新型酵母培养物的制备及其在断奶仔猪生产上的应用研究

李帅

【摘 要】本文从传统酒曲和酸面团中分离出两株酿酒酵母，结合现代发酵工艺制备一种酵母培养物，并将其应用到仔猪生产中，观察其对仔猪生长性能、营养物质利用和粪便微生物的作用效果。

【关键词】酵母培养物；仔猪生产；宿主免疫功能

一、材料与方法

（一）材料

麦芽汁培养基，MRS琼脂培养基，麦康凯琼脂培养基，电热恒温培养箱，三目生物显微镜，立式高压蒸气灭菌锅，酒曲和酸面。

（二）方法

1.菌种分离鉴定

将酒曲和酸面团各10g分别加人200ml YPD液体培养基中，无菌条件下30℃培养24h后，摇匀，用无菌生理盐水梯度稀释，选取10-6、10-7、10-8 3个稀释度，准确吸取0.1ml稀释液均匀涂布于YPD固体培养基上，30℃恒温培养箱中培养48h，分别从两种曲剂中挑取一种类似酿酒酵母的典型单菌落于YPD液体培养基中，30℃下培养24h后划线分离2 ～ 3次，将纯培养物转YPD同体斜面培养基上培养12h后，置于4℃低温冰箱保藏。从酒曲和酸面团分离到的菌种分别标记为SY和JY。将分离到的菌种进行分子鉴定，确定菌种。

2.酵母培养物制备

利用YPD培养基分别接种两环纯化好的两种菌株于液体培养基中，30℃，200r/min摇床培养12h，得种子液。然后按照5%的添加量，将两种种子液分别添加到麦芽汁培养基中进行液体有氧发酵，30℃，200r/min摇床发酵24h。最后按10%的添加量将两种發酵液，以1：1的比例，添加到固体培养基中混匀，密封瓶口，放于30℃静置发酵48h。将所制得的酵母培养物均匀散于瓷盘中，放于室温，自然风干。粉碎过40-60目筛，即为复合酵母培养物。

3.YC对保育猪生长性能的影响

选择健康、平均体重为（15.7±0.26）kg的“杜×长×大”三元杂交生长猪90头，按体重、性别基本一致的原则随机分为2组，每组3个重复，每个重复15头。]对照组饲喂基础日粮；酵母培养物组饲喂基础日粮+5g/kg YC，试验期为35d。测定指标有平均日增重、平均日采食量、料重比、腹泻率、表观消化率以及肠道微生物。试验采用的基石出日粮为参照NRC（1998）配制的粉状饲料，饲料的常规原料根据猪场实际情况而定，其组成及营养水平见表1。采用SPSS 19.0软件的one-way ANOVA程序进行单因素方差分析，以Duncan氏法进行多重比较，P<0.05为差异显著。结果以平均值±标准差表示。

1）预混料为每千克饲粮提供：V A 20001U，V D 3750IU，V E 175mg，VB1 20mg，VB275mg，VB625mg，烟酰胺225rng，泛酸钙100mg，叶酸10mg，氧化胆碱3g，Cu 625mg， Fe 625mg，Zn 375mg，Mn 357mg，I 4mg，Se 0.6 mg，食盐12g。

2）均为实测值。

二、结果与分析：YC对保育猪生长性能的影响

实验结果表明，在仔猪日粮中添加YC可提高平均日增重7.2%，提高平均日采食量1.74%，降低料重比5.45%（P>0.05）。显著提高了仔猪对能量和干物质的消化率，且显著增加肠道乳酸菌数量，降低大肠杆菌数量，从而使仔猪腹泻率显著降低（P<0.05）。见表2、3、4。

三、讨论

本实验表明：YC组对平均日增重及采食量没有显著变化（P>0.05），但显著降低了仔猪的腹泻率（P<0.01）。YC可显著提高断奶仔猪对CP、干物质、能量的消化率（P<0. 05），钙、磷的消化率则不显著（P>0.05）。本试验研究结证实YC对总能和干物质消化率显著高于对照组（P<0.05），对有机物、粗蛋白、粗脂肪以磷消化低于对照组（P>0.05），而粗纤维和钙的消化则显著低于对照（P< 0.05）。

YC中酵母多糖抑制有害菌对肠道定植，且其中含的营养物质为肠道有益菌繁殖提供强大的动力，从而改善胃肠环境。但是YC组生长性能未见显著提高。