分光光度法测定豆芽中尿素含量

张 君，祝 军，郑凤娥

（沈阳食品检验所，沈阳 110136）

豆芽是大众经常食用的食品，但许多不法商家为了经济利益，在豆芽生长过程中非法添加尿素。人食用这种豆芽后，会在体内产生致癌物质亚硝酸盐。由于我国国家标准中未收录豆芽中尿素的检测方法，因此，在参考相关文献的基础上，根据多年工作经验，建立豆芽中尿素含量的检验方法，旨在为精确检测豆芽中的尿素含量提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

豆芽为市售；试剂均为分析纯，水为蒸馏水。

活性炭：在120℃烘箱中活化4 h。

磷酸盐缓冲溶液（pH＝7.0）：称取 3.40 g 无水磷酸二氢钾和4.35 g无水磷酸氢二钾，溶于100 mL水中，并用水定容至1 000 mL。

尿素标准溶液：准确称取0.2000 g经105℃干燥2 h的尿素，用磷酸盐缓冲溶液溶解并稀释至1 000 mL，浓度为 0.2 mg/mL，室温下贮存 10 d。

对二甲基苯甲醛 （DMAB）溶液：称取0.80 g DMAB，溶解于50 mL95%乙醇中，再加入5 mL盐酸，置于棕色瓶中，于室温下贮存1个月。

1.2 仪器与设备

TU-1810紫外可见分光光度计：北京普析通用仪器有限责任公司；AL204-IC电子天平：梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司；HY-4振荡机：常州翔天实验仪器厂；DHG-9145A电热鼓风干燥箱：上海一恒科技有限公司。

1.3 试验方法

1.3.1 样品前处理 将样品打碎后称取 20 g（精确至0.01 g），置于 100 mL 容量瓶中，加入 2.5 g（精确至0.01 g）活性炭，摇匀，加水至 80 mL 左右；在振荡机中振荡30 min，加水至刻度，摇匀；静置片刻后，用中速滤纸过滤，弃去最初约10 mL滤液，余下滤液作为试样溶液。同时做空白实验。

1.3.2 标准曲线绘制 准确吸取 0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，、5.00 mL 尿素标准溶液，分别置于 25 mL比色管中，加入磷酸盐缓冲溶液至5 mL，再加入5 mL DMAB，摇匀。室温下放置15 min后，用1 cm比色皿在波长430 nm处测定吸光度，并绘制标准曲线。

1.3.3 样品测定 吸取试剂空白滤液和试样滤液各5 mL，加入5 mLDMAB显色剂，在室温下放置15 min后，以试剂空白为参比，用分光光度计在波长为430 nm处测定吸光度。

1.3.4 尿素含量计算

尿素含量的计算公式为：

式中：X为品中尿素含量，mg/kg；C为尿素标准溶液浓度，mg/mL；V为从标准曲线上查得的尿毒体积，mL；m 为样品质量，g；V1为比色时吸取体积，mL；V2为样品定容体积，mL。

2 结果与分析

2.1 线性范围与检出限

2.1.1 线性范围 以尿素体积为横坐标、吸光度为纵坐标绘制标准曲线，确定线性方程和线性相关系数，结果见图1。

图1 尿素标准曲线Figure 1 The standard curve of urea

根据图 1确定的线性方程为：Y＝0.092 7X-0.001 5；线性相关系数为 R2＝0.999 4，表明尿素体积与吸光度有很好的相关性。

2.1.2 检出限 分别做20次试剂空白，按上述样品处理方法处理后测定吸光度。根据测定结果计算标准差，以3倍标准差除以标准曲线斜率作为检出限，确定方法的检出限为20 mg/kg。

2.2 回收率与精密度

2.2.1 回收率 采用加标测定回收率的方法计算回收率，测定结果如表1所示。

表1 回收率测试结果Table 1 Test results of the recovery rate

由表1中的数据可知，回收率的范围在91.7%～103.0%之间。

2.2.2 精密度 按照样品处理方法分别对2个样品平行测定6次，测定结果如表2所示。

表2 精密度试验结果Table 2 Test results of precision

由表 2可知，相对标准偏差为 1.83%～2.72%。

3 结论

通过试验建立分光光度法测定豆芽中尿素含量的方法。验证试验结果表明：该方法的检出限为20 mg/kg，回收率为 91.7%～103.0%，相对标准偏差为 1.83%～73.00%。此方法分析速度快，样品前处理简单，精确度和检出限均满足试验要求，可用于豆芽中尿素含量的测定。

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