尿液MCP-1浓度与小儿IgA肾病肾小管间质病变的相关性分析

张景秀，齐学良，刘亚萍，李学敏，徐本福，孙相国，杨军霞

(临沂市沂水中心医院小儿内三科，山东 沂水 276400)

尿液MCP-1浓度与小儿IgA肾病肾小管间质病变的相关性分析

张景秀，齐学良，刘亚萍，李学敏，徐本福，孙相国，杨军霞

(临沂市沂水中心医院小儿内三科，山东 沂水 276400)

目的 探讨尿液中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)与IgA肾病肾小管间质病变的关系。方法 选取2012年3月至2015年8月临沂市沂水中心医院小儿内三科进行肾穿刺活检确诊的98例原发性IgA肾病患儿进行回顾性研究，根据活检病理肾小管间质的损害程度分为：无病变组11例、轻度组41例、中度组32例、重度组14例，检测各组患儿尿液中MCP-1及相关指标并进行分析。结果 中度组、重度组IgA肾病患儿的收缩压、舒张压水平均显著高于无病变组、轻度组患儿，差异均具有统计学意义(重度组与无病变组的收缩压、舒张压水平比较，t值分别为4.119、5.820；中度组与轻度组比较，t值分别为4.613、5.714；重度组与无病变组比较，t值分别为2.668、2.914；重度组与轻度组比较，t值分别为2.257、2.573，均P<0.05)；无病变组、轻度组、中度组、重度组患儿的血肌酐、β2微球蛋白(β2-MG)、尿NAG、24h尿蛋白定量、尿MCP-1均呈逐渐升高的趋势，组间差异均具有统计学意义(F值分别为40.862、37.851、62.396、77.084、21.362，均P<0.05)；肌酐清除率在无病变组、轻度组、中度组、重度组患儿中呈逐渐降低的趋势，组间差异具有统计学意义(F=43.396，P<0.05)。肾小管间质的损害IgA肾病患儿的血肌酐、β2-MG、尿NAG、24h尿蛋白定量与尿MCP-1均呈显著的正相关关系(r值分别为0.671，0.598，0.664，0.692，均P<0.05)，肌酐清除率与尿MCP-1呈显著的负相关关系(r=-0.720，P<0.05)。结论 MCP-1能反应IgA肾病患儿肾小管间质病变的程度。

尿液；单核细胞趋化蛋白-1；IgA肾病；肾小管间质

IgA肾病是近年来临床上发病率较高的泌尿内科疾病，特别是在年龄小于14岁的人群中，IgA肾病的发病率可达0.5%以上，且具有逐年上升的趋势[1]。长期的IgA肾病的急慢性进展不仅可以导致血尿、蛋白尿、水肿或者高血压等临床表现，同时可引起肾小球损伤的不可逆改变，1.5%左右的患者可进展为慢性肾功能衰竭[2]。

虽然IgA肾病主要表现为肾小球系膜的免疫复合物的沉积等病理改变，但相关研究已经证实肾小球系膜间质成分的病理损伤在评估IgA肾病的疾病预后以及临床转归方面具有重要的价值，肾小管间质病变与疾病的病情变化及发生发展具有密切的联系。然而临床上对于肾小管间质病变的评估仍然以最终的病理诊断为依据，但病理检查属于有创检查，临床应用具有明显的局限性。单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotaxis protein-1，MCP-1)被发现与肾小管间质的纤维化、代偿性增生等病理过程相关[3]，本研究重在探讨尿液中MCP-1与IgA肾病肾小管间质病变的关系，进而为评估肾小管间质病变程度及IgA肾病的临床转归提供有效的临床参考。

1对象及方法

1.1对象及纳入排除标准

选取2012年3月至2015年8月临沂市沂水中心医院小儿内三科进行肾穿刺活检确诊的98例原发性IgA肾病患儿进行回顾性研究，根据活检病理肾小管间质的损害程度分为：无病变组11例、轻度组41例、中度组32例、重度组14例。

