高效分子排阻法对几种头孢类抗生素聚合物的研究探讨

马晓彬 许立君

（新疆昌吉州食品药品检验所，新疆 昌吉 831100）

高效分子排阻法对几种头孢类抗生素聚合物的研究探讨

马晓彬 许立君

（新疆昌吉州食品药品检验所，新疆 昌吉 831100）

头孢类抗生素包括头孢曲松钠、头孢呋辛钠、头孢唑啉钠、头孢噻肟钠和氨曲南等，是目前临床上常用的抗感染药物。减少抗生素过敏反应的重要方法之一是控制聚合物的含量。本文根据《中国药典》2010版二部所规定的Sophdax G-10凝胶色谱法，对注射用头孢曲松钠、注射用头孢唑林钠、注射用头孢噻肟钠、注射用头孢呋辛钠存放于不同温度条件下，对所产生聚合物的含量的影响进行了研究。

抗生素；头孢聚合物；凝胶色谱法；温度

β-内酰胺类抗生素包括青霉素类、头孢类和非典型的β-内酰胺类。头孢类包括头孢呋辛钠、头孢噻肟钠、头孢曲松钠、头孢唑啉钠和氨曲南等，是目前临床上常用的抗感染药物。然而它们的过敏问题长期以来引起了人们的密切关注，研究证明，β-内酰胺类导致的速发型过敏反应不一定是由药物本身所引起的，而和其中的高分子杂质有关[1]，因此控制聚合物的含量是减少此类抗生素过敏反应的重要方法之一。《中国药典》2010版对22个品种43个制剂标准进行了控制[2]，本文按《中国药典》2010版二部所规定的Sophdax G-10凝胶色谱法[3]，对注射用头孢呋辛钠、注射用头孢噻肟钠、注射用头孢曲松钠、注射用头孢唑林钠、存放于不同温度条件下，对所产生聚合物的含量的影响进行了研究，并就结果进行探讨。

1 仪器与试药

1.1 仪器：岛津LC-20AT高效液相色谱仪；METTLER AE240电子天平；WE202电热恒温干燥箱

1.2 试药：蓝色葡聚糖2000（Sigma-Aldrich公司）；磷酸二氢钠，磷酸氢二钠（均为分析纯）；头孢呋辛对照品（来源：中国药品生物制品检定院，批号：130493-200704，纯度：91.6%），头孢噻肟对照品（来源：中国药品生物制品检定院，批号：130483-200904，纯度：90.6%），头孢曲松对照品（来源：中国药品生物制品检定院，批号：130480-200302，纯度：84.1%），头孢唑林对照品（来源：中国药品生物制品检定院，批号：0421-9603，纯度：99.3%）；注射用头孢呋辛钠（某药厂，批号：SH4121011，规格：0.75g），注射用头孢噻肟钠（某药厂，批号：00330353，规格：1.0 g），注射用头孢曲松钠（某药厂，批号：01720501，规格：2.0 g），注射用头孢唑林钠（某药厂，批号：B130830110，规格：0.5 g），注射用氨曲南（某药厂，批号：130319，规格：0.5 g）；试验用水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件。色谱柱：PX-G10葡聚糖凝胶色谱柱（天津谱祥科技有限公司，柱长0.4 m，内径14 mm，40～120 μm）；流动相：1、0.1 mol/L的磷酸盐缓冲液（pH 7.0）[0.1mol/L磷酸氢二钠溶液-0.1 mol/L磷酸二氢钠溶液（61∶39）]，2、0.025 mol/L磷酸盐缓冲液（pH 7.0）[0.025 mol/L磷酸氢二钠溶液-0.025 mol/L磷酸二氢钠溶液（61∶39）]；进样量为100 μL；检测波长：254 nm；流速：1.5 mL/min。

2.2 溶液的配制

2.2.1 对照品溶液的配制：①精密称取头孢呋辛对照品适量，加水溶解并定量稀释制成1 mL中约含40 μg的溶液。②精密称取头孢噻肟对照品适量，加水溶解并定量稀释制成1 mL中约含100 μg的溶液。③精密称取头孢曲松对照品适量，加水溶解并定量稀释制成1 mL中约含0.1 mg的溶液。④精密称取头孢唑林对照品适量，加水溶解并定量稀释制成1 mL中约含10 μg的溶液。

2.2.2 系统适用性溶液的配制：取注射用头孢呋辛钠、注射用头孢噻肟钠、注射用头孢曲松钠、注射用头孢唑林钠0.2 g，至10 mL容量瓶中，分别《中国药典》2010版二部中[3]规定浓度的蓝色葡聚糖2000溶液溶解稀释至刻度，摇匀。

