气相色谱-质谱法测定粮食中甲基毒死蜱的残留量

◎张艳艳 韦石 李丽

气相色谱-质谱法测定粮食中甲基毒死蜱的残留量

◎张艳艳 韦石 李丽

采用气相色谱法-质谱联用技术和固相萃取前处理方法，建立了甲基毒死蜱农药残留的检测方法。样品采用乙腈萃取目标组分，经固相萃取柱净化，并由HP-5MS柱（30m×0.25mm×0.25μm）进行分离，利用选择性离子监测（SIM）的方式，内标法定量。分别对小米、大米、高粱、小麦、玉米、燕麦、大麦七种样品进行0.0125mg/kg（检出限）、0.0375mg/kg、0.0625mg/ kg、0.125mg/kg四个水平的加标回收试验，回收率均在85.3～104.2%之间，RSD均在0.9～5.0之间。试验证明该方法稳定可靠，样品前处理方法更加简单，分析时间短，灵敏度和准确度高，可以满足甲基毒死蜱农药残留分析的要求。

目前测定农药残留的分析方法主要为气相色谱法，气相色谱-质谱法，液相色谱-串联质谱法。气相色谱法因为灵敏度较好，仪器成本低，一直以来被广泛的使用，但是气相色谱法分析时容易被样品基质中的干扰物质对目标组分产生干扰，而气相色谱-质谱法可以很好的解决这一问题，通过对目标物质的离子进行选择性的监测，使得干扰物质造成的影响大大降低，再配合前处理中的固相萃取法，可以得到很好的测定效果。

材料与方法

材料与试剂。小米、大米、高粱、小麦、玉米、燕麦、大麦，用粉碎机打磨成粉状后，过20目筛；甲基毒死蜱、外环氧七氯标准品；乙腈、甲苯、正己烷，HPLC（赛默飞世尔科技）；丙酮、无水硫酸钠；Sep-Pak NH2柱：3mL，500mg；

仪器与设备。气相色谱-质谱仪7890A-7000C（Agilent）、固相萃取仪、离心机、旋转蒸发仪、振荡器。

方法

标准溶液配制。甲基毒死蜱标准溶液，丙酮定容至100μg/mL的标准储备液，再准确吸取0.1mL标准储备液，转移至10mL容量瓶中，用丙酮定容至刻度，得质量浓度为1μg/mL的中间液，再根据需要逐步稀释中间液，得相应的工作液。

将购买的质量浓度为100μg/mL，规格为1mL的外环氧七氯内标溶液全部转移。

样品处理

样品的提取。称取10g样品（精确至0.01g），加入50mL乙腈，200r/min震荡30min，而后全部转移至离心管中，涡旋混合1min，8000r/min离心10min，取上清液25mL，旋转蒸发至近干，待净化。

样品的净化。在Sep-Pak NH2柱上端加入约2cm高无水硫酸钠，用4mL乙腈-甲苯（3+1）溶液预洗，弃去流出液，用2mL乙腈-甲苯（3+1）溶液洗涤样液瓶，重复3次，再用25mL淋洗Sep-Pak NH2柱，收集流出液，40℃水浴浓缩至1mL，加入50uL内标液，混匀，上机测定。

仪器条件

色谱条件。色谱柱：HP-5MS（30m× 0.25mm×0.25μm）；程序升温条件为100℃保持1min，50℃/min升至150℃，5℃/mihn升至240℃，保持5min，后运行300℃，3min；载气流速1mL/min；进样口温度：250℃；分流模式：不分流；传输线温度：280℃；进样量1uL。

质谱条件。质谱扫描模式：选择性离子扫描（SIM）；离子源为电子轰击源（EI），离子源温度：230℃；电子轰击源：70eV；溶剂延迟：3.5min。甲基毒死蜱及外环氧七氯定性离子和定量离子的选择见表1。

名称保留时间定量离子定性离子甲基毒死蜱12.638286288（70）、197（5）外环氧七氯15.455353355（79）、351（52）

结果与分析

净化条件。依据国家标准GB/T 19649 -2006的方法检测甲基毒死蜱，本方法中，对净化步骤进行了简化，将提取液浓缩至少量体积后，直接过Sep-Pak NH2进行净化，如样品颜色较重，则在提取时加入少量石墨化炭黑（因活性炭对多种农药有很强的吸附作用，固使用石墨化炭黑）去除，减少了净化的步骤，提高了回收率，使甲基毒死蜱在各种基质中各个添加水平的回收率均达到了85%以上，并同样有效地降低了目标物的干扰。

仪器条件

本方法选择了弱极性的HP-5MS柱，修改了原标准中的升温程序，使每次进样的分析时间大大缩减，利用后运行，将可能存在的污染降至最低。

当样品的目标物保留时间与标准品保留时间相差±0.05min，同时组分中定量离子与定性离子的丰度比满足：相对丰度＞50%时，允许±10%偏差；相对丰度在20～50%时，允许±15%偏差；相对丰度在10%～20%时，允许±20%偏差；相对丰度≤10%时，允许±50%偏差；即可定性为目标物质。

方法的线性范围及检出限。分别将小米、大米、高粱、小麦、玉米、燕麦、大麦等7种样品，每种样品分成24份平行样品,线性范围设定的浓度为0.05～1.00μg/mL时，线性方程为y=3.819189x+0.069975，R2=0.99998819，满足检测需求。对检出限浓度0.0125mg/kg的空白加标测定，进行6次平行试验，测定结果均大于10倍信噪比，符合检测需求。

方法精密度和准确度。为了对本方法进行验证，对小米、大米、高粱、小麦、玉米、燕麦、大麦等7种样品分别进行0.0125mg/ kg（检出限）、0.0375 mg/kg、0.0625 mg/ kg和0.125 mg/kg这4个水平的添加，每种样品每个添加水平进行6次平行试验，计算其加标回收率和相对标准偏差（RSD）。实验结果表明，7种样品的4个添加水平的回收率均在85～105%，RSD≤10%，满足分析测定的要求。其具体的精密度和准确度数据见表2。

表2 甲基毒死蜱回收率及相对标准偏差（n=6）

本文通过乙腈振荡提取粮谷中的甲基毒死蜱，并利用固相萃取净化技术去除样品基质中的干扰物质，利用气相色谱-质谱仪选择性离子扫描，成功的建立了粮谷中甲基毒死蜱的分析方法。通过对小米、大米、高粱、小麦、玉米、燕麦、大麦等7种样品进行4水平添加，并用内标法进行定量，所建立的方法回收率，相对标准偏差（RSD）满足精密度和准确度需要，能够对粮谷中的甲基毒死蜱含量进行很好的定性、定量分析。

（作者单位：辽宁通正检测有限公司）