7种杀菌剂对设施番茄晚疫病菌的室内毒力测定

相栋

摘要 采用菌丝生长抑制法室内测定了7种杀菌剂对番茄晚疫病菌的毒力。结果表明：供试的7种杀菌剂对番茄晚疫病菌丝生长都有一定的抑制作用，化学杀菌剂23.4%双炔酰菌胺悬浮剂对番茄晚疫病菌毒力最强，其 EC50值为 0.37 μg/mL；其次是58%甲霜·锰锌可湿性粉剂，其 EC50值为 1.07 μg/mL；80%烯酰吗啉水分散粒剂的毒力最差，其 EC50值为 2093.97 μg/mL；生物杀菌剂解淀粉芽孢杆菌生防菌株 B-1619和枯草芽孢杆菌Bs Y1336均对番茄晚疫病菌均有很强的抑菌活性。因此，23.4%双炔酰菌胺悬浮剂、解淀粉芽孢杆菌生防菌株 B-1619和枯草芽孢杆菌Bs Y1336为理论上防治番茄晚疫病菌抑菌效果较好的药剂，用量少且毒性低，验证后可在生产中推广使用。

关键词 设施番茄；杀菌剂；番茄晚疫病菌；毒力测定

中图分类号 S482.2 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2016）16-0106-02

番茄晚疫病（Phytophthora infestans）是由卵菌（Oomycete）[1]中的致病疫霉[Phytophthora infestans（Mont.）de Bary] 侵染所致，是全世界番茄和马铃薯生产上的重大病害之一[2]，严重威胁番茄生产[3]。从20世纪80年代开始，西藏大面积新建温室或大棚进行设施蔬菜生产，极大地满足了当地人民对各种蔬菜的需求，西藏蔬菜播种面积由1985年占当年农作物播种面积的1.61%提高到2011年的9.49%[4]。设施条件下番茄和马铃薯的栽培四季不断，从而给病原菌提供了合适的发生和传播条件、场所，现已成为周年发生的重要病害之一，造成极大的经济损失。生产上对该病害的防治仍主要依靠化学农药，但化学农药的长期使用易造成病原菌抗药性增强，研究表明，许多国家出现某一类药剂的致病疫霉抗性群体[5-6]，同时一味地增加化学农药的用量和次数，不仅增加成本，还造成番茄产品的农药残留超标。为此，必须在有效控制番茄病害的同时，尽可能减少化学农药使用[7]，因此，本试验以西藏设施番茄晚疫病菌为对象，通过室内毒力测定，筛选出几种对该病菌抑制作用较好的杀菌剂，以期为该病害的田间防治提供参考，减轻农业生产中的损失。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 供试病原菌株。2015年5—9月采自西藏林芝市各地具有典型晚疫病的番茄病样，带至西藏大学农牧科学院植物病理学与微生物学实验室，在黑麦培养基上进一步分离、鉴定，获得的纯培养菌株。

1.1.2 供试药剂。试验选择了生产上可购买到、防治番茄晚疫病常用的杀菌剂，包括化学杀菌剂：64%恶霜灵·锰锌可湿性粉剂（瑞士先正达作物保护有限公司生产）、80%烯酰吗啉水分散粒剂（陕西万邦生物科学技术有限公司生产）、23.4%双炔酰菌胺悬浮剂（瑞士先正达作物保护有限公司生产）、50%腐霉利可湿性粉剂（海南正业中农高科股份有限公司生产）、58%甲霜·锰锌可湿性粉剂（青岛孚润德植保科技有限公司）；新型生物杀菌剂：1×1010 cfu/g枯草芽孢杆菌Bs Y1336（台湾百泰生物科技股份有限公司）、1.2×108 cfu/g解淀粉芽孢杆菌生防菌株 B-1619（江苏省农业科学院植物保护研究所研制，江苏省苏科农化有限公司生产），共7种。

1.1.3 供试培养基。黑麦蔗糖培养基：取50 g黑麦种子在适量去离子水中浸泡24～36 h，捣碎机捣碎，55～60 ℃水浴1～2 h，经2层纱布过滤，上清液补水至1 L，加入蔗糖20 g、琼脂粉15 g，121 ℃高压蒸汽灭菌。

