附子多糖对抑郁大鼠模型的影响*

龙亚秋, 谢文源, 李 华， 骆文婷, 郑慰武

(1.广州中医药大学附属广东省中医院, 广东 广州 510000 2.南方医院， 广东 广州 510515)

基础医学

附子多糖对抑郁大鼠模型的影响*

龙亚秋1, 谢文源1, 李 华2， 骆文婷1, 郑慰武1

(1.广州中医药大学附属广东省中医院, 广东 广州 510000 2.南方医院， 广东 广州 510515)

目的：观察附子多糖对抑郁大鼠行为学及海马形态学的影响。方法:60只健康SD大鼠被随机均分为4组,即空白对照组、模型组、附子多糖组、氟西汀组。除空白对照组外，其他各组采用慢性应激复制模型,模型复制同时给予附子多糖或氟西汀治疗，连续21日后进行行为学观察，取海马制备切片用于苏木精-伊红染色。结果:与模型组比较，空白组、附子多糖组游泳不动时间缩短，差异有统计学意义(P<0.0.5)。与模型组比较，附子多糖组、氟西汀组海马神经元细胞数量较多，排列较整齐、密集，细胞核结构较完整。结论:附子多糖对抑郁大鼠行为学有改善作用，同时具有促进神经元再生的作用。

附子多糖; 抑 郁; 慢性应激

抑郁症对患者、家庭及社会造成巨大负担，严重危害着人类的生命与健康。因此，抑郁症的防治是当今的医学科学研究的重大课题。目前寻找起效快、副作用少、效果好并且费用低廉的抗抑郁药物是当务之急。近年来研究表明成年海马区神经元再生在抑郁症的发生、发展过程中具有重要作用[1,2]。基于此理论，我们从多种中药成分中筛选具有促进神经元再生作用的药物-附子多糖，而后检测其是否具有抗抑郁作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组:SPF级Spague -Dawley(SD)大鼠60只,雄性,购自南方医科大学实验动物中心,饲养于南方医科大学南方医院药学部动物所。将大鼠随机分为4组,每组15只:即空白对照组、模型组、附子多糖治疗组、氟西汀治疗组，模型组、附子多糖治疗组、氟西汀治疗组采用慢性应激复制抑郁大鼠模型。

1.2 药品及配制:附子多糖由南方医科大学神经生物学教研室提供，氟西汀(批号：1508018)购自南方医科大学试剂中心。附子多糖1.0g溶于30mL灭菌水备用，氟西汀15.4mg溶于30mL灭菌用水备用。

1．3 抑郁大鼠模型复制及处理:第1～21天，正常对照组大鼠正常饲养。其他接受7种不同的刺激[3,4]：夹尾(1min)、摇晃(水平往复，1次/s，共15min)、禁食(48h)、禁水(24h)，昼夜颠倒(24h)，冷水游泳(水温4度，5min)，束缚(3h)。每天随机给予一种刺激，每种刺激累计使用2～3次。造模同时[3]：附子多糖组大鼠腹腔注射附子多糖[100mg/(kg．d)]，氟西汀组大鼠腹腔注射氟西汀[1.54mg/(kg．d)]，余两组大鼠腹腔注射等剂量生理盐水，腹腔注射按0.3mL/100g给药。

1．4 观察指标:观察指标包括大鼠体质量、行为学观察、海马组织形态学观察。实验结束前进行强迫游泳实验(FST)，将大鼠置于高40cm、直径18cm，盛有25℃自来水的玻璃缸中，水深可调整，以大鼠后足刚可触及筒缸底却不足以支撑身体为宜，记录强迫游泳大鼠不动时间[5]。

1．5 统计方法:实验数据以均数±标准差表示，数据用SPSS16.0计软件进行处理。采用One-Way ANOVA；方差齐性时各组之间多重比较采用LSD检验；方差不齐时采用近似方差分析Welch法，各组之间多重比较采用Dunnett T3检验。以上检验以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 大鼠体质量:造模前各组大鼠体重量无显著差异，造模中期、造模后期：与空白组比较，模型组、附子多糖组、氟西汀组体质量下降，差异有统计学意义(P<0.0.5)；附子多糖组、氟西汀组大鼠体质量较模型组增加。