2.2.3 供试品溶液的制备：①样品处理：取样品（注射用头孢呋辛钠、注射用头孢噻肟钠、注射用头孢曲松钠、注射用头孢唑林钠）分别置室温下（22 ℃）放置7 d；置干燥箱中于37 ℃放置7 d；置干燥箱中于80 ℃放置24 h；取出，放冷至室温（注：注射用头孢呋辛钠为过期不合格样品）。②取经处理的样品（注射用头孢呋辛钠、注射用头孢噻肟钠、注射用头孢曲松钠、注射用头孢唑林钠）各0.2 g，精密称定，分别置10 mL量瓶中，加水溶解稀释至刻度，摇匀。③取未经处理的样品（注射用头孢呋辛钠、注射用头孢噻肟钠、注射用头孢曲松钠、注射用头孢唑林钠）各0.2 g，精密称定，分别置10 mL量瓶中，加水溶解稀释至刻度，摇匀（注：注射用头孢呋辛钠为过期不合格样品）。

2.2.4 测定法：按《中国药典》2010版二部中[3]注射用头孢呋辛钠、注射用头孢噻肟钠、注射用头孢曲松钠、注射用头孢唑林钠聚合物项下的测定方法分别用两种浓度的流动相测定。

2.3 系统适用性试验：①各样品中的理论塔板数和拖尾因子均符合规定；②蓝色葡聚糖2000峰的保留时间在两种流动相系统中的比值均符合规定；③在相应色谱系统中对照品溶液中主峰与供试品溶液中的聚合物与蓝色葡聚糖2000峰保留时间的比值均符合规定；④取对照溶液连续进样5次，其峰面积的RSD均符合规定；⑤高聚体的峰高与单体与高聚体之间的谷高比值：a.以pH 7.0的0.1 mol/L磷酸盐缓冲液为流动相时，4种样品（注射用头孢呋辛钠、注射用头孢噻肟钠、注射用头孢曲松钠、注射用头孢唑林钠）均能很好的分离；b.pH 7.0的0.025 mol/L磷酸盐缓冲液为流动相时，除注射用头孢曲松钠外，其他3种样品（注射用头孢呋辛钠、注射用头孢噻肟钠、注射用头孢唑林钠）均能很好的分离（药典规定流动相浓度：注射用头孢呋辛钠0.025 mol/L、注射用头孢噻肟钠0.1 mol/L、注射用头孢曲松钠0.1 mol/L、注射用头孢唑林钠0.1 mol/L）。见图1。

图1

2.4 样品测定，见表1。

3 讨 论

3.1 通过以上试验证明，pH 7.0的0.025 mol/L磷酸盐缓冲液作为流动相时，注射用头孢唑林钠、注射用头孢噻肟钠均能很好的分离。考虑到缓冲盐对色谱柱有一定的影响，应选用较低浓度的缓冲盐作为流动相，据此可对《中国药典》2010版二部中注射用头孢唑林钠、注射用头孢噻肟钠聚合物测定方法中所选用的流动相（原标准均以0.1 mol/L磷酸盐缓冲液作为流动相）进行优化，改用0.025 mol/L磷酸盐缓冲液作流动相。

3.2 通过以上试验证明，固体状态下注射用头孢曲松钠、注射用头孢唑林钠、注射用头孢噻肟钠、注射用头孢呋辛钠随着处理温度的升高，聚合物含量有不同程度的升高，但均未超出标准规定。而固体状态下头孢菌素类聚合速度与含水量和贮存温度有关，低水分样本，即使在较高温度下贮存，高分子杂质增加的速度也不快[4]。因此新疆气候比较干燥（室内湿度相对较小），对该品种的聚合物的产生影响不大。

3.2 通过此次试验样品在固体状态下，经加热处理，聚合物含量仍然在限度范围之内，由此可见温度对以上头孢类聚合物的影响不大，那么如果有效的控制头孢类药品的水分，即可降低聚合物的产生。药典标准中对头孢聚合物检查限度，没有明确的临床数据支持，该限度是否合理，有待于大家共同探讨。

[1] 金少鸿,胡昌勤.β-内酰胺类抗生素过敏反应的研究进展[J].中国新药杂质,1994,4(3):38.

[2] 侯玉荣,袁濯佐.β-内酰胺类抗生素中高分子杂质的研究和检测方法进展[J].药学与临床研究,2012,20(3):240.

[3] 国家药典委员会.中华人民共和国药典二部[S].2010年版.北京:中国医药科技出版社2010:181.

[4] 胡昌勤,孙学兰.固体状态下头孢菌素聚合反应的探讨[J].中国抗生素杂质,1991,16(2):106.

表1 样品测定表

R917；R978.1+1

B

1671-8194（2017）12-0049-02