北沙参茎叶的紫外—可见光谱和薄层色谱鉴别分析

2017-05-13 09:19叶国华许一平
湖北农业科学 2017年7期
关键词:展开剂北沙参乙醚

叶国华+许一平

摘要:采用紫外-可见光谱法分别对石油醚、乙醚、氯仿、无水乙醇、甲醇和水6种溶剂的北沙参(Glehnia littoralis)茎叶提取液进行紫外-可见光谱扫描,并测定其吸收峰数目和峰位置;以不同配比的石油醚-乙醚-冰醋酸为展开剂,用硅胶G预制薄层板,对上述6种溶剂的北沙参茎叶提取液进行薄层展开,观察其成分的分离情况。结果表明,紫外-可见光谱中,所得的吸收峰数目及峰位置都有差异;薄层色谱主斑点位置有明显差异,且集中、分离度好,均能使其成分得到较好的分离。这两种方法简便、准确、灵敏,可用于北沙参茎叶的快速鉴别。

关键词:北沙参(Glehnia littoralis)茎叶;紫外-可见光谱;薄层色谱;分析

中图分类号:S567.5+3;O657.7 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2017)07-1345-03

DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.07.037

Ultraviolet-Visible Spectroscopy and Thin-Layer Chromatography Identification of Stems and Leaves of Glehnia littoralis

YE Guo-hua, XU Yi-ping

(Shandong College of Traditional Chinese Medicine, Yantai 264199, Shandong, China)

Abstract:The UV-visible spectra was used to scan the extracts from stems and leaves of Glehnia littoralis with petroleum ether,ethyl ether,chloroform,absolute alcohol,methanol and water,as well as determine the number and position of the absorption peaks. With different ratio of petroleum ether-ethyl ether-glacial acetic acid as developing agent,and using silica gel G to prefabricate thin layer plates,the TLC of the extracts by above 6 kinds of solvent was carried out and the separation of components were observed. The results showed that in UV-visible spectra,there were different number and position of absorption peaks,and the main spot locations had significant differences,with good concentrated and separating degree, both could make a good separation of components of Glehnia littoralis. The two methods were found to be simple,accurate and sensitive,can be used for rapid identification of stems and leaves of Glehnia littoralis.

Key words:stems and leaves of Glehnia littoralis; ultraviolet-visible spectrum(UV-visible spectra); thin layer chromatography

北沙參(Glehnia littoralis)又名莱阳沙参[1]、香草菜根[2], 性甘味微苦、微寒,归肺、胃经,具有养阴清肺、益胃生津之功效[3]。因传统药用部分是根,而其茎叶部分被废弃。近年来国内外学者对北沙参进行了大量的研究[4]。但对北沙参茎叶的研究报道很少。本试验主要对伞形科植物北沙参茎叶的6种溶剂(石油醚、乙醚、氯仿、乙醇、甲醇、水)提取液进行UV-Vis吸收光谱和TLC色谱扫描并进行研究,为北沙参茎叶的鉴别提供快速、简便的方法。也为北沙参茎叶开发利用、扩大药用和食用资源提供依据。

1 材料与方法

1.1 仪器与试药

紫外-可见分光光度计UV-2450型,日本岛津公司;BSA224S-CW电子天平,德国赛多利斯公司;101-2A型数显电热鼓风干燥箱(上海沪南科学仪器联营厂);超声波仪(Vltrasonic Cleaner);电热恒温水浴箱,龙口市先科仪器公司;FZ102型微型植物粉碎机,天津市泰斯特仪器有限公司;硅胶G板,青岛海洋化工厂;微量点样器。

石油醚、乙醚、氯仿、乙醇、甲醇均为分析纯,蒸馏水(新制备)。

1.2 方法

1.2.1 样品的采取 北沙参植株为人工栽培品,经山东中医药高等专科学校刘波教授鉴定为伞形科植物珊瑚菜(Glehnia littoralis Fr.Schmidtex Miq)大红袍品种。于2015年10月采自山东省莱阳市高格庄镇胡城村,摘下北沙参茎叶,备用。

过筛→精密称重→乙醇浸泡12 h→不同条件下超声处理→趁热抽滤→旋转蒸发至干(回收)→定性鉴别→乙醇溶解定容至100 mL容量瓶→测吸光度。

1.2.2 样品的制备 北沙参茎叶→洗净→阴干→60 ℃的干燥箱中干燥48 h→粉碎→过筛→装袋备用。

1.2.3 试液的制备 精密称取上述样品10 g,准确加入石油醚(沸程60~90 ℃)200 mL,在75 ℃水浴上进行回流提取2 h后过滤,挥去石油醚,定容于50 mL容量瓶中备用;在残渣中加入200 mL乙醚,在58 ℃水浴上回流提取2 h后过滤,滤液浓缩定容于50 mL容量瓶中备用;在残渣中加入200 mL氯仿,在60 ℃水浴上回流提取2 h后过滤,滤液浓缩定容于50 mL容量瓶中备用;在残渣中加入95%乙醇200 mL,85 ℃水浴回流提取2 h后过滤,滤液浓缩定容于50 mL容量瓶中备用。

