新生仔猪黄曲霉毒素与玉米赤霉烯酮中毒的处理

李艳青，朱秀高

（1.潍坊科技学院生物研发中心，山东寿光 262700；2.武汉回盛生物科技股份有限公司，武汉 430042；3.中国农业大学动物医学院，北京 100000）

新生仔猪黄曲霉毒素与玉米赤霉烯酮中毒的处理

李艳青1，朱秀高2,3

（1.潍坊科技学院生物研发中心，山东寿光 262700；2.武汉回盛生物科技股份有限公司，武汉 430042；3.中国农业大学动物医学院，北京 100000）

霉菌毒素中毒在目前养猪生产中较为常见，通过临床调查和实验室分析，确认华南地区某猪场出现的新生仔猪头骨发育不全和阴户红肿是由黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮中毒引起，并针对此问题提出换料、解毒等处理措施，这是近20年来我国首次报道在同一猪场同时出现黄曲霉毒素与玉米赤霉烯酮导致新生仔猪中毒且引起发育畸形的情况。

黄曲霉毒素；玉米赤霉烯酮；头骨发育不全；阴户红肿；新生仔猪

饲料及其原料污染的霉菌在生长过程中分泌产生的代谢产物——霉菌毒素被畜禽摄入后根据剂量的差异能够造成程度不等的临床症状，急性中毒多导致畜禽的直接死亡，慢性中毒的症状因毒素类型不同而有不同表现。黄曲霉毒素（AFT）中毒多表现肝脏肿大、赭曲霉毒素（OTA）中毒经常会出现石灰尿、伏马毒素（FB）毒会导致肺水肿、呕吐毒素（DON）中毒表现为呕吐、玉米赤霉烯酮（ZEA）中毒主要病变表现在生殖系统，此外还有一些普遍性症状，如免疫抑制、繁殖性能下降和增重缓慢等。每一种霉菌毒素均是由相应的霉菌产生，临床上饲料污染的霉菌经常是多种混合出现，因此多种霉菌毒素的共同作用是临床上处理霉菌毒素中毒时需要重点注意的问题。2016年4月上旬，华南地区某存栏800多头母猪的猪场负责人反应场内产房中近两个月内分娩仔猪存在问题，经过临床调查和实验室检测确认是由黄曲霉毒素和玉米赤霉烯酮共同中毒引起，现将情况报告如下。

1 发病情况

仔猪头骨发育不全见图1，产房仔猪阴户红肿见图2。

该猪场属于某养殖集团的分场，存栏母猪800多头，产房负责人反应近期共分娩40多窝，共有6头仔猪出现头骨发育不全，每窝平均3头母猪为阴户红肿。现场观察发现，头骨发育不全的患猪主要表现为额骨缝没有闭合、脑组织凸出于颅腔之外、突出的脑膜呈充血状态（图1）；小母猪表现为阴户发红肿胀（图2），除头骨发育不全的仔猪外，其他仔猪均能正常吃奶、精神状态无异常。

图1 仔猪头骨发育不全

图2 产房仔猪阴户红肿

在饲料房内发现料仓内的玉米霉变明显，表现为破粒、碎粒多、杂质多、玉米粒胚芽部分有明显的发黑等情况，霉变率约占到15%。

2 诊断

采集该猪场的玉米、麸皮及妊娠母猪饲料各3份送实验室检测。

2.1 材料与方法

2.1.1 试验材料

饲料：玉米（1～3号）、麸皮（4～6号）和妊娠母猪料（7～9号）。

检测试剂：AFB1ELISA检测试剂盒、ZEA ELISA检测试剂盒和OTA ELISA检测试剂盒均购自南京柏发生物公司。

仪器：DYF-400A摇摆式高速粉碎机、SCQ-5201B超声波提取仪、Thermo Multiskan FC型酶标仪。

2.1.2 试验方法

AFB1检测：分别取9种样品各500 g粉碎后过20目筛，称取每种各5 g样品分别放于9个100 mL具塞三角瓶，向其中加入25 mL甲醇水溶液（1 ϑ 1），振荡15 min、过滤，弃去1/4初滤液后收集滤液作为样品提取液，用样品稀释液将样品提取液稀释后制成待测液，取待测液50 μL加入微孔中进行ELISA测定，在450 nm处测定各孔的吸光度，按说明书中的方法计算各样品中AFB1的含量。

