淋巴结病理组织免疫组化技术与标准化操作方法探讨①

王雅萍

(洛阳市第三人民医院，河南 洛阳 471000)

淋巴结病理组织免疫组化技术与标准化操作方法探讨①

王雅萍

(洛阳市第三人民医院，河南 洛阳 471000)

目的：探析淋巴结病理组织免疫组化技术与标准化操作方法。方法：对2014-10～2016-05我院收治的83例淋巴结患者的临床资料予以回顾性分析，根据计算机数表法分为2组，即观察组(n=42)、对照组(n=41)。观察组患者给予免疫组化染色与标准化淋巴结组织HE片穿刺，对照组患者未给予标准化淋巴结组织HE片穿刺，观察比较2组患者免疫组化染色切片的情况。结果：观察组患者免疫组化染色切片的优良率是95.2%，明显高于对照组患者的56.1%，组间对比差异明显(P<0.05)。结论：通过病理组织免疫组化技术的应用，可明显提高染色切片的优良率，为诊断患者病情提供了可靠参考，值得临床广泛应用与普及。

淋巴结；病理组织；免疫组化技术；标准化操作方法

免疫组化技术指的就是利用免疫学及组织化学原理，对组织切片或者细胞标本中某些化学成分予以原位定位、定性或定量研究的技术[1]，其主要包括免疫细胞化学与免疫组织化学[2]。为了探讨淋巴结病理组织免疫组化技术与标准化操作方法的应用效果，本文主要对我院收治的83例淋巴结患者的临床资料予以研究，现总结报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

对2014-10～2016-05我院收治的83例淋巴结患者的临床资料予以回顾性分析，根据计算机数表法分为2组，即观察组(n=42)、对照组(n=41)。83例患者中，女39例，男44例；年龄19～79岁，平均为(47.2±6.7)岁；淋巴结部位：颈部淋巴结33例，锁骨下淋巴结28例，腹膜后淋巴结22例。统计分析2组患者的一般资料可知，对比差异不明显(P>0.05)，可进行比较。2组患者均知晓本次研究目的，且自愿签署知情同意书，符合伦理学要求。

1.2 方法

观察组患者给予免疫组化染色与标准化淋巴结组织HE片穿刺，对照组患者未给予标准化淋巴结组织HE片穿刺，相关操作如下。

1.2.1 标准化淋巴结组织HE片

根据有关标准要求，取材时应严格控制组织厚度，最好约为0.18cm。在淋巴结组织离体之后，置于4%的中性甲醛中，并予以固定，如果在1例标本中发现较多的穿刺组织，应用过滤纸包好每条组织，并置于脱水盒中，保证包埋程序时组织位于同一平面。切片厚度定为2.5μm，并将每张蜡片切成7片，对其中一张蜡片切片予以染色成HE切片，并涂在载玻片上，为免疫组化做好准备。

1.2.2 免疫组化技术

对切片予以常规脱蜡，置于水中。取3%的甲醇液于室温条件下作用一段时间，之后用清水与蒸馏水清洗切片。取pH为6.0的柠檬酸1100mL置于高压锅中，并盖好，加热2min后停止，使其自然冷却，之后从温室中取出。用PBS进行冲洗，需冲洗2次，2min/次。添加二抗，在DAB显色时可停止添加，比较抗体阴阳性。

1.3 观察指标

免疫组化染色切片优良率评定标准：组织结构未被破坏，准确定位阳性物质，存在清晰、干净的背景，无特殊着色与脱色情况，具有高度的敏感性与特异性[3]。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 对2组患者的一般资料进行比较

在性别、年龄、淋巴结部位方面，2组患者对比无明显差异(P>0.05)，见表1。

表1 对2组患者的一般资料进行比较

2.2 对2组患者的染色切片优良率进行对比

观察组患者免疫组化染色切片的优良率是95.2%，明显高于对照组患者的56.1%，组间对比差异明显(P<0.05)，见表2。

表2 对2组患者的染色切片优良率进行对比[n(%)]

3 讨论

现阶段，免疫组化技术取得了很大的进步，敏感性非常高。在起步阶段，免疫组化技术遇到了很多障碍，特别是技术限制特别多，致使其未能充分发挥自身作用[4]。以往抗体稀释程度较低，最多只能稀释几十倍，随着医疗技术水平的逐步提升，抗体稀释程度越来越大，可达到上万倍，并且抗体敏感性也得到了很大的提升[5]。目前，因为实验室缺乏明确、统一的标准，导致免疫组化技术结果差异较大，由此说明，设定一个明确、统一的标准，有利于进一步完善免疫组化技术，充分发挥其作用[6，7]。此外，免疫组化结果易受多种因素的干扰，其中抗原修复标准化最为重要。在以往操作中，均利用微波加热法修复抗原，而现在，均利用高压锅加热法予以修复，可更好的控制加热时间，染色效果更佳[8，9]。本文研究结果显示：观察组患者免疫组化染色切片的优良率是95.2%，明显高于对照组患者的56.1%，组间对比差异明显(P<0.05)。此研究结果与彭凤英[10]的文献报道非常近似，即观察组患者免疫组化切片的优良率是94.9%，对照组患者免疫组化切片的优良率是53.8%，2组对比差异明显(P<0.05)。由此可以看出，只有通过标准化操作才可以有效提高免疫组化技术的检测结果，充分发挥其自身作用，便于进一步了解患者病情，临床应用价值非常高。总而言之，通过病理组织免疫组化技术的应用，可明显提高染色切片的优良率，为诊断患者病情提供了可靠参考，值得临床广泛应用与普及。

[1]马喆,王洪岩,袁东辉,等.病理免疫组化质量控制过程中应注意的几点[J].诊断病理学杂志,2015,22(3):187

[2]张睿,朱正鹏,马健波,等.淋巴结免疫组化制片技术体会[J].临床与实验病理学杂志,2015,4(2):220-221

[3]刘洪博,王文智,邱雷,等.双重免疫组化技术检测胃低分化腺癌误诊为淋巴瘤一例[J].天津医药,2013,16(8):762

[4]陈世梁,卢志承,陈春吉,等.10%中性缓冲福尔马林固定组织HE染色的改良方法[J].临床与实验病理学杂志,2014,30(8):933-934

[5]陶成云.病理诊断中免疫组化技术的应用研究[J].大家健康(下旬版),2016,10(8):152-153

[6]郭晋.病理组织的免疫组织化学技术分析[J].航空航天医学杂志,2014,8(4):473-474

[7]郭海燕,郭黎黎,王志生,等.组织病理诊断中应用免疫组化技术的价值分析[J].中国继续医学教育,2015,10(5):177

[8]薛卫成,樊祥山,孟刚(整理),等.胃癌相关标志物免疫组化指标选择专家共识(2014)[J].临床与实验病理学杂志,2014,18(9):951-953

[9]管沛璇.免疫组化技术在病理诊断中的应用思考[J].中国医药指南,2014,17(34):54-55

[10]彭凤英.病理组织免疫组化技术的研究[J].吉林医学,2014,6(12):2615

王雅萍(1975～)女，河南孟津人，主管技师。

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1008-0104(2017)02-0152-02

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