无病变组11例，男8例、女3例，年龄6～14岁，平均9.2±3.5岁，病程16.2±6.7个月。轻度组41例，男30例、女11例，年龄6～14岁，平均8.9±3.8岁，病程17.5±7.4个月。中度组32例，男25例、女7例，年龄6～14岁，平均9.6±3.8岁，病程16.8±7.2个月。重度组14例，男9例、女5例，年龄5～14岁，平均9.7±3.2岁，病程17.9±7.5个月。四组患儿的年龄、性别及病程差异均无统计学意义(均P>0.05)。

纳入标准：①IgA肾病患儿诊断依据肾脏穿刺活检结果。②肾小管间质病理损害的标准参考杨晓峰等的标准[1]：0级(正常)为肾小管无明显改变；1级(轻度)为间质中有极少量炎症细胞，无纤维化组织增生，病变<20%；2级(中度)为肾小管上皮细胞萎缩、变性、坏死程度轻，呈灶状分布，病变范围20%～50%；3级(重度)为肾小管上皮细胞萎缩、变性、坏死程度重，呈片状分布，大量炎症细胞，纤维化组织增生呈囊，病变范围>50%。③患儿的各项临床资料完整。

排除标准：合并自身免疫性疾病、肿瘤性疾病、原发性肾小球疾病的患儿。

1.2检测方法

ELISA法检测N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG)、β2微球蛋白(β2-MG)，采集两组病例静脉血，经1 500rpm离心5min后得到血清，4℃保存待测，以标准品稀释液将标准品复溶，静置15min后混匀，倍比稀释为7个浓度，取出板条，除了对照孔外每个孔加入不同浓度的标准品，剂量为100μL/孔，采用封板盖封住，室温反应120min，使用PBS液体洗涤三次，除了空白对照孔，每孔加入检测液(100μL)，室温孵育1h，PBS洗涤三次，加入底物(50μL/孔)，避光孵育25min，加入终止液5min后测定450nm处吸光度。NAG、β2-MG抗体购自罗氏检测公司，相关配套试剂购自南京凯基生物科技有限公司，严格按照说明书的要求进行操作。

患者于入院第一天收集尿液5mL，室温下静置30min，4 000r/min离心10min分离上清夜。采用Sysmex系列CA-1500全自动生化监测仪器检测单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)，试剂由DadeBehring公司配套生产。

1.3观察指标

对比各组的收缩压、舒张压、血肌酐、肌酐清除率、β2-MG、NAG、24h尿蛋白定量、尿液中MCP-1的水平。

1.4统计学方法

数据用SAS 9.1统计软件进行分析正态分布的计量指标采用均数±标准差进行描述，多组间比较采用方法分析法，组间两两比较采用LSD-t检验；相关性分析采用Pearson线性相关分析法；P<0.05表示差异具有统计学意义。

2结果

2.1各组IgA肾病患儿的肾功能、单核细胞趋化蛋白-1指标比较

中度组、重度组IgA肾病患儿的收缩压、舒张压水平均显著的高于无病变组、轻度组患儿，差异均具有统计学意义(重度组与无病变组的收缩压、舒张压水平比较，t值分别为4.119、5.820；中度组与轻度组比较，t值分别为4.613、5.714；重度组与无病变组比较，t值分别为2.668、2.914；重度组与轻度组比较，t值分别为2.257、2.573，均P<0.05)。无病变组、轻度组、中度组、重度组患儿的血肌酐、β2-MG、尿NAG、24h尿蛋白定量、尿MCP-1均呈逐渐升高的趋势，组间差异均具有统计学意义(F值分别为40.862、37.851、62.396、77.084、21.362，均P<0.05)；肌酐清除率在无病变组、轻度组、中度组、重度组患儿中呈逐渐降低的趋势，组间差异具有统计学意义(F=43.396，P<0.05),见表1。