ZEA检测：从上述粉碎样品中秤取每种各5 g样品分别放于9个150 mL具塞三角瓶，向其中加入25 mL甲醇水溶液（6 ϑ 4），用超声波提取10 min，静置5 min，用定量滤纸快速过滤、收集滤液。取5 mL滤液用样品稀释液做10倍稀释制成待测液，取待测液50 μL加入微孔中进行ELISA测定，在450 nm处测定各孔的吸光度，按说明书中的方法计算各样品中ZEA的含量。

OTA检测：从上述粉碎样品中秤取每种各5 g样品分别放于9个150 mL具塞三角瓶中，向其中加入25 mL甲醇水溶液（7 ϑ3），用超声波提取10 min，静置5 min，用定量滤纸快速过滤、收集滤液。取5 mL滤液用样品稀释液做7倍稀释制成待测液，取待测液50 μL加入微孔中进行ELISA测定，在450 nm处测定各孔的吸光度，按说明书中的方法计算各样品中OTA的含量。

2.2 试验结果

送检饲料的霉菌毒素检测结果见表1。

从表1可以看出，AFB1的检测中玉米的结果低于国家标准，而麸皮和母猪饲料的结果高于国标，且母猪饲料中的结果超过国标最高达100倍；ZEA的检测中玉米和母猪饲料的结果高于国标，最高分别为2倍和5倍，麸皮的结果低于国家标准；OTA检测中3种样品的结果均低于国家标准。

根据上述结果，能够确定该猪场饲料中霉菌毒素严重超标，玉米的ZEA、麸皮的AFB1超过国家标准的限量要求，使用此两种原料配制的妊娠母猪全价料中AFB1和ZEA含量均显著超过国家标准，最高分别为100倍和5倍。

表1 送检饲料的霉菌毒素检测结果μg·kg-1

3 处理与分析

根据临床调查和实验室检测结果，确认本次发病是由母猪饲料中AFB1和ZEA中毒引起。建议猪场采取以下措施进行处理：立即停用被污染饲料及原料，更换为检测合格的饲料；饮水中加入葡萄糖，连续饮水15 d；饲料中加入含酵母细胞壁和改性蒙脱石的脱霉剂以及含多种维生素和必需氨基酸添加剂。

霉菌毒素被猪摄入后因毒素类型不同而产生不同的症状。本病例中初生仔猪的阴户红肿是由ZEA中毒引起，该毒素具有类雌激素的作用，被猪摄入后会引起以生殖系统为主的一系列病变，母猪表现为外观可见的阴户红肿、乳房肿胀等类似母猪发情时的症状，公猪会由于睾丸间质细胞的机能和结构受到损伤而主要表现为睾丸萎缩、精子质量下降和性欲降低等[1-5]。怀孕母猪饲料中ZEA含量超标后严重的可引起流产、死胎，常见的多为初生仔猪阴户红肿。如果哺乳母猪日粮中存在ZEA的过量则会通过乳汁继续传给仔猪引起症状的加剧。AFB1具有明显的“三致”（致癌、致畸、致突变）作用，主要靶器官是肝脏，引起肝细胞变性、坏死，胆管增生和肝功能障碍，临床表现为生长速度下降，严重的可导致肝癌。史莹华等用0.1 mg·kg-1的添加量给仔猪饲喂AFB1约90 d后发现，实验猪的日增重与对照猪相比降低了12.9%、料重比提高了7.54%，实验猪组织学病变主要为肝细胞发生严重的颗粒变性和脂肪变性，肝窦内有淋巴细胞浸润，小叶中央静脉周围肝细胞凝固性出血和坏死，肝脏显著结节性增生，肝坏死[6]。此外，肝脏中大量与肝功能相关的胞内酶外流到血液中，如碱性磷酸酶（ALP）、谷丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶（GOT）和谷胱甘肽硫转移酶（GST），使肝脏的代谢功能下降，其中GST与肝脏解毒功能密切相关，肝脏中GST水平的下降，大大降低了肝脏的解毒能力，进一步加重了AFB1对肝细胞的损害[7]。目前有关AFB1致畸的报道不多，本案例中所见到的头骨发育不全，这种畸形从营养角度分析与VA缺乏有关，根据营养标准配合饲料额外添加满足需要量的VA，不会出现外源性VA供应不足，有资料报道黄曲霉毒素中毒可导致内源性VA的缺乏，可以判断畸形是由AFB1中毒和VA的内源性缺乏共同作用引起，其中AFB1中毒是主要因素。