表1 造模前后各组大鼠体重量±s)

*与空白组比较，P<0.0.5

2.2 行为学观察：与空白组比较，模型组、氟西汀组游泳不动时间延长，差异有统计学意义(P<0.0.5)；与模型组比较，空白组、附子多糖组游泳不动时间缩短，差异有统计学意义(P<0.0.5)；与附子多糖组比较，模型组、氟西汀组游泳不动时间延长，差异有统计学意义(P<0.0.5)；氟西汀组游泳不动时间小于模型组。

表2 4组大鼠游戏不动时间±s)

*与空白组比较P<0.05；#与模型组比较P<0.05；△与附子组比较P<0.05

2.3 海马组织形态学观察：实验结果显示慢性应激引起海马形态结构发生改变，主要表现在模型组大鼠海马神经元细胞数量减少，排列稀疏、细胞核变形和固缩(见图b)。空白对照组大鼠海马神经元细胞数量较多，排列较整齐、密集，细胞核结构完整，清晰可见(见图a)。附子多糖组和氟西汀组海马神经元细胞的变化介于空白对照组和模型组之间(见图c、图d)。

图1 海马组织形态学观察(苏木精-伊红染色,×40)

3 讨 论

本实验采用的模型是国际上公认的抑郁症模型，经行为学评分测定，证实该模型基本模拟了抑郁症患者的快感缺乏，兴趣缺失，精神运动迟滞等抑郁表现，而且据文献报道这种慢性应激引起的抑郁状态及行为异常可保持数月，这就为抗抑郁剂的应用及其药效学和作用机理的研究提供了可能。

本实验结果表明，与空白组比较、造模后大鼠体质量下降，差异有统计学意义，经治疗后附子多糖组、氟西汀组体质量较模型组增加。行为学观察：与空白组比较、模型组游泳不动时间延长，差异有统计学意义；与模型组比较、附子多糖组游泳不动时间缩短，差异有统计学意义，提示附子对抑郁大鼠的行为有改善作用。

海马是边缘系统重要组成部分，参与情绪、学习和记忆、行为、免疫等的调节，它的损伤在各种应激所致疾患中起到关键作用。临床和临床前实验研究表明海马结构和功能的改变涉及抑郁症的病理生理学过程，功能性影像学研究提示抑郁症患者前额叶皮质、腹侧纹状体和海马的体积减少[6,7]。本实验海马形态学观察表明与模型组比较，附子多糖组、氟西汀组海马神经元细胞数量较多，排列较整齐、密集，细胞核结构较完整，提示附子多糖具有促进神经元再生的作用。

[1] 江开达．抑郁防治指南障碍[M]．北京：大学医学出版社，2007.3～4.

[2] 黄泉智,孙志高,许成勇,等.舒郁宁心汤对抑郁模型大鼠行为及海马形态结构的影响[J].中国中医急症,2011,20(8):1250～1251.

[3] Yan HC， Cao X， Das M， et al. Behavioral animal models of depression[J].Neurosci Bull，2010,26( 4) : 327～ 337.

[4] Wu HH， Wang S. Strain differences in the chronic mild stress animal model of depression[J].Behav Brain Res，2010,213(1) : 94～102.

[5] Petit-demouliere B， Chenu F， Bourin M． Forced swimming test in mice：a review of antidepressant activity[J].Psychopharmacology (Berl)，2005，177(3)：245～255.

[6] Perry D，Hendler T ，Sham ay-Tsoory SG ．Projecting memories：the role of the hippocampus in emotional mentalizing[J].Neuroimage，2011,54(2 )：1669 ～1676．

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1006-6233(2017)06-1029-03

广东省科技厅计划项目，(粤科规划字[2015]110号，编号：2014A020212398)

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10.3969/j.issn.1006-6233.2017.06.046