者相比，BA阳性患者再次妊娠成功率明显高于BA阴性患者，P＜0.05，差异有统计学意义。

2.3 不良反应：480例采取主动免疫治疗的患者在治疗过程中未出现任何皮疹、过敏反应、乙型肝炎、艾滋病等病症，胎儿宫内生长均为受限，产后新生儿无一畸形或出现血小板减少症。

3 讨 论

1976年，BA的缺失首次与妊娠关联到一起。经医学家们的多年研究，确认正常孕妇血清中存在BA。母体能正常维持妊娠，与母体免疫耐受及其他免疫调节作用有直接关系。免疫调节作用之一就是特异性抗体的封闭效应，即BA[3-5]。临床上，医学家们认为BA主要因胚胎人类白细胞抗原Ⅱ类抗原和滋养叶淋巴细胞交叉抗原（TLX）而产生。通过与胎儿胎盘滋养叶抗原结合或母体淋巴细胞结合，BA可成功阻止胚胎父系抗原遭到母体免疫系统的识别和损害。本文也通过数据及对比研究证实了以上观点的正确。

因此，对BA阴性复发性自然流产患者实行BA检测并采取对症治疗，能有效阻止流产发生，提高妊娠成功率，值得临床推广应用。

[1]刘娟,吴和英,谭宗建,等.反复自然流产患者封闭抗体检测及淋巴细胞免疫治疗的临床效果[J].医学临床研究,2012,29(8):1488-1490.

[2]侯哲,孔 欣 ,张娟辉 ,等.反 复自然流产患者封闭抗体 检测与免疫治疗分析[J].武警医学,2011,22(3):240-241.

[3]方伟祯,蔡振华,谢晓英,等.封闭抗体检测与反复自然流产患者主动免疫治疗的相关性分析[J].中国微生态学杂志,2014,26(9):1059-1061.

[4]王娜.反 复性自然 流 产不孕的封闭抗体 检验与治疗分析[J].当代医学,2015,21(28):39-40.

[5]黄永富,王冲.封闭抗体 检 测 在 复发性自然流产患 者淋巴 细胞 主动免疫治疗中的应用[J].黑龙江医学,2014,38(4):364-368.

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1671-8194（2017）02-0122-02