组别 例数(n)收缩压(mmHg)舒张压(mmHg)血肌酐(μmol/L)肌酐清除率(mL/min)β2-MG(μg/L)尿NAG(U/L)24h尿蛋白定量(g)MCP-1(ng/L)无病变组11106.4±7.869.1±6.841.0±11.989.5±11.3218.9±86.313.8±5.60.78±0.111.04±0.15轻度组 41108.5±9.571.2±7.965.4±12.077.6±10.3329.5±147.228.4±7.61.14±0.161.56±0.23中度组 32114.4±9.076.3±7.8108.3±14.859.3±9.7785.0±213.257.9±9.01.62±0.212.20±0.24重度组 14122.8±10.083.1±9.5163.2±38.944.7±9.51318.7±398.698.0±17.33.10±0.442.96±0.28F29.08421.33740.86243.39637.85162.39677.08421.362P<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001

2.2肾小管间质的损害IgA肾病患儿的肾功能指标与单核细胞趋化蛋白-1指标的相关性

肾小管间质的损害IgA肾病患儿的血肌酐、β2-MG、尿NAG、24h尿蛋白定量与尿MCP-1均呈显著的正相关关系(均P<0.05)，肌酐清除率与尿MCP-1呈显著的负相关关系(P<0.05)，见表2。

表2 肾功能指标与MCP-1指标的相关性

Table 2 Correlation between renal functional indexes and MCP-1 index

3讨论

3.1对IgA肾病肾小管间质病变的评估具有重要意义

IgA肾病是以反复发作性肉眼或镜下血尿、光镜下系膜细胞增生、基质增多，伴广泛IgA沉积为特点的原发性肾小球疾病。IgA肾病患者肾活检免疫荧光检查肾小球系膜区有大量颗粒状IgA沉积为特征的原发性肾小球疾病，虽然相关病变特别是免疫复合物及补体成分主要聚集于系膜区域，导致系膜的代偿性增生，但近年来对于IgA肾病的基础相关研究表明，肾小管间质的病理性改变在促进IgA肾炎蛋白尿、水肿以及促进肾小管重吸收功能的衰竭中发挥了重要的作用[4-5]。通过评估肾小管间质成分病理改变程度特别是纤维化及间质代偿性增生的程度，可以有效评估IgA肾病的病情严重程度及临床转归。一项汇集了83例回顾性分析资料的临床研究表明，IgA肾病并发肾功能衰竭的患者中，肾小管间质成分的活检病理可见明显的纤维化改变，且纤维化程度越高患者的肾小管重吸收功能恶化越为严重[6-7]，表明肾小管间质病变程度与IgA肾病具有显著的平行关系，但鉴于肾小管间质成分的活检较为困难，其临床评估和预后价值受到了明显的限制。近年来关于IgA肾病基础理论的研究表明，血清学相关指标在肾小管间质病变评估和临床转归的预测中具有重要的价值，且血清学生物指标的检测较为容易，临床上短期内可反复监测，客观性较为理想。

3.2单核细胞趋化蛋白-1与肾小管间质病变的关系

MCP-1是肾小管间质成分纤维化过程中分泌的重要因子，在反复的慢性炎症刺激及免疫损伤中巨噬细胞及单核细胞可以通过加剧MCP-1的合成和释放，进而促进MCP-1在肾小管间质成分中的表达，并通过藕联肾小管重吸收膜上的钠离子同向转运体进而促进MCP-1的尿液排出，导致尿液中的MCP-1的显著上升[8-9]。虽然相关研究探讨了MCP-1在IgA肾病疾病中的异常表达[10]，但对于IgA肾病患儿的肾功能指标与MCP-1指标的关系研究不足，此为本次研究的创新性所在。