另准确称取样品10 g于带塞的锥形瓶中,精密加入甲醇200 mL,浸泡3 h,超声提取1 h后过滤,滤液浓缩定容于50 mL的容量瓶中备用;在残渣中加入蒸馏水200 mL,微沸1 h后过滤,滤液浓缩定容于50 mL的容量瓶中备用。

1.2.4 北沙参茎叶紫外-可见光谱鉴别 用紫外可见吸收分光光度仪,在200~800 nm进行扫描测定。先对溶剂进行基线扫描,然后对各种提取液进行光谱扫描,得到各种提取液的UV-Vis吸收光谱。

1.2.5 北沙参茎叶薄层鉴别 薄层色谱法是一种微量分离分析技术,设备简单,测定快速,分离效果好,灵敏度高,适应范围广,是中药材有效成分分离、鉴定和杂质检查的有力工具[5]。将上述6种提取液分别点样10 μL于硅胶G板上,放于盛有不同展开剂的展开缸中展开,上行展开15 cm,在荧光灯下观看。

2 结果与分析

2.1 北沙参茎叶紫外-可见光谱鉴别

用紫外可见吸收分光光度仪,在200~800 nm进行扫描测定。先对溶剂进行基线扫描,然后对各种提取液进行光谱扫描,得到各种提取液的UV-Vis吸收光谱。光谱情况见图1至图6。由图1至图6可知,提取液不同,所得的吸收峰数目及峰位置都有差异。

2.2 北沙参茎叶薄层鉴别

将上述6种提取液分别取10 μL点样于硅胶G板上,在不同比例的展开剂中展开,上行展开15 cm,在荧光灯下观看,结果见图7和图8。图7的展开剂为石油醚-乙醚-冰醋酸(30∶5∶1),图8的展开剂为石油醚-乙醚-冰醋酸(5∶5∶1)。比较图7和图8可以看出,展开剂极性增加,薄层色谱(TLC)中的色斑增多,说明提取液中极性大的组分较多。

3 小结与讨论

由紫外-可見吸收光谱特征图谱数据可以看出,不同的提取溶剂提取同一种样品时,所得的吸收峰数目及峰位置都有差异,即所得到的化学成分不完全相同。在紫外和可见光区均有吸收,且在可见光区的吸收光谱有相似之处,在紫外光区的吸收较为强烈,说明北沙参茎叶的物质基础较为丰富。其中,甲醇超声提取液和石油醚提取液的紫外-可见光谱可供鉴别的吸收峰较多,蒸馏水的超声提取液吸收峰的吸收度很小,可供鉴别的吸收峰意义不大。

紫外-可见光谱鉴定取样量少,灵敏性高,为北沙参茎叶的鉴别与质量控制提供了新的方法和依据。

从薄层色谱图可以看出, 在不同配比的展开系统中,乙醚提取液的斑点最多;氯仿提取液和甲醇超声提取液都至少4个斑点;乙醇提取液最少3个斑点;石油醚提取液最少2个斑点;水超声提取液斑点最少为1个。这些构成了北沙参茎叶各种提取液的特征色谱。乙醚提取液展开斑点数量最多,分离效果好,因此建议北沙参茎叶的研究中选用乙醚作为提取液。本研究采用硅胶G板,采用不同配比的石油醚-乙醚-冰醋酸作为展开剂用于北沙参茎叶成分的分离,分离效果好。

紫外-可见光谱和薄层色谱都能对样品进行较好的分析,为以后北沙参茎叶的鉴别提供了快速、简便的方法。

参考文献:

[1] 蔡永敏.中药药品辞典[M].北京:中国中医药出版社,1996.

[2] 中华人民共和国卫生部药政管理局,中国药品生物制品检定所.中药材手册[M].北京:人民卫生出版社,1959.

[3] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].北京:化学工业出版社,2015.

[4] 吕方军,张钦德.莱阳沙参的研究现状与思考[J].辽宁中医药大学学报,2008,10(5):146-148.

[5] 王 雷,李 祥,朱 晨.薄层色谱法在中药定性定量研究中的应用[J].天津药学,2004,16(8):50-51.

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