1.2 测定方法

采用菌丝生长速率法[8]测定7种供试药剂对番茄晚疫病菌菌丝生长的抑菌活性。在预试验的基础上，将供试药剂配制成一定浓度的母液，然后按一定浓度和比例加入到融化好的黑麦培养基，制成含药量为 0.5、10、50、200、500 mg/L的含药平板培养基。用5 mm打孔器在预培养的菌落边缘的同一圆周上打取菌饼，菌丝面朝下接种到含药培养基平板中央，每个浓度4次重复，以不含药剂加等量无菌水的黑麦培养基为空白对照。在 18 ℃恒温培养箱黑暗培养7 d后，采用十字交叉法测定菌落直径并记录。根据以下公式计算生长抑制率：

1.3 数据分析

利用spss软件统计分析，求出各药剂对供试病菌的毒力回归曲线方程y=a+bx、相关系数r以及有效抑制中浓度（EC50）。最后根据EC50值，比较不同药剂对该菌生长的影响。

2 结果与分析

由表1可知，供试药剂均对番茄晚疫病菌表现出一定的抑制作用。不同杀菌剂或同一杀菌剂的不同浓度之间表现出不同的杀菌效果。64%恶霜·锰锌可湿性粉剂、585甲霜·锰锌可湿性粉剂、23.4%双炔酰菌胺悬浮剂、枯草芽孢杆菌Bs Y1336、解淀粉芽孢杆菌生防菌株 B-1619在所设置浓度下对致病疫霉的抑制效果差异非常明显，说明番茄晚疫病菌对不同浓度的这几种药剂敏感性差异极显著，即在防治中不同药剂浓度的防治效果差别明显。杀菌剂对病菌的EC50值代表杀菌剂对番茄晚疫病菌的毒力高低，由表2可知，5种供试化学杀菌剂中，23.4%双炔酰菌胺悬浮剂对番茄晚疫病菌毒力最强，其 EC50值为 0.37 μg/mL；其次是58%甲霜·锰锌可湿性粉剂，其 EC50值为 1.07 μg/mL；80%烯酰吗啉水分散粒剂的毒力最差，其 EC50值为2 093.97 μg/mL。供试的 2种生物杀菌剂中，解淀粉芽孢杆菌生防菌株 B-1619对番茄晚疫病菌的抑菌活性优于枯草芽孢杆菌Bs Y1336，但两者对番茄晚疫病菌均有很强的抑菌活性。

3 结论与讨论

本试验通过室内毒力测定筛选出了几种对番茄晚疫病较为敏感的杀菌剂，为该病害的防治提供了理论依据。室内毒力测定可以比较几种药剂毒力的大小，该结果可为田间试验提供依据。化学药剂是控制番茄晚疫病发生和减少损失的有效途径之一。目前，在防治卵菌上的效剂主要用苯基酰胺类杀菌剂（PAFs）[9]，该类杀菌剂的典型药剂为甲霜灵，其次为烯酰吗啉（DMM），并且烯酰吗啉与苯基酰胺类药剂无交互抗性[10]。本次室内毒力测定试验选择的药剂中，23.4%双炔酰菌胺悬浮剂和58%甲霜·锰锌可湿性粉剂理论上为防治番茄晚疫病较好的化学杀菌剂，由陕西万邦生物科学技术有限公司生产的80%烯酰吗啉水分散粒剂与张成玲等[11]测定的毒力效果相差较大，说明不同厂家生产的药剂质量有明显差异；解淀粉芽孢杆菌生防菌株 B-1619和枯草芽孢桿菌Bs Y1336 2种生物杀菌剂对番茄晚疫病菌均有很强的抑菌活性。但总的看来，本试验所选用的各药剂除80%烯酰吗啉水分散粒剂和50%腐霉利可湿性粉剂外，其余5种菌剂对番茄晚疫病菌均具有较显著的抑菌活性，并且烯酰吗啉还有待进一步验证，在该病害的药剂防治中可据情况选用。

本试验所选化学类杀菌剂均为本地区市场上易购药剂，室内的毒力测定结果仅仅说明杀菌剂与病原菌直接接触时，药剂对病原菌丝生长的抑制作用，其优点是条件易于控制、操作简便迅速，但不能完全显示不同药剂对病菌孢子萌发的抑制及田间防治效果，也不能反映出药剂的渗透能力及内吸性等，所以这些药剂还需要在大田中进一步试验筛选后推广应用。

4 参考文献

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