4 结论

处理霉菌毒素引起的中毒时应该遵循解毒和脱离中毒环境即换用没有毒素污染的饲料两条主要原则。生产中的应用和研究实验证实脱霉剂对控制饲料中的霉菌毒素具有良好的有效的作用，因此养猪生产中要向饲料内加入脱霉剂以减轻霉菌毒素对猪只的损害，同时对于中毒猪要及时通过增强肝脏的代谢功能来减轻毒素对机体的损害。

[1]杨在宾,姜淑贞,杨维仁.玉米赤霉烯酮对断奶仔猪毒性机理研究进展[C].动物营养研究进展,2012,28（2）:89-91.

[2]王青,周丹朝,赵煜,等.玉米赤霉烯酮的生殖毒性研究进展[J].畜牧兽医杂志,2014,33（4）:32-35.

[3]郑王龙,刘青,王亚军,等.玉米赤霉烯酮对小鼠睾丸间质细胞线粒体的损伤作用[J].中国兽医学报,2014,34（7）:1 157-1 161.

[4]郑王龙,刘青,王亚军,等.玉米赤霉烯酮对小鼠睾丸间质细胞内StAR蛋白及类固醇合成关键酶表达的影响[J].畜牧兽医学报,2014,45（7）:1 091-1 096.

[5]王宜安,黄沁怡,徐辉,等.玉米赤霉烯酮对TM3细胞原癌基因及细胞间隙连接通讯的影响[J].中国兽医学报,2015,35（3）:467-471.

[6]史莹华,姚惠霞,张伟毅,等.黄曲霉毒素对猪生长性能及内脏器官的影响[J].中国兽医学报,2011,31（2）:249-252.

[7]史莹华,方丽云,孙宇,等.黄曲霉毒素对猪生长性能及肝脏功能的影响[J].西北农林科技大学学报:自然科学版,2007,35（6）: 55-59.

Treatment of Aflatoxin and Zearalenone Poisoned Newborn Piglets

LI Yanqing1,ZHU Xiugao2,3

（1.Weifang Institute of Technology,Bioresearch Center,Shouguang 262700,Shandong China; 2.Wuhan Hui Sheng Biotechnology Co.,Ltd.,Wuhan 430042,China; 3.College of Veterinary Medicine,China Agricultural University,Beijing 430042,China）

The mycotoxin poisoning was common in pig feeding production.The newborn piglets skull hypopla⁃sia and vulva swelling were caused by aflatoxin B1and zearalenone poisoning in southern China through the clinical in⁃vestigation and analysis of laboratory.And put forward refueling and detoxification treatment measures to solve this problem.Aflatoxin and zearalenone in newborn piglets poisoning leaded to deformity in the same farm,which was re⁃ported for the first time in recent 20years.

aflatoxin;zearalenone;skull hypoplasia;vulva swelling;newborn piglets

S 828；R379

A

1001-0084（2017）05-0029-03

2017-03-22

李艳青（1983-），女，山东泰安人，博士，副教授，研究方向为兽医病理。