分光光度计的检定与使用需注意问题探究

朱敏辉（安徽省铜陵市质量技术监督稽查支队，安徽 铜陵 244000）

分光光度计的检定与使用需注意问题探究

朱敏辉（安徽省铜陵市质量技术监督稽查支队，安徽 铜陵 244000）

分光光度计的检定能保证其计量的准确性，防止出现计量结果的误差，也会影响到工作质量。本文从四个方面分析了分光光度计检定和使用过程中需要注意的问题，结合工作经验，更好的遵循相关检定规程，防止计量误差的出现，希望本文的研究能为分光光度计的检定和使用工作提供一定的帮助。

分光光度计；检定；使用；注意问题

随着我国科学技术的发展，分光光度计类型的仪器品种也越来越多，不同的分光光度计计量性能有着显著的差异，无论是哪一种的分光光度计，计量结果的准确性都至关重要，以免影响到测试数据的准确性。在分光光度计的检定和使用过程中，需要保证检定数据的准确，防止出现误差。

1 波长最大允许误差与重复性检定

紫外可见分光光度计的波长最大允许误差就是在检定过程中，波长的变化范围，一般的紫外可见分光光度计需要控制在（±0.2～±1）nm之间。针对不同类型的检定仪器，也会有不同的检定效果，氘灯对于波长的要求在365nm之前并没有明显的谱线变化，而超过这一数值之后，能准确的分辨谱线，不过强度较低，而在检查波长过程中，最为准确的波长值在486.0nm和656.1nm上，因此利用氘灯检定紫外可见分光光度计，一般都选择这两条波长线，保证最佳的检定效果。除了氘灯可以检定紫外可见分光光度计之外，汞灯也同样能完成这一工作，汞灯本身的光学基础较好，谱线较为分立，也更为清晰，在紫外可见分光光度计的检定和校准过程中，效果较好，但是操作起来较为繁琐，受到汞灯广元的限制，需要将汞灯点燃之后，固定在特殊位置上，尽可能居中照射在光栅上，一般常用的汞灯谱线波长在546.1nm。相比之下，镨钕滤光片或钬滤光片在操作上较为方面，在紫外可见分光光度计的检定过程中，使用频率较高，使用范围也较为广泛。

2 透射比最大允许误差与重复性检定

透射比最大允许误差能反映监测仪器对光测量的准确性，重复性检定需要检定人员在检定紫外可见分光光度计的过程中，需要重复测量任意一峰值吸光度的重复程度。紫外可见分光光度计在检定的过程中，随着检定仪器的测量范围的变化会出现准确度的变化，一般情况下为±0.0015A～±0.0005A，测光重复性一般为±0.001A～±0.002A。紫外可见分光光度计检定过程中，透射比最大允许误差检定可以分为两种方式，利用标准溶液或者标准滤光片都可以完成检定过程。在紫外可见分光光度计的实际检定过程中，经常会出现透射比的数值超出范围的情况，究其原因，并不是每次都是紫外可见分光光度计本身的准确度问题，很容易由于安装时出现误差或者是滤光片的外壳有细微变形，这些原因都不会影响到紫外可见分光光度计在计量时的准确度，因此也不影响检定结果。

3 最小光谱带宽、噪声与漂移、基线平直度检定

最小光谱的带宽主要是由于检定仪器所带广元发射的光谱线，单色光通过细缝后出现的波峰就可以确定谱宽，具体测量细缝，也可以确定仪器的分辨力。选择单光栅和双光栅检定紫外可见分光光度计时，检定过程并不同，确定最小谱宽的过程也有所差别。噪声和漂移主要是检定仪器在检定过程中，由于电源变化或者温度变化等，对检定仪器的准确度造成影响。对于紫外可见分光光度计的检定仪器，需要保证其漂移和吸光度符合要求，并且两个因素都不可或缺，共同决定了检定结果的准确性。基线平直度能反映不同波长的光度噪声，这也是在紫外可见分光光度计检定过程中不可或缺的技术指标，也是影响检定准确性的因素，因此需要特别注意，这也决定了紫外可见分光光度计在不同波长范围内的检测标准和范围。影响基线平直度的原因很多，包括滤光片安装问题、滤光片清洁性、滤色片的切换、检定设备光源切换、扫描速度等，都会造成基线平直度的损坏。

4 关于杂散光的问题

紫外可见分光光度计的杂散光直接决定了其可靠性和工作可靠性，如果杂散光过多啊，那么就会影响到光谱图线条的连续性，严重影响到紫外可见分光光度计计量的准确性。杂散光可以认为是接收器除了规定波长范围内的其他波长的光，如果杂散光的波长和测量的波长相同，那么由于检测样品本身的反射，杂散光就会射到检测器上，而如果杂散光在波长范围之外，会受到灰尘、划痕等方面的影响，不能达到指定的检测器光线。

表1 灵敏度档和杂散光误差之间的关系表

从上表可以看出，如果检定过程中，对于分光光度计的灵敏度档过高，那么相应的杂散光误差也会增加，很容易由于电流的增大导致零位漂移，这样会造成严重的检定误差。因此在紫外可见分光光度计检定的过程中，都不应该使用较大档位的灵敏度档，保证检定结果的准确。

5 结语

综上所述，紫外可见分光光度计在检定的时候要遵循相关工作规范，避免由于检定误差而影响到分光光度计使用过程中的准确性。在分光光度计日常使用的过程中，需要加强对其的日常维护，保证工作环境温度恒定，定期做好清洁防尘工作，保证分光光度计的最佳工作状态。

[1]许美云.分光光度计使用中需注意的问题[J].烟草科技, 1995,03:27-28.

[2]王平宜.分光光度计检定和使用中应注意的问题[J].大众标准化,2011,S2:42-44.