3.3单核细胞趋化蛋白-1评估肾小管间质病变的作用

本研究中，中度组、重度组IgA肾病患儿的收缩压、舒张压水平均显著高于无病变组、轻度组患儿，IgA肾病发生发展的过程中收缩压及舒张压的上升可以促进肾小管的缺血性损伤，加剧病情的发展，临床上对于IgA合并明显的高血压的患者应注意加强血压的调控。血清肌酐及蛋白尿是评估肾小管重吸收及肾小球滤过功能的重要指标，肌酐值及蛋白定量表达的上升往往提示肾小管疾病病情的加重，其中血清肌酐在不同程度的肾小管间质成分病变中具有显著的差异性表达，随着间质病理病变程度的增加，血清肌酐的表达呈现出了线性上升的趋势，重度组患者的肌酐值可达163.2±38.9μmol/L，24h蛋白尿定量也可达3.10±0.44g，肌酐清除率也不足50mL/min，表明随着肾小管间质病变程度的加深，IgA肾炎患者的肾功能进一步恶化。β2-MG、尿NAG是反应肾小管吸收和分泌功能的重要指标，β2-MG、尿NAG上升超过30%时患者的肾小管功能衰竭的发生率可上升5%以上，本研究中重症组的β2-MG、尿NAG上升幅度可达3～4倍。本研究重点观察了MCP-1的变化，发现重症组患者尿液中的MCP-1可达2.96±0.28ng/L，较正常对照组及轻度组上升了2～3倍，可见肾组织病理损害越重，MCP-1的表达越强。肾组织MCP-1主要表达在肾小管的上皮细胞和间质的小血管内皮，肾小管间质病理损害程度与MCP-1表达密切相关，临床上可以通过监测尿液中MCP-1的表达进而评估患者的肾小管间质损伤程度及疾病的预后。Inker等[11]学者也发现，在IgA肾病肌酐清除率下降明显的患者尿液中，MCP-1可上升25%以上，且MCP-1的上升往往提示患者肾小管分泌以及吸收功能的减退。相关关系分析也可见，IgA肾病患儿的血肌酐、β2-MG、尿NAG、24h尿蛋白定量与尿MCP-1呈显著的正相关关系，而与肌酐清除率呈负性相关关系，进一步表明了尿MCP-1水平的检测对于评估IgA肾病患者肾功能损伤的重要参考价值。

MCP-1能反应IgA肾病患儿肾小管间质病变的程度，其可能在儿童IgA肾病的病理损害中发挥着重要作用，通过动态监测尿液中的MCP-1的表达变化，可以为评估肾小管间质损伤程度及IgA肾病的临床预后提供重要参考。

[1]杨晓峰,王晓英,刘春忻.IgA肾病患者感染后肾小球肾炎的病理与临床预后研究[J].中华医院感染学杂志,2015,24(15):3485-3487.

[2]高鹏,邱岩,王远鹤.肾动态显像评价肺癌术后患者化疗早期肾功能损害的临床价值[J].现代仪器与医疗,2014,24(06):44-45.

[3]王刘伟,董吉,房豫东,等.肾损伤分子1对高糖诱导大鼠肾小管上皮细胞表达单核细胞趋化蛋白1和纤维连接蛋白的影响[J].中华肾脏病杂志,2014,30(1):48-52.

[4]王彩丽,田园青,刘丽萍,等.肌球蛋白重链9基因单核苷酸多态性与内蒙古自治区汉族IgA肾病临床、病理及预后的关系[J].中华肾脏病杂志,2012,28(10):780-784.

[5]沈霞红,梁少姗,乐伟波,等.IgA肾病患者肾组织病变的变化与治疗及预后的关系[J].肾脏病与透析肾移植杂志,2013,25(5):401-408.

[6]Coppo R, Davin J C. The difficulty in considering modifiable pathology risk factors in children with IgA nephropathy: crescents and timing of renal biopsy[J]. Pediatr Nephrol,2015,30(2):189-192.

