猪微生物学诊断材料的采集方法及其注意事项

邵明奇

（内蒙古通辽市扎鲁特旗农牧业局联合屯兽医站，内蒙古通辽 029100）

猪微生物学诊断材料的采集方法及其注意事项

邵明奇

（内蒙古通辽市扎鲁特旗农牧业局联合屯兽医站，内蒙古通辽 029100）

近年来猪只发生疫病时，单纯感染的病例逐渐减少，而混合感染和继发感染的病例愈来愈多。不同疫病的症状和病理变化交织在一起，给疫病的诊断带来许多困难，即使经验丰富的兽医，也常需要靠微生物学诊断和血清学检查来进行判断。微生物学诊断和血清学检查能否获得明确结果，关键在于是否能够正确地采集病料。因此，动物科技工作者必须亲自采集供检查用的各种材料。

1 采集病料时的注意事项

有价值的试验结果在很大程度上取决于材料的采集和处理方法是否适当合理。因此正确地采集材料，及时运送和处理，是极其重要的。选择典型病例，当发现在一个养猪场多头猪同时发病时，应选择临床症状典型有代表性，尚未进行过治疗的病例。因为使用过抗菌药物治疗过的病猪，在血液和组织中常难以查出病原体，应给予注意。及时取材，病料的取材应在病猪死前或死后随即完成。死后时间过长，则组织细胞变性、腐败，影响检查结果。因此，在病猪死后取材，炎热季节最迟不得迟于死后2 h；寒冷季节也应在死后5 h内完成。正确取材，采取病料时应根据临床诊断、流行病学材料分析所示疾病的种类和病原体的嗜组织性，来决定采取哪些组织和器官。若怀疑猪瘟时，应采取淋巴结和脾脏；若怀疑伪狂犬病时，可取脑和脊髓。总之，采取病料应采集病原体含量高，且病变明显的组织和器官。这样不但可以省去许多不必要的检查手续，而且可以为疾病防治赢得宝贵时间。

应排除炭疽可疑，对突然死亡的病猪，如见有皮下水肿、天然孔出血、尸僵不全者，应首先从颈静脉或耳静脉采血，涂制血液涂片数张，立即进行固定、染色、显微镜检查，排除炭疽后方可进行剖检和取材。

防止杂菌污染，解剖病猪尸体的所用器械，如刀、剪、玻璃器皿等均应消毒。采取组织、器官时，应以棉签浸上95%酒精在脏器表面进行烧灼消毒，迅速以手术刀切一小口，用白金耳伸入切口深处取材接种于培养基上；如要进行病毒分离，烧灼消毒后，可用手术刀切取一块组织（重约5～10 g），在酒精灯上烧灼一下，立即放入消毒过的平皿内，送入实验室进行病毒分离。

2 病料的采集方法

2.1 血液、腹、胸水的采集

病猪生前可从耳静脉采血，剖开后可以心脏采血。用5 mL或10 mL注射器，吸取抗凝剂（3.8%柠檬酸钠或1% EDTA二钠）1.0 mL，从耳静脉或心脏采血4.0 mL，混合均匀后送实验室检查。如要送往外地实验室检查，可向血液中加入10%福尔马林液2.0 mL以起到防腐的效果。病猪尸体剖开后，应立即用注射器分别抽取腹水或胸水，抽得的腹水或胸水应立即送实验室检查。

2.2 乳汁、脓汁等的采集

用消毒液清洗和消毒泌乳母猪乳房，将最初挤出乳汁弃去，然后采集乳汁10～20 mL于试管中，加塞送实验室检查。脓汁、水泡液、水肿液、渗出液等都应以注射器抽取，抽取后立即送实验室检查。

2.3 鼻液、粪便的采集

采集鼻液时，可用灭菌棉拭取，放入试管中，加盖后立即送实验室检查。在以上材料送达实验室后，应立即制作各种液体材料的涂片，进行固定、染色、显微镜检查。病猪生前，可用消毒棉拭子从直肠中掏取；剖开病猪尸体后，可选取适宜的肠段5～10 cm，两端结扎后，剪断取出放入平皿中送实验室检查。

2.4 胆汁、内脏器官的采集

可将猪胆囊整个取出，放入平皿中送实验室检查。淋巴结可连同周围的脂肪整个采取；肝、脾、肺、肾脏、脑和脊髓，可选取病变明显部位切取（l cm×1 cm）一块，分别放入盛有PBS生理盐水的平皿内，立即送实验室检查。

3 病料的采取部位

不同的病原微生物具有不同的嗜组织性。侵入机体后大多集中分布于所嗜组织内。因此，采取病料时根据临床诊断、流行病学材料分析所示疾病的种类和病原体的嗜组织性，来决定采取哪些组织和器官。现将不同传染病应采集的病料归纳如下：对于恶性水肿，生前取患部水肿液，死后取肝脏及患部水肿液；对于巴氏杆菌病，生前取血液，死后取心血、肝、脾、肺、淋巴结；对于大肠杆菌病，死后取前段小肠内容物及肠粘膜；对于仔猪副伤寒，生前急性采集血液、粪便，慢性取关节液、脓汁；流产母猪采胎衣、胎儿，死后取血液、肝、脾、肾、淋巴结、胆汁；对于慢性萎缩性鼻炎，生前取深部鼻黏液，死后取猪头上颌、深部鼻粘膜。

怀疑有以下病症时，在采取病料时应注意防护和防止细菌散布。对于炭疽，生前取末梢血和炭疽痈的分泌物或渗出液，死后取血液、脾、炭疽痈组织、耳朵；对于结核病，生前取乳汁、粪便、尿、精液、阴道分泌物、脓汁，死后取有病变的肺脏和其他器官组织；对于猪丹毒，生前急性采血液，亚急性采皮疹渗出液，慢性采关节液，死后取血液、肝、脾、肾、淋巴结、胆汁，尸体腐败取长骨。

S828

B

1001-0084（2017）03-0063-01

2017-02-17

邵明奇（1973-），男，内蒙古扎鲁特旗人，兽医师，主要从事动物检疫，疫情监测工作。