[7]Nomura T, Makizumi Y, Yoshida T,etal. The Relationship between the Efficacy of Tonsillectomy and Renal Pathology in the Patients with IgA Nephropathy[J]. Int J Otolaryngol,2014,20(5):451-453.

[8]Ebefors K, Liu P, Lassen E,etal. Mesangial cells from patients with IgA nephropathy have increased susceptibility to galactose-deficient IgA1[J]. BMC Nephrol,2016,17(1):40-42.

[9]Zhang L, Li J, Yang S,etal. Clinicopathological features and risk factors analysis of IgA nephropathy associated with acute kidney injury[J]. Ren Fail,2016,34(4):1-7.

[10]弓玉祥,丁丽红,杨旻宇,等.IgA肾病肾小管间质中淋巴细胞亚群分布及其临床意义探讨[J].东南大学学报(医学版),2015,24(6):876-880.

[11]Inker L A, Mondal H, Greene T,etal. Early Change in Urine Protein as a Surrogate End Point in Studies of IgA Nephropathy: An Individual-Patient Meta-analysis[J]. Am J Kidney Dis,2016,30(5):90-93.

[专业责任编辑：潘凯丽]

Correlation analysis between concentration of MCP-1 in urine and renal tubular interstitial lesion in children with IgA nephropathy

ZHANG Jing-xiu, QI Xue-liang, LIU Ya-ping, LI Xue-min, XU Ben-fu, SUN Xiang-guo, YANG Jun-xia

(ThirdDepartmentofInternalMedicine,YishuiCentralHospital,ShandongYishui276400,China)

Objective To investigate the relationship between urinary monocyte chemotaxis protein-1 (MCP-1) and renal tubular interstitial lesion in IgA nephropathy. Methods A total of 98 patients with primary IgA nephropathy confirmed by renal biopsy were retrospectively studied from March 2012 to August 2015 in Yishui Central Hospital. They were divided into no lesion group (11 cases), mild group (41 cases), moderate group (32 cases) and severe group (14 cases) according to renal tubular interstitial damage degree in biopsy pathology. Urine MCP-1 and related indicators were detected and analyzed. Results The systolic blood pressure and diastolic blood pressure of moderate group and severe group were significantly higher than those of no lesion group and mild group, and the differences had statistical significance (comparing severe group to no lesion group,tvalue was 4.119 and 5.820; comparing moderate group to mild group,tvalue was 4.613 and 5.714; comparing severe group to no lesion group,tvalue was 2.668 and 2.914; comparing severe group to mild group,tvalue was 2.257 and 2.573, respectively, allP<0.05). Serum creatinine, β2 microglobulin (β2-MG), urinary NAG, 24h urinary protein, and urinary MCP-1 showed increasing trend in no lesion group, mild group, moderate group and severe group, and the differences between two groups had statistical significance (Fvalue was 40.862, 37.851, 62.396, 77.084 and 21.362, respectively, allP<0.05). Creatinine clearance rate in no lesion group, mild group, moderate group and severe group was gradually reduced and the difference between two groups had statistical significance (F=43.396,P<0.05). Serum creatinine of renal tubular matter damage in children with IgA nephropathy, β2-MG and urinary NAG and 24h urinary protein were positively correlated with urinary MCP-1 (rvalue was 0.671, 0.598, 0.664 and 0.692, respectively, allP<0.05), and creatinine clearance rate was negatively correlated with urinary MCP-1 (r=-0.720,P<0.05). Conclusion MCP-1 can reflect the degree of renal tubular interstitial lesion in children with IgA nephropathy.

urine; monocyte chemotaxis protein-1; IgA nephropathy; renal tubular interstitial

2016-04-29

张景秀(1981-)，女，主治医师，硕士，主要从事小儿肾脏疾病及风湿疾病的诊疗工作。

孙相国，副主任医师。

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.03.022

R725

A

1673-5293(2017)